论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7
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| Abstract | 第7-12
页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30
页 |
| · 引言 | 第12
页 |
| · 研究背景 | 第12
页 |
| · 研究目的和意义 | 第12
页 |
| · 项目来源与经费支持 | 第12
页 |
| · 国内外研究现状 | 第12-28
页 |
| · 生物膜系统同植物抗寒性的关系 | 第13-19
页 |
| · 其他与植物抗寒性相关的抗寒基因研究 | 第19-24
页 |
| · 杨树抗寒育种的研究现状 | 第24-28
页 |
| · 论文研究主要内容 | 第28-29
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| · 研究技术路线 | 第29-30
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| 第二章 材料与方法 | 第30-49
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| · 引言 | 第30
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| · 毛白杨去饱和酶基因PTFAD2的克隆以及转基因杨树研究 | 第30-45
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| · 试验材料及其来源 | 第30-32
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| · 毛白杨RNA提取 | 第32
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| · 毛白杨cDNA第一链的合成 | 第32-33
页 |
| · 毛白杨PtFAD2基因的电子克隆 | 第33-34
页 |
| · 毛白杨PtFAD2全长cDNA编码序列的分子克隆 | 第34-35
页 |
| · PtFAD2基因序列分析 | 第35-36
页 |
| · 植物超量表达载体pBin438-PtFAD2的构建 | 第36-37
页 |
| · 植物RNAi表达载体pBI121-PtFAD2-RNAi的构建 | 第37-39
页 |
| · 表达载体转化农杆菌 | 第39
页 |
| · 农杆菌介导的目的基因叶盘法转化84K杨 | 第39-40
页 |
| · 转基因植株的PCR筛选 | 第40-41
页 |
| · Realtime PCR检测转基因植株FAD2的转录表达量 | 第41
页 |
| · 转基因植株的Southern blot分析 | 第41-42
页 |
| · PtFAD2转基因植株叶片脂肪酸提取与组分分析 | 第42-43
页 |
| · PtFAD2转基因植株的扦插扩繁与生长期4℃低温试验分析 | 第43
页 |
| · PtFAD2转基因植株的扦插扩繁与萌芽期-4℃低温试验分析 | 第43
页 |
| · PtFAD2转基因植株枝条电解质渗透率测定 | 第43-45
页 |
| · 毛白杨亚油酸去饱和酶基因PTFAD3的克隆以及遗传转化84K杨的研究 | 第45-49
页 |
| · 试验材料及其来源 | 第45
页 |
| · 毛白杨RNA提取 | 第45
页 |
| · 毛白杨cDNA第一链的合成 | 第45
页 |
| · 毛白杨PtFAD3基因的电子克隆 | 第45
页 |
| · 毛白杨PtFAD3全长cDNA编码序列的分子克隆 | 第45
页 |
| · PtFAD3基因序列分析 | 第45-46
页 |
| · 植物超量表达载体pBI121-PtFAD3的构建 | 第46-47
页 |
| · 植物RNAi表达载体pBI121-PtFAD3-RNAi的构建 | 第47-48
页 |
| · 表达载体转化农杆菌 | 第48
页 |
| · 农杆菌介导的目的基因叶盘法转化84K杨 | 第48
页 |
| · 转基因植株的PCR筛选 | 第48
页 |
| · Realtime PCR检测转基因植株PtFAD3的转录表达量 | 第48
页 |
