论文目录 | |
中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一部分:宿主因子Naf1调控HIV-1 复制 | 第9-36页 |
1 引言 | 第9-12页 |
2 实验材料和方法 | 第12-18页 |
· 细胞与病毒 | 第12页 |
· 质粒构建 | 第12-13页 |
· 细胞质粒转染和病毒感染实验 | 第13页 |
· HIV-1 RNA的核质分离 | 第13-14页 |
· 免疫印迹(Western blotting) | 第14页 |
· 免疫共沉淀(Co-IP) | 第14-15页 |
· RNA提取和反转录 | 第15-16页 |
· 荧光实时定量PCR(qRT-PCR) | 第16页 |
· 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第16-17页 |
· 细胞毒性试验( MTT Assay) | 第17页 |
· 激光共聚焦显微镜实验和图像分析 | 第17页 |
· 数据统计分析 | 第17-18页 |
3 实验结果 | 第18-28页 |
· Naf1是HIV-1 复制依赖因子 | 第18-20页 |
· Naf1能促进HIV-1 不完全剪切gag mRNA的出核 | 第20-22页 |
· Naf1与CRM1相互作用对Naf1的功能至关重要 | 第22-25页 |
· NES和NLS序列的突变削弱Naf1增强HIV-1 复制的功能 | 第25-28页 |
4 结论和讨论 | 第28-30页 |
5 参考文献 | 第30-36页 |
第二部分:树突状细胞激活潜伏HIV-1 的机制研究 | 第36-61页 |
1 引言 | 第36-39页 |
2 实验材料和方法 | 第39-42页 |
· 细胞与病毒 | 第39页 |
· 抗体和试剂 | 第39-40页 |
· HIV-1 潜伏C11细胞的激活 | 第40页 |
· siRNA干扰实验 | 第40页 |
· 流式细胞术(FACS) | 第40-41页 |
· RNA提取和反转录 | 第41页 |
· 荧光实时定量PCR(qRT-PCR) | 第41页 |
· 数据统计分析 | 第41-42页 |
3 实验结果 | 第42-51页 |
· 树突状细胞能激活潜伏HIV-1 | 第42-44页 |
· LPS刺激mDCs产生TNF-α 激活C11中潜伏HIV-1 | 第44页 |
· iDCs通过TNF-α 依赖机制激活C11中潜伏HIV-1 | 第44-46页 |
· iDCs通过CD40-CD40L信号通路激活C11中潜伏HIV-1 | 第46-49页 |
· AIDS相关病原体诱导iDCs成熟 | 第49-51页 |
4 结论和讨论 | 第51-55页 |
5 参考文献 | 第55-61页 |
专业综述 | 第61-99页 |
参考文献 | 第77-99页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第99-100页 |
附录 | 第100-102页 |
致谢 | 第102-104页 |