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北京鸭免疫球蛋白轻链基因胚系结构及多样性产生机制研究

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北京鸭免疫球蛋白轻链基因胚系结构及多样性产生机制研究
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略词表第11-13页
第一章 文献综述第13-35页
  · 免疫球蛋白的基本结构及类型第13-15页
    · 免疫球蛋白基本结构第13页
    · 免疫球蛋白可变区和恒定区第13-15页
    · 免疫球蛋白重链和轻链类型第15页
  · 免疫球蛋白主要生物学功能第15-16页
    · 特异性识别并结合抗原第15-16页
    · 调理作用第16页
    · 抗体依赖性细胞毒作用第16页
    · 激活补体第16页
  · 免疫球蛋白多样性产生机制第16-28页
    · 免疫球蛋白基因座的基本结构第17页
    · V(D)J重组第17-21页
    · 体细胞超突变第21-23页
    · 基因转换第23-26页
    · 类别转换重组第26-28页
    · 鸟类和哺乳动物免疫球蛋白多样性产生机制比较第28页
  · 有颌类脊椎动物免疫球蛋白轻链基因的进化第28-33页
    · 软骨鱼免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第29-30页
    · 硬骨鱼免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第30页
    · 两栖类免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第30-32页
    · 爬行类免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第32页
    · 鸟类免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第32-33页
    · 哺乳类免疫球蛋白轻链基因结构与类型特点第33页
  · 本研究的目的和意义第33-35页
第二章 材料和方法第35-52页
  · 技术路线第35-36页
  · 实验材料第36-38页
    · 实验样品第36页
    · 质粒与菌株第36页
    · 北京鸭基因组BAC文库第36页
    · 分子生物学实验所用常规试剂和酶第36页
    · 抗体第36页
    · 实验所用试剂盒第36-37页
    · 主要试剂配制第37-38页
    · 实验所需引物第38页
    · 分析工具软件及网址第38页
  · 主要实验仪器设备第38-39页
  · 实验方法第39-52页
    · 基因组DNA提取第39-40页
    · 组织RNA提取(试剂盒)第40页
    · 反转录(M-MLV)第40-41页
    · 5'RACE实验方法第41页
    · 3'RACE实验方法第41页
    · 常规PCR体系及条件第41页
    · 高保真PCR第41-42页
    · 克隆转化第42-44页
    · 质粒DNA提取第44页
    · 定量PCR实验方法第44-45页
    · Southern blotting实验方法(地高辛标记杂交方法)第45-47页
    · Western blotting实验方法第47-49页
    · 北京鸭基因组BAC文库筛选第49页
    · BAC DNA的提取第49-50页
    · 脉冲电泳和电洗脱法回收BAC第50-51页
    · SW102电转感受态细胞的制备及电转BAC第51页
    · 转基因小鼠制备第51-52页
第三章 实验结果与分析第52-99页
  引言第52页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链基因BAC克隆的筛选与分析鉴定第52-57页
    · 北京鸭基因组BAC文库的筛选第52-55页
    · 北京鸭IgL基因阳性BAC克隆长度及生物信息学分析第55-57页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链基因完整胚系结构第57-63页
    · Southern blotting确定北京鸭IgL恒定区基因为单拷贝第57页
    · RACE确定北京鸭IgL恒定区和J区基因为单拷贝第57-59页
    · BAC全长测序确定北京鸭IgL基因完整胚系结构第59-60页
    · 北京鸭IgL基因分家族及功能V_λ基因序列比对第60-63页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链V_λ基因进化分析第63-65页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链基因VJ重组分析第65-75页
    · 北京鸭9个功能V_λ基因都能参与VJ重组第65-68页
    · 北京鸭9个功能V_λ基因使用频率分析第68-69页
    · 北京鸭VJ重组过程中有少量N核苷酸和P核苷酸添加第69-71页
    · 北京鸭CDRL3区域长度及氨基酸使用分析第71-75页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链基因转换分析第75-78页
  · 北京鸭免疫球蛋白轻链基因体细胞超突变分析第78-80页
  · 转基因BAC载体的构建第80-83页
    · 转基因BAC克隆的选择第80-81页
    · 转基因BAC克隆修饰策略第81-83页
  · 转基因BAC载体的提取、分离、回收和纯化第83-85页
  · 转基因小鼠的制备及鉴定第85-90页
    · 转基因小鼠的制备第85页
    · 基因组水平鉴定阳性转基因小鼠第85-90页
  · 转基因小鼠中免疫球蛋白轻链基因表达分析第90-97页
    · 转基因小鼠中外源北京鸭IgL基因VJ重组鉴定第90页
    · 转基因小鼠中免疫球蛋白轻链基因cDNA水平表达分析第90-96页
    · 转基因小鼠中免疫球蛋白轻链基因蛋白水平表达分析第96-97页
  · 转基因小鼠中外源鸭免疫球蛋白轻链基因转换分析第97-99页
第四章 讨论与展望第99-102页
第五章 结论第102-103页
参考文献第103-115页
致谢第115-116页
附录第116-121页
个人简历第121页

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