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甜菜素植物—红苋菜中过氧化氢酶—酚氧化酶的鉴定
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甜菜素植物—红苋菜中过氧化氢酶—酚氧化酶的鉴定
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-12页
缩略词表第12-13页
第一章 引言第13-36页
　　· 甜菜素及其生物学功能第13-18页
　　　　· 甜菜素的来源第13-16页
　　　　· 甜菜素的化学结构第16页
　　　　· 甜菜素的物理化学性质第16-17页
　　　　· 甜菜素的生理功能第17-18页
　　　　· 甜菜素的应用第18页
　　· 推导的植物体内甜菜素生物合成途径第18-21页
　　　　· 甜菜醛氨酸的生物合成第20页
　　　　· 甜菜黄素的生物合成第20页
　　　　· 甜菜红素的生物合成第20-21页
　　· 参与甜菜素生物合成途径的关键酶第21-30页
　　　　· 酪氨酸酶的研究进展第21-28页
　　　　· 4,5-多巴雌二醇双加氧酶的研究进展第28-29页
　　　　· 新型细胞色素P450酶的研究进展第29-30页
　　· 过氧化氢酶的研究进展第30-35页
　　　　· 分类第30-31页
　　　　· 活性中心和定位信号第31-32页
　　　　· 作用机制第32-34页
　　　　· 理化性质第34页
　　　　· 生理功能第34-35页
　　· 本研究的目的和意义第35-36页
第二章 材料与方法第36-62页
　　· 实验材料第36-40页
　　　　· 植物材料第36页
　　　　· 植物培养材料第36页
　　　　· 载体与菌株第36页
　　　　· 主要试剂及耗材第36-37页
　　　　· 主要试剂的配制第37-40页
　　　　· 主要仪器设备第40页
　　· 实验方法第40-62页
　　　　· 红苋菜叶片中具有酪氨酸酶活性的酶的分离纯化第40-41页
　　　　· 蛋白质浓度的测定第41页
　　　　· 纯化的酶的单酚酶活性测定第41-43页
　　　　· 纯化的酶的双酚酶活性测定第43-44页
　　　　· 电泳检测与染色分析第44-45页
　　　　· Nano-LC-MS/MS测定纯化的酶的氨基酸序列第45-46页
　　　　· 纯化的酶的过氧化氢酶活性测定第46-48页
　　　　· TRIzol法提取植物叶片组织的总RNA第48-49页
　　　　· 总RNA反转录成cDNA第49-50页
　　　　· 过氧化氢酶cDNA中间片段的克隆第50-51页
　　　　· 过氧化氢酶cDNA3'末端的克隆第51-52页
　　　　· 过氧化氢酶cDNA 5末端的克隆第52-54页
　　　　· 过氧化氢酶cDNA完整CDS的克隆第54-55页
　　　　· 大肠杆菌感受态细胞的转化第55页
　　　　· 转化菌落的鉴定第55页
　　　　· 大肠杆菌质粒DNA的提取第55-56页
　　　　· 质粒DNA的酶切鉴定第56页
　　　　· AcCATPO的系统进化分析第56-57页
　　　　· 普通苋菜叶片中甜菜素色素的提取与分析第57页
　　　　· AcCATPO的qRT-PCR分析第57-59页
　　　　· 重组表达载体的构建第59-60页
　　　　· AcCATPO在大肠杆菌中的表达第60-62页
第三章 实验结果与分析第62-100页
　　· 红苋菜叶片中具有酪氨酸酶活性的酶的纯化第62-66页
　　　　· 红苋菜叶片中纯化的酶的分子量及纯度的确定第62-64页
　　　　· 蛋白质含量标准曲线的确定第64页
　　　　· 红苋菜叶片中AcCATPO的纯化情况第64-66页
　　· 纯化的酶的单酚酶活性分析第66-69页
　　　　· L-DOPA在单酚酶活性分析中的作用第66页
　　　　· 温度对单酚酶活性的影响第66页
　　　　· pH对单酚酶活性的影响第66-67页
　　　　· 底物L-酪氨酸的浓度对单酚酶活性的影响第67页
　　　　· 常见的酪氨酸酶抑制剂对单酚酶活性的影响第67-69页
　　· 纯化的酶的双酚酶活性分析第69-72页
　　　　· 温度对双酚酶活性的影响第69-70页
　　　　· pH对双酚酶活性的影响第70页
　　　　· 底物L-DOPA的浓度对双酚酶活性的影响第70页
　　　　· 常见的酪氨酸酶抑制剂对双酚酶活性的影响第70-72页
　　· 纯化的酶的nano-LC-MS/MS分析第72-77页
　　· 纯化的酶的过氧化氢酶活性分析第77-79页
　　　　· 过氧化氢酶活性的催化分析第77页
　　　　· 过氧化氢酶活性的抑制分析第77-79页
　　· 纯化的酶的编码基因的克隆第79-86页
　　　　· 中间片段的克隆第79-81页
　　　　· 3'末端的克隆第81-82页
　　　　· 5'末端的克隆第82-84页
　　　　· 完整CDS的克隆第84-86页
　　· 克隆基因的序列分析第86-90页
　　　　· 同源性的分析第86页
　　　　· 目标肽段的分析第86页
　　　　· 定位信号和活性中心的分析第86-90页
　　· 植物过氧化氢酶中活性中心、定位信号和系统进化分析第90-93页
　　　　· 活性中心的分析第90页
　　　　· 定位信号的分析第90-91页
　　　　· 系统进化分析第91-93页
　　· AcCATPO与甜菜素生物合成途径第93-95页
　　· AcCATPO的其他生物信息学分析第95-97页
　　　　· 序列组分属性和等电点的分析第95-96页
　　　　· 信号肽预测第96页
　　　　· 同源模拟AcCATPO的三维结构第96-97页
　　· AcCATPO在大肠杆菌中的表达第97-100页
　　　　· 重组表达载体的构建和鉴定第97-98页
　　　　· AcCATPO在大肠杆菌中的表达分析第98-100页
第四章 讨论与展望第100-106页
　　· 讨论第100-104页
　　· 小结第104页
　　· 结论第104页
　　· 展望第104-106页
参考文献第106-118页
致谢第118-120页
附录第120-130页
　　S1 纯化的酶体外催化L-酪氨酸可能的反应机制第120-121页
　　S2 纯化的酶的过氧化氢酶活性的部分鉴定第121-123页
　　S3 红苋菜总RNA的提取及纯化的酶cDNA编码的氨基酸序列的比对分析第123-125页
　　S4 补充材料第125-130页
作者简历第130页

本篇论文共130页，点击这进入下载页面。
 
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