论文目录 | |
| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1 维管形成层的结构 | 第10-11页 |
| 2 维管形成层的起源与进化 | 第11-12页 |
| 3 维管形成层的个体发生 | 第12页 |
| 4 维管形成层的季节性活动 | 第12-14页 |
| 5 维管形成层在植物中的重要作用 | 第14-15页 |
| 6 形成层活动的研究系统 | 第15-16页 |
| · 百日草叶肉细胞离体培养系统 | 第15页 |
| · 拟南芥系统 | 第15页 |
| · 杨树系统 | 第15-16页 |
| · 损伤系统 | 第16页 |
| · 其他系统 | 第16页 |
| 7 组织切片技术及激光显微切割技术（LM） | 第16-18页 |
| · 组织切片技术 | 第16-17页 |
| · 石蜡切片法 | 第16-17页 |
| · 冰冻切片法 | 第17页 |
| · 激光显微切割技术 | 第17-18页 |
| · 冰冻切片技术与激光显微切割技术的结合在植物中的应用 | 第18页 |
| 8 植物激素对维管形成层生长的调控机理 | 第18-21页 |
| · 生长素 | 第18-19页 |
| · 细胞分裂素 | 第19-20页 |
| · 赤霉素（GA） | 第20-21页 |
| · 其他植物激素 | 第21页 |
| 9 植物干细胞调控研究进展 | 第21-27页 |
| · 茎尖分分生组织（SAM） | 第21-22页 |
| · 根尖分生组织（RAM） | 第22-23页 |
| · 维管形成层 | 第23-27页 |
| 第二章 杨树形成层细胞的激光显微切割和 RNA提取 | 第27-35页 |
| 引言 | 第27页 |
| 1 研究材料，试剂，仪器 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| · 冰冻切片不同的预处理方法 | 第28页 |
| · 植物材料的冰冻切片 | 第28-29页 |
| · 激光显微切割 | 第29页 |
| · 形成层细胞总 RNA 提取与纯化 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| · 不同的材料处理方法对冰冻切片的影响 | 第30-31页 |
| · 切片方法对激光切割的影响 | 第31页 |
| · 南林 95 杨休眠期及活动期形成层区冰冻切片及激光显微切割 | 第31-32页 |
| · 操作过程中对 RNA 的保护 | 第32-33页 |
| · 休眠期和活动期形成层的 RNA 提取 | 第33-35页 |
| 第三章 杨树形成层细胞的全基因组芯片检测与分析 | 第35-51页 |
| 1 研究材料 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-44页 |
| · 杨树采样策略 | 第35页 |
| · 基因芯片杂交实验 | 第35-42页 |
| · 基因芯片数据分析 | 第42页 |
| · 芯片结果实时定量 RT-PCR 验证 | 第42-44页 |
| · 第一链 cDNA 合成 | 第42-43页 |
| · 实时定量 PCR | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-51页 |
| · 杨树全基因组芯片的质量评价 | 第44页 |
| · 杨树全基因组芯片检测结果 | 第44-49页 |
| · GO 分析 | 第45页 |
| · KEGG 代谢通路分析 | 第45-47页 |
| · MIPS 功能分类 | 第47页 |
| · 差异表达基因拟南芥 MIPS 分类 | 第47-49页 |
| · 基因芯片结果的实时定量 RT-PCR 检测 | 第49-51页 |
| 第四章 杨树形成层发育差异表达基因功能分析 | 第51-72页 |
| 1 干细胞调控相关基因 | 第51-54页 |
| 2 寒冷，干旱抗性调控相关基因 | 第54-58页 |
| 3 木质素合成相关基因 | 第58-60页 |
| 4 细胞周期和 DNA 生物合成类基因 | 第60-72页 |
| 第五章 杨树形成层中PeWOX4的克隆，表达载体构建和基因转化 | 第72-110页 |
| 1 研究材料 | 第72-73页 |
| · 植物材料 | 第72页 |
| · 菌株与质粒 | 第72-73页 |
| · 试剂 | 第73页 |
| 2 实验方法 | 第73-87页 |
| · WOX4 基因 DNA 序列的克隆 | 第73-77页 |
| · WOX4 基因 cDNA 保守片段克隆 | 第77-79页 |
| · RACE 技术扩增 WOX4 基因末端 | 第79-81页 |
| · WOX4 基因的 cDNA 全长克隆 | 第81页 |
| · WOX4 基因表达模式分析 | 第81-83页 |
| · RNA 提取与反转录 | 第81-82页 |
| · 荧光实时定量 PCR 检测 WOX4 基因表达模式 | 第82-83页 |
| · WOX4-1 基因正义表达载体构建 | 第83-85页 |
| · 农杆菌介导的基因转化 | 第85-87页 |
| · 农杆菌 EHA105 感受态的制备 | 第85页 |
| · 植物表达载体转化农杆菌 EHA 105 感受态细胞 | 第85-86页 |
| · 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第86页 |
| · 转基因植物表型观测 | 第86-87页 |
| 3 结论与分析 | 第87-104页 |
| · PeWOX4-1，PeWOX4-2 基因 DNA 全长克隆 | 第87-90页 |
| · PeWOX4 基因 cDNA 全长克隆 | 第90-91页 |
| · PeWOX4 基因序列分析 | 第91-100页 |
| · PeWOX4 核酸序列分析 | 第91-96页 |
| · 氨基酸序列分析 | 第96-100页 |
| · PeWOX4 基因在杨树中的组织表达特异性分析 | 第100-101页 |
| · PeWOX4 基因在杨树形成层不同发育时期表达特异性分析 | 第101页 |
| · PeWOX4-1 正义表达载体构建 | 第101-103页 |
| · PeWOX4-1 全长 cDNA 序列的分离 | 第101-102页 |
| · PeWOX4-1 与 pBI121 植物表达载体的连接和转化 | 第102-103页 |
| · 转 PeWOX4-1 基因植株的检测与分析 | 第103-104页 |
| · 转基因植株抗性检测 | 第103页 |
| · 转基因拟南芥植株分子检测 | 第103页 |
| · 过量表达 PeWOX4-1 基因的拟南芥植株表型检测 | 第103-104页 |
| · 转 PeWOX4-1 基因拟南芥组织结构观察 | 第104页 |
| 4 讨论 | 第104-110页 |
| 第六章 结论与展望 | 第110-113页 |
| 1 主要结论 | 第110-112页 |
| · 形成层在休眠期大量表达抗性基因 | 第110页 |
| · 形成层在活动期大量表达细胞周期及 DNA 合成类基因 | 第110页 |
| · 形成层中可能存在类似 SAM 和 RAM 的干细胞调控网络 | 第110-111页 |
| · 杨树 WOX4 基因的克隆和表达情况 | 第111页 |
| · 杨树 WOX4 基因可引起拟南芥产生多茎现象 | 第111-112页 |
| 2 存在的不足及讨论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-122页 |
| 详细摘要 | 第122-126页 |
