论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一部分 用蛋白质印迹聚合物作为抗体取代物研究蛋白质间的相互作用 | 第12-89页 |
| 第一章 引言 | 第12-38页 |
| 第一节 分子印迹技术发展概况 | 第12-26页 |
| · 分子印迹技术的产生及国内外研究状况 | 第12-13页 |
| · 分子印迹技术的原理及概念 | 第13-14页 |
| · 分子印迹聚合物的制备原理 | 第14-16页 |
| · 分子印迹聚合物的制备技术 | 第16-20页 |
| · 分子印迹聚合物制备及条件的选择 | 第20-23页 |
| · 分子印迹聚合物应用 | 第23-26页 |
| 第二节 蛋白质分子印迹技术进展 | 第26-38页 |
| · 制备蛋白质分子印迹聚合物时需考虑的因素 | 第28-29页 |
| · 蛋白质分子印迹的识别机理 | 第29-30页 |
| · 蛋白质分子印迹聚合物的制备方法 | 第30-34页 |
| · 蛋白质分子印迹技术的技术障碍、应用前景及发展趋势 | 第34-38页 |
| 第二章 本实验所涉及的蛋白质 | 第38-54页 |
| 第一节 亲免蛋白家族 | 第38-43页 |
| · 免疫抑制剂 | 第38-39页 |
| · 亲免蛋白家族 | 第39-41页 |
| · FKBP家族 | 第41-43页 |
| 第二节 分子伴侣与热激蛋白 | 第43-50页 |
| · 分子伴侣 | 第43-44页 |
| · 热激蛋白 | 第44-46页 |
| · 亲免蛋白与热激蛋白的协同作用 | 第46-50页 |
| 第三节 蛋白质相互作用研究方法进展 | 第50-52页 |
| · 化学交联法(chemical cross-linking) | 第50-51页 |
| · 免疫共沉淀法(coimmunoprecipitation) | 第51-52页 |
| 第四节 本课题提出的指导思想 | 第52-54页 |
| 第三章 实验部分 | 第54-78页 |
| 第一节 试剂与实验仪器 | 第54-57页 |
| · 化学试剂 | 第54页 |
| · 分子生物学试剂 | 第54-56页 |
| · 实验仪器 | 第56-57页 |
| 第二节 缓冲液及贮存液的配制 | 第57-64页 |
| · 细菌培养 | 第57页 |
| · 融合蛋白的表达及提取 | 第57-58页 |
| · 凝血因子Xa对融合蛋白的裂解 | 第58页 |
| · 猪肝脏中细胞提取物及内质网体提取物的提取 | 第58-59页 |
| · 辅助识别聚合物链制备所用的缓冲液（1L) | 第59页 |
| · 用克隆蛋白质做为模板制备PIP以及吸附时所用缓冲液 | 第59页 |
| · BCA法测定蛋白质的浓度 | 第59-60页 |
| · 三氯乙酸法沉淀蛋白质 | 第60页 |
| · SDS-PAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳) | 第60-62页 |
| · 银染法 | 第62页 |
| · 免疫印迹(Western-Blot) | 第62-63页 |
| · 免疫沉淀(Immunoprecipitation) | 第63-64页 |
| 第三节 实验方法 | 第64-78页 |
| · 辅助识别聚合物链(mARPCs)的制备 | 第64-66页 |
| · 聚乙烯醇大孔树脂微球的功能基化 | 第66-67页 |
| · 作为模板的克隆蛋白质的诱导表达以及提纯 | 第67-69页 |
| · 猪肝脏中细胞提取物及内质网体提取物的提取 | 第69-70页 |
| · 模板蛋白质和ARPC配比的确定 | 第70页 |
| · 蛋白质分子印迹聚合物(MIP)的制备 | 第70-71页 |
| · 蛋白质分子印迹聚合物(MIP)的应用 | 第71-72页 |
| · 蛋白质的检测 | 第72-76页 |
| · 免疫共沉淀法检测 | 第76-78页 |
| 第四章 实验结果与讨论 | 第78-88页 |
| 第一节 辅助识别聚合物链库的构建 | 第78-82页 |
| · 辅助识别聚合物链的设计 | 第78-80页 |
| · 第二单体的选择 | 第80页 |
| · 辅助识别聚合物链的表征 | 第80-82页 |
| 第二节 克隆蛋白质的提取结果 | 第82-84页 |
| · 融合蛋白的表达及鉴定 | 第82-83页 |
| · 目的蛋白的大量提取 | 第83-84页 |
| 第三节 应用m-MIP_(BiP)吸附内质网体提取物中的BiP | 第84-88页 |
| · 应用m-MIP_(BiP)吸附内质网体提取物中天然BiP实验结果分析 | 第85页 |
| · m-MIP_(BiP)结果与免疫共沉淀结果对照分析 | 第85-86页 |
| · 应用m-MIP_(FKBP23)吸附内质网体提取物中天然FKBP23实验结果分析 | 第86-87页 |
| · m-MIP_(FKBP23)与免疫共沉淀结果对照分析 | 第87-88页 |
| 第一部分 小结 | 第88-89页 |
| 第二部分 用两种蛋白质印迹聚合物分离富集微量蛋白质BiP及其氮端序列的研究 | 第89-123页 |
| 第一章 ：引言 | 第89-104页 |
| 第一节 蛋白质信号肽序列研究进展 | 第89-94页 |
| · 信号肽(Signal peptide) | 第89-94页 |
| 第二节 蛋白质信号肽序列研究方法 | 第94-103页 |
| · Edman降解法 | 第94-97页 |
| · 蛋白质质谱分析 | 第97-103页 |
| 第三节 本课题提出的指导思想 | 第103-104页 |
| 第二章 ：实验部分 | 第104-111页 |
| 第一节 试剂与实验仪器 | 第104页 |
| · 化学试剂 | 第104页 |
| · 分子生物学试剂 | 第104页 |
| 第二节 缓冲液及贮存液的配制 | 第104-105页 |
| · 基因克隆 | 第104页 |
| · 制备辅助识别聚合物链所用缓冲液 | 第104页 |
| · 制备PIP所用缓冲液及洗脱液 | 第104-105页 |
| 第三节 实验方法 | 第105-111页 |
| · 辅助识别聚合物链(ARPC)的制备 | 第105-108页 |
| · 聚乙烯醇大孔微球的功能基化 | 第108-109页 |
| · 用作模板的克隆蛋白质的诱导表达及提纯 | 第109页 |
| · 猪肝脏中细胞提取物及内质网体提取物的提取 | 第109页 |
| · 蛋白质分子印迹聚合物(PIP)的制备 | 第109页 |
| · 蛋白质分子印迹聚合物(PIP)的应用 | 第109-110页 |
| · 蛋白质含量检测 | 第110-111页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第111-122页 |
| 第一节 季铵盐辅助识别聚合物链库的构建 | 第111-114页 |
| · 辅助识别聚合物链的设计 | 第111页 |
| · 季铵盐辅助识别聚合物链的表征 | 第111-114页 |
| 第二节 qPIP_(BiP)对BiP的富集效果 | 第114-115页 |
| · 对照组(Control)的建立 | 第114-115页 |
| 第三节 mPIP_(BiP)对BiP的富集效果 | 第115-116页 |
| 第四节 qPIP_(BiP)印迹聚合物纯化的BiP的氮端序列分析结果 | 第116-121页 |
| 第五节 实验进一步研究的方向 | 第121-122页 |
| 第二部分 小结 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第139
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