| · 转基因植株的Southern blot检测 | 第48
页 |
| · PtFAD3转基因植株叶片脂肪酸提取与组分分析 | 第48
页 |
| · PtFAD3转基因植株的扦插扩繁与4℃低温试验分析 | 第48
页 |
| · PtFAD3转基因植株的扦插扩繁与萌芽期-4℃低温试验分析 | 第48
页 |
| · PtFAD3转基因叶片电解质渗出率测定 | 第48-49
页 |
| 第三章 结果与分析 | 第49-81
页 |
| · PTFAD2基因的克隆与转基因研究 | 第49-62
页 |
| · PtFAD2基因cDNA编码序列全长克隆与分析 | 第49-50
页 |
| · PtFAD2基因序列同源性比较及聚类分析 | 第50-52
页 |
| · 植物表达载体pBin438-PtFAD2的酶切鉴定 | 第52-53
页 |
| · 中间载体pHurricane-PtFAD2的酶切鉴定 | 第53
页 |
| · 中间载体pHurricane-PtFAD2-RNAi的酶切鉴定 | 第53-54
页 |
| · RNAi载体pBI121-PtFAD2-RNAi的酶切鉴定 | 第54-55
页 |
| · 农杆菌介导的PtFAD2基因遗传转化 | 第55-56
页 |
| · 抗性植株中NPT-Ⅱ基因的PCR分析及阳性植株的移栽温室 | 第56
页 |
| · PtFAD2转基因植株FAD2基因表达量分析结果 | 第56-57
页 |
| · PtFAD2转基因抗性植株DNA印迹杂交分析 | 第57-58
页 |
| · PtFAD2转基因植株叶片脂肪酸组分分析结果 | 第58
页 |
| · PtFAD2转基因植株生长期低温处理试验 | 第58-59
页 |
| · PtFAD2转基因植株萌芽期低温处理试验 | 第59-61
页 |
| · PtFAD2转基因植株萌芽期叶片电解质渗出率测定 | 第61-62
页 |
| · 毛白杨PTFAD3基因的克隆与转化84K杨的研究 | 第62-75
页 |
| · 毛白杨PtFAD3基因cDNA编码序列全长克隆与分析 | 第62-63
页 |
| · 毛白杨PtFAD3基因序列同源性比较及聚类分析 | 第63-65
页 |
| · 植物表达载体pBI121-PtFAD3的双酶切鉴定 | 第65-66
页 |
| · 中间载体pHurricane-PtFAD3的酶切鉴定 | 第66
页 |
| · 中间载体pHurricane-PtFAD3-RNAi的酶切鉴定 | 第66-67
页 |
| · RNAi载体pBI121-PtFAD3-RNAi的酶切鉴定 | 第67-68
页 |
| · 农杆菌介导的PtFAD3基因遗传转化 | 第68
页 |
| · PtFAD3转基因抗性植株中NPT-Ⅱ基因的PCR分析及阳性植株的移栽温室 | 第68-69
页 |
| · PtFAD3转基因植株FAD3表达量分析结果 | 第69
页 |
| · PtFAD3转基因植株的DNA印迹杂交分析 | 第69-70
页 |
| · PtFAD3转基因植株叶片脂肪酸组分分析结果 | 第70-71
页 |
| · PtFAD3转基因植株生长期低温处理试验 | 第71-72
页 |
| · PtFAD3转基因植株萌芽期低温处理试验 | 第72-74
页 |
| · PtFAD3转基因植株萌芽期叶片电解质渗出率统计 | 第74-75
页 |
| · 转基因植株抗寒性综合比较统计分析 | 第75-81
页 |
| · PtFAD2和PtFAD3转基因植株脂肪酸不饱和指数和三烯酸综合比较 | 第75
页 |
| · PtFAD2和PtFAD3转基因植株萌芽期低温处理存活率比较 | 第75-78
页 |
| · 超量表达转基因植株叶片电解质渗出率统计分析 | 第78-81
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| 第四章 结论与讨论 | 第81-86
页 |
| · PtFAD2和PtFAD3的克隆 | 第81-82
页 |
| · PtFAD2和PtFAD3的在杨树中超量和抑制表达 | 第82-83
页 |
| · 杨树抗寒性与三烯酸含量密切相关 | 第83-84
页 |
| · 电解质渗出率可用来衡量杨树抗寒性 | 第84
页 |
| · 杨树抗寒基因工程育种展望 | 第84-86
页 |
| 参考文献 | 第86-93
页 |
| 附录 | 第93-95
页 |
| 在读期间的学术研究 | 第95-96
页 |
| 致谢 | 第96页 |
