论文目录 | |
摘要 | 第1-6
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Abstract | 第6-10
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目录 | 第10-14
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第1章 绪论 | 第14-44
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· 层孔菌的研究现状 | 第14-28
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· 天然产物抗肿瘤研究进展 | 第28-31
页 |
· 药用真菌产品开发的研究现状 | 第31-33
页 |
· 本文的立项依据、研究内容和意义 | 第33-35
页 |
· 参考文献 | 第35-44
页 |
第2章 层孔菌发酵菌粉的新药材研制 | 第44-68
页 |
· 引言 | 第44-45
页 |
· 材料 | 第45-46
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· 菌株与质粒 | 第45
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· 实验动物 | 第45
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· 瘤株 | 第45
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· 药品和试剂 | 第45
页 |
· 主要仪器 | 第45-46
页 |
· 方法 | 第46-52
页 |
· 层孔菌L8的鉴定 | 第46-48
页 |
· 菌种培养 | 第46-47
页 |
· 基因组的提取 | 第47
页 |
· PCR扩增IS1、IS2和5.8s rDNA | 第47-48
页 |
· 层孔菌L8的发酵工艺优化 | 第48
页 |
· 动物药效学实验 | 第48-49
页 |
· 层孔菌L8的药效成分初步分析 | 第49-51
页 |
· 胞内多糖的提取和测定 | 第49
页 |
· 发酵液中还原糖的测定 | 第49-50
页 |
· 总多酚的提取和测定 | 第50
页 |
· 甘露醇的提取和测定 | 第50-51
页 |
· 蛋白质的提取和测定 | 第51
页 |
· 腺苷的提取和测定 | 第51
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· 数据统计分析 | 第51-52
页 |
· 实验结果 | 第52-63
页 |
· 层孔菌L8的鉴定 | 第52-54
页 |
· 形态鉴定 | 第52
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· 分子生物学鉴定 | 第52-54
页 |
· 发酵工艺的优化结果 | 第54-62
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· 摇瓶工艺优化 | 第54-60
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· 15L发酵罐的工艺优化 | 第60-62
页 |
· 动物药效学实验的结果 | 第62-63
页 |
· 层孔菌L8的药效成分的初步分析 | 第63
页 |
· 讨论 | 第63-65
页 |
· 参考文献 | 第65-68
页 |
第3章 层孔菌抗肿瘤活性评价 | 第68-80
页 |
· 引言 | 第68-69
页 |
· 材料 | 第69-71
页 |
· 药材 | 第69
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· 细胞系 | 第69
页 |
· 药品和试剂 | 第69
页 |
· 主要实验设备 | 第69-71
页 |
· 方法 | 第71-72
页 |
· 提取物的制备 | 第71
页 |
· 细胞培养 | 第71
页 |
· 体外抗肿瘤活性测定 | 第71-72
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· 活性成分的分离纯化 | 第72
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· 化合物的结构鉴定 | 第72
页 |
· 数据统计分析 | 第72
页 |
· 实验结果 | 第72-77
页 |
· 层孔菌的体外抗肿瘤活性评价 | 第72-74
页 |
· 活性成分Hispolon的分离鉴定 | 第74-76
页 |
· Hispolon的抗肿瘤活性评价 | 第76-77
页 |
· 讨论 | 第77-78
页 |
· 参考文献 | 第78-80
页 |
第4章 Hispolon抗肿瘤的分子机制研究 | 第80-138
页 |
· Hispolon诱导胃癌细胞死亡的分子机理研究 | 第80-118
页 |
· 引言 | 第80-81
页 |
· 材料 | 第81-83
页 |
· 细胞系 | 第81
页 |
· 药品和试剂 | 第81-83
页 |
· 主要实验设备 | 第83
页 |
· 方法 | 第83-89
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· 细胞培养 | 第83-84
页 |
· Hispolon对细胞的生长抑制试验 | 第84
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· 细胞凋亡检测 | 第84-85
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· Caspase活性的检测 | 第85-86
页 |
· 线粒体膜电位的检测 | 第86
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· 线粒体膜脂质过氧化的检测 | 第86
页 |
· 线粒体膜完整性的检测 | 第86-87
页 |
· 活性氧自由基(ROS)的检测 | 第87
页 |
· 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第87
页 |
· 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的检测 | 第87-88
页 |
· 蛋白免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达 | 第88-89
页 |
· 数据统计分析 | 第89
页 |
· 实验结果 | 第89-117
页 |
· Hispolon对肿瘤细胞生长的抑制 | 第89-91
页 |
· Hispolon引发了胃癌细胞SGC-7901发生凋亡 | 第91-95
页 |
· Hispolon诱导了Caspase依赖性的凋亡 | 第95-98
页 |
· Hispolon诱导的凋亡是通过线粒体途径介导的 | 第98-102
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· 活性氧自由基(ROS)引发了Hispolon诱导的凋亡 | 第102-110
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· Hispolon对GSH抗氧化系统的影响 | 第110-115
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· Hispolon对其它胃癌细胞的影响 | 第115-117
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· 讨论 | 第117-118
页 |
· Hispolon对化疗药物的增敏作用 | 第118-134
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· 引言 | 第118
页 |
· 材料 | 第118-121
页 |
· 细胞系 | 第118
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· 药品和试剂 | 第118-120
页 |
· 主要实验设备 | 第120-121
页 |
· 方法 | 第121-123
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· 细胞培养 | 第121
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· 药物处理 | 第121
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· 体外细胞生长抑制试验 | 第121-122
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· 活性氧自由基(ROS)的检测 | 第122
页 |
· 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第122
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· 数据统计分析 | 第122-123
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· 实验结果 | 第123-132
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· Hispolon对化疗药物的增敏作用 | 第123-127
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· Hispolon对化疗药物的增敏机制 | 第127-132
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· 讨论 | 第132-134
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· 参考文献 | 第134-138
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第5章 结论与展望 | 第138-142
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本文的创新点 | 第140-141
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本文的不足及对后续工作的建议 | 第141-142
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攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第142-144
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致谢 | 第144
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