论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6
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| 英文摘要 | 第6-11
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| 第一章 异种器管移植的研究进展 | 第11-40
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| · 异种器官移植的概况 | 第11-14
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| · 异种器官移植的主要障碍：超急性排斥反应 | 第14-30
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| · 内皮细胞是一个功能复杂的效应器 | 第15-16
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| · 自然抗体可以识别异种抗原而激活补体 | 第16-17
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| · 异种抗原的去除可以避免或减轻超急性排斥反应 | 第17-18
页 |
| · 补体在超急性排斥反应中起关键性作用 | 第18-30
页 |
| · 克服超急性排斥反应的主要策略 | 第30-37
页 |
| · 培育表达人源补体调节蛋白的转基因动物 | 第31-35
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| · 利用基因工程技术产生α1，3GT缺陷的转基因动物 | 第35-36
页 |
| · 异种器官移植研究问题与展望 | 第36-37
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| · 本论文研究背景及目标 | 第37-40
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| 第二章 人衰变加速因子DAF的cDNA克隆及序列分析 | 第40-53
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| 0 引言 | 第40-41
页 |
| 1 材料和方法 | 第41-46
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| · 材料与试剂 | 第41-42
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| · 引物的设计与合成 | 第42
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| 1.3方法 | 第42-46
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| 2 结果和讨论(Results and Discussion) | 第46-53
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| · 胚胎组织总RNA的提取 | 第46-47
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| · mRNA的分离及定量 | 第47
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| · cDNA第一链的合成以及DAFcDNA的扩增 | 第47-48
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| · PCR产物的纯化回收及与T-载体的连接、转化 | 第48
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| 2.5 DAF cDNA重组子的PCR鉴定 | 第48
页 |
| 2.6 DAF cDNA的核苷酸序列及翻译蛋白质序列的特征分析 | 第48-50
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| · DAF基因的序列和结构分析 | 第50-53
页 |
| 第三章 人衰变加速因子DAF的真核表达及功能研究 | 第53-74
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| 0 引言 | 第53-56
页 |
| 1 材料和方法 | 第56-65
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| · 材料与试剂 | 第56-59
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| · 方法 | 第59-65
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| 2 实验结果与讨论 | 第65-74
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| · 重组真核表达载体pcDNA3-DAF的构建及鉴定 | 第65-66
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| · G418最适作用浓度的选择 | 第66-67
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| 2.3 稳定细胞系pcDNA3-DAF NIH／3T3的建立 | 第67-68
页 |
| 2.4 NIH／3T3 pcDNA3和NIH／3T3 pcDNA3-DAF两种转化细胞的特性 | 第68-69
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| · 稳定表达的人DAF分子保护NIH／3T3细胞免受人补体溶破作用 | 第69-74
页 |
| 第四章 人补体调节蛋白MCP、CD59在NIH／3T3细胞中的共表达及功能研究 | 第74-102
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| 0 引言 | 第74-75
页 |
| 1 材料与方法 | 第75-90
页 |
| · 材料与试剂 | 第75-76
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| · 实验方法 | 第76-90
页 |
| 2 实验结果 | 第90-99
页 |
| · pcDNA3-MCPCD59-DP和pcDNA3-MCPIRESCD59重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第90-93
页 |
| 2.2 NIH／3T3 pcDNA3、NIH／3T3 pcDNA3-MCPCD59-DP和NIH／3T3 pcDNA3-MCPIRESCD59三种转化细胞的特性 | 第93-94
页 |
| · 稳定表达的人补体调节蛋白CD59和MCP共同保护NIH／3T3细胞免受人补体溶破作用 | 第94-99
页 |
| 3 讨论 | 第99-102
页 |
| 第五章 人补体调节蛋白DAF、CD59在NIH／3T3细胞中的共表达及功能研究 | 第102-128
页 |
| 0 引言 | 第102-103
页 |
| 1 材料与方法 | 第103-117
页 |
| · 实验材料 | 第103-105
页 |
| · 实验方法 | 第105-117
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| 2 实验结果 | 第117-126
页 |
| · 重组表达载体pcDNA3-DAFCD59-DP和pcDNA3-CD591RESDAF的构建及鉴定 | 第117-120
页 |
| 2.2 人DAF和CD59 cDNA在转化的NIH／3T3细胞基因组上的整合 | 第120-121
页 |
| · 人补体调节蛋白基因DAF和CD59在mRNA水平上的共表达 | 第121-122
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| · 人补体调节蛋白基因DAF和CD59在蛋白质水平上的共表达 | 第122-124
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| · 人补体调节蛋白DAF和CD59共表达增强NIH／3T3细胞抵抗人补体攻击的能力 | 第124-126
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| 3 讨论 | 第126-128
页 |
| 第六章 人补体调节蛋白DAF、MCP在NIH／3T3细胞中的共表达及协同作用研究 | 第128-148
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| 0 引言 | 第128-129
页 |
| 1 材料与方法 | 第129-138
页 |
| · 实验材料 | 第129-131
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| · 实验方法 | 第131-138
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| 2 实验结果 | 第138-146
页 |
| · pcDNA3-DAFMCP-DP和pcDNA3-MCPIRESDAF重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第138-141
页 |
| 2.2 人DAF和MCP cDNA在转化的NIH／3T3细胞基因组上的整合 | 第141-142
页 |
| · 人补体调节蛋白基因DAF和MCP在mRNA水平上的共表达 | 第142-143
页 |
| · 人补体调节蛋白基因DAF和MCP在蛋白质水平的共表达 | 第143-145
页 |
| · 共同表达的人补体调节蛋白DAF和MCP保护NIH／3T3细胞免遭人补体的攻击 | 第145-146
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| 3 讨论 | 第146-148
页 |
| 研究总结 | 第148-149
页 |
| 参考文献 | 第149-194
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| 博士研究生期间发表的论文 | 第194-195
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| 致谢 | 第195
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