论文目录 | |
| 缩略词表 | 第1-6
页 |
| 中文摘要 | 第6-8
页 |
| 英文摘要(ABSTRACT) | 第8-10
页 |
| 第一部分 SIRPα在小鼠神经发育过程中的表达 | 第10-40
页 |
| 前言 | 第10-12
页 |
| 试剂与仪器 | 第12-15
页 |
| 1 材料 | 第12
页 |
| 2 主要化学药品和试剂 | 第12-14
页 |
| 3 主要实验仪器 | 第14-15
页 |
| 实验方法 | 第15-28
页 |
| 1 小鼠胚胎模型建立 | 第15
页 |
| 2 取材和切片 | 第15-16
页 |
| 3 感受态细胞制备 | 第16
页 |
| 4 质粒转化 | 第16
页 |
| 5 质粒小量抽提 | 第16
页 |
| 6 质粒大量抽提 | 第16-17
页 |
| 7 GST-SIRPα跑内区片段融合蛋白质体外表达和纯化 | 第17-18
页 |
| 8 兔抗人SIRPα胞内区抗体的制备、纯化和鉴定 | 第18-21
页 |
| 9 抗SIRPα跑内区抗体对小鼠脑组织切片行免疫组织化学染色 | 第21-22
页 |
| 10 组织总蛋白提取和浓度测定 | 第22-23
页 |
| 11 Western Blot | 第23
页 |
| 12 SIRPα引物设计 | 第23
页 |
| 13 SIRPα胞内区序列正义和反义RNA探针合成 | 第23-26
页 |
| 14 原位杂交检测SIRPα表达 | 第26-28
页 |
| 实验结果 | 第28-36
页 |
| 1 兔抗SIRPα抗体的制备、纯化与鉴定 | 第28-29
页 |
| 2 SIRPα原位杂交探针制备 | 第29-31
页 |
| 3 SIRPαmRNA在小鼠脑组织中的表达定位 | 第31-33
页 |
| 4 SIRPα蛋白在脑组织中的定位 | 第33-34
页 |
| 5 SIRPα在脑发育过程中的表达改变 | 第34-36
页 |
| 讨论 | 第36-38
页 |
| 文献 | 第38-40
页 |
| 第二部分 SIRPα在PC12神经分化过程中的作用研究 | 第40-69
页 |
| 前言 | 第40-41
页 |
| 试剂和仪器 | 第41-44
页 |
| 1 材料 | 第41-42
页 |
| 2 主要试剂配置 | 第42-43
页 |
| 3 主要仪器 | 第43-44
页 |
| 实验方法 | 第44-50
页 |
| 1 PC12细胞培养 | 第44
页 |
| 2 建立SIRPαWT基因稳定转染PC12细胞系 | 第44-47
页 |
| 3 细胞增殖实验 | 第47-48
页 |
| 4 NGF诱导PC12细胞神经分化分析 | 第48
页 |
| 5 荧光素酶报告基因分析 | 第48
页 |
| 6 免疫沉淀 | 第48-49
页 |
| 7 细胞免疫荧光染色 | 第49-50
页 |
| 实验结果 | 第50-60
页 |
| 1 SIRPα在NGF诱导PC12细胞神经分化后的表达 | 第50-51
页 |
| 2 稳定表达野生型SIRPαPC12细胞系的建立和鉴定 | 第51-52
页 |
| 3 稳定转染SIRPαPC12细胞增殖能力检测 | 第52-54
页 |
| 4 SIRPα对NGF刺激PC12细胞神经分化反应的影响 | 第54
页 |
| 5 SIRPα胞内区缺失突变体对NGF刺激的PC12神经分化的影响 | 第54-57
页 |
| 6 SIRPα表达对PC12细胞中NF-κB活化的影响 | 第57-58
页 |
| 7 SIRPα对PC12细胞中MAPK通路活化的影响 | 第58-59
页 |
| 8 SIRPα对NGF诱导PC12细胞神经分化过程中ankyrin重复结构域蛋白 | 第59-60
页 |
| Gankyrin蛋白表达的调节 | 第59-60
页 |
| 讨论 | 第60-66
页 |
| 1 NGF刺激PC12细胞神经分化后SIRPα表达上调的意义 | 第60-62
页 |
| 2 SIRPα对NGF诱导PC12细胞形态分化过程的抑制及其意义 | 第62-64
页 |
| 3 SIRPα对NGF诱导PC12细胞形态分化抑制的机制 | 第64-65
页 |
| 4 SIRPα对PC12细胞中NF-κB活性的调节 | 第65
页 |
| 5 SIRPα对NGF诱导不同信号传导通路的不同效应 | 第65-66
页 |
| 6 SIRPα对NGF诱导神经分化过程中Gankyrin表达上调的促进 | 第66
页 |
| 文献 | 第66-69
页 |
| 第三部分 Gankyrin在NGF诱导PC12神经分化过程中的表达调控研究 | 第69-83
页 |
| 前言 | 第69-70
页 |
| 试剂与仪器 | 第70-71
页 |
| 1 材料 | 第70-71
页 |
| 2 主要化学药品和试剂 | 第71
页 |
| 3 主要实验仪器(同第二部分) | 第71
页 |
| 实验方法 | 第71-74
页 |
| 1 小鼠胚眙模型建立、取材和免疫组化石蜡包埋切片(同第一部分) | 第71
页 |
| 2 组织总蛋白提取和浓度测定(同第一部分) | 第71
页 |
| 3 抗Gankyrin抗体对小鼠脑组织切片行免疫组织化学染色 | 第71-72
页 |
| 4 NGF刺激PC12细胞及MAPK激酶抑制剂处理 | 第72-74
页 |
| 5 Western Blot分析(同第一和第二部分) | 第74
页 |
| 实验结果 | 第74-79
页 |
| 1 Gankyrin在小鼠脑发育过程中的表达改变 | 第74-75
页 |
| 2 Gankyrin在脑组织中表达定位 | 第75-76
页 |
| 3 Gankyrin在神经发育过程中表达调控机制 | 第76-79
页 |
| 讨论 | 第79-81
页 |
| 文献 | 第81-83
页 |
| [综述一] | 第83-95
页 |
| 信号调节蛋白研究进展 | 第83-95
页 |
| [综述二] | 第95-112
页 |
| Current understanding of the signal transduction in HCC | 第95-112
页 |
| 致谢 | 第112
页 |
