论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8
页 |
| Abstract | 第8-13
页 |
| 前言 | 第13-18
页 |
| 参考文献 | 第16-18
页 |
| 第一部分 大鼠骨髓间质干细胞的分离培养和鉴定 | 第18-31
页 |
| 实验一、大鼠骨髓间质干细胞的分离和培养 | 第18-22
页 |
| 1、实验动物 | 第18
页 |
| 2、实验试剂 | 第18
页 |
| 3、实验设备 | 第18
页 |
| 4、实验步骤 | 第18-19
页 |
| 5、培养结果 | 第19-22
页 |
| 实验二、大鼠骨髓间质干细胞的鉴定 | 第22-26
页 |
| 1、试剂 | 第22
页 |
| 2、方法 | 第22
页 |
| 3、结果 | 第22-26
页 |
| 讨论 | 第26-28
页 |
| 参考文献 | 第28-31
页 |
| 第二部分 腺病毒和慢病毒载体感染骨髓间质干细胞的比较 | 第31-44
页 |
| 材料和方法 | 第31-33
页 |
| 结果 | 第33-38
页 |
| 讨论 | 第38-42
页 |
| 参考文献 | 第42-44
页 |
| 第三部分 人骨形态发生蛋白2基因(hBMP2)的慢病毒载体构建 | 第44-53
页 |
| 材料和方法 | 第45-46
页 |
| 结果 | 第46-49
页 |
| 讨论 | 第49-51
页 |
| 参考文献 | 第51-53
页 |
| 第四部分 携带hBMP2基因的慢病毒载体的包装和体外表达 | 第53-65
页 |
| 实验一、慢病毒载体的包装和滴度测定 | 第53-58
页 |
| 一、病毒包装 | 第53-54
页 |
| 1、实验材料 | 第53
页 |
| 2、实验试剂 | 第53
页 |
| 3、实验步骤 | 第53-54
页 |
| 二、慢病毒载体系统的病毒滴度测定 | 第54-58
页 |
| 1. 目的 | 第54
页 |
| 2. 材料 | 第54-55
页 |
| 3. 仪器设备 | 第55-56
页 |
| 4. 操作步骤 | 第56-58
页 |
| 实验二、hBMP2体外表达的间接免疫荧光分析 | 第58-60
页 |
| 目的 | 第58
页 |
| 材料及试剂 | 第58
页 |
| 实验步骤 | 第58-59
页 |
| 结果 | 第59-60
页 |
| 实验三、hBMP2体外表达的Western Blotting分析 | 第60-62
页 |
| 目的 | 第60
页 |
| 材料及试剂 | 第60
页 |
| 实验步骤 | 第60-61
页 |
| 结果 | 第61-62
页 |
| 讨论 | 第62-64
页 |
| 参考文献 | 第64-65
页 |
| 第五部分 携带hBMP2基因的慢病毒感染骨髓间质干细胞的定向分化 | 第65-75
页 |
| 实验一、慢病毒载体感染细胞后碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第65-68
页 |
| 实验材料 | 第65
页 |
| 实验步骤 | 第65-66
页 |
| 结果 | 第66-68
页 |
| 实验二、慢病毒载体感染细胞后钙沉积的定量检测 | 第68-69
页 |
| 1、测定方法 | 第68
页 |
| 2、钙的定量测定结果 | 第68-69
页 |
| 实验三、慢病毒载体感染细胞后的Ⅰ型胶原蛋白免疫组化分析 | 第69-71
页 |
| 实验试剂和材料 | 第69
页 |
| 实验步骤 | 第69
页 |
| 实验结果 | 第69-71
页 |
| 讨论 | 第71-73
页 |
| 参考文献 | 第73-75
页 |
| 综述 | 第75-89
页 |
| 致谢 | 第89-90
页 |
