大豆主要致敏原的免疫检测研究
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大豆主要致敏原的免疫检测研究
论文目录
摘要
第1-7页
Abstract
第7-14页
第一章 绪论
第14-32页
· 研究目的和意义
第14-15页
· 大豆蛋白
第15-18页
· 大豆蛋白的分类
第15-17页
· 大豆蛋白的营养价值与应用
第17-18页
· 大豆致敏蛋白
第18-21页
· β-伴球蛋白α亚基
第18-19页
· P34/Gly m Bd 30K
第19-20页
· Gly m Bd 28K
第20页
· 大豆球蛋白酸性多肽
第20页
· 其他致敏蛋白
第20-21页
· 大豆抗原蛋白与食物过敏
第21-24页
· 食物过敏
第21-22页
· 大豆致敏蛋白引起的过敏反应
第22-23页
· 大豆抗原蛋白脱敏处理
第23-24页
· 大豆抗原蛋白检测研究
第24-27页
· 免疫印记
第25页
· 酶联免疫吸附检测(ELISA)
第25-26页
· 免疫组织化学技术
第26页
· 聚合酶链式反应(PCR)
第26页
· 高效液相(HPLC)
第26-27页
· 大豆抗原蛋白抗体制备
第27-30页
· 过敏病人血清
第27页
· 过敏动物血清
第27页
· 重组表达抗原蛋白制备抗体
第27-28页
· 合成肽制备抗体
第28-30页
· 存在的问题、解决方案及技术路线
第30-32页
· 存在问题及解决方案
第30-31页
· 技术路线
第31-32页
第二章 β-伴球蛋白α亚基cELISA 检测方法建立
第32-57页
· 引言
第32页
· 材料
第32-34页
· 主要试剂和耗材
第32页
· 实验动物和植物材料
第32-33页
· 主要仪器
第33页
· B 细胞表位预测软件
第33页
· 主要缓冲液配制
第33-34页
· 方法
第34-41页
· 蛋白提取
第34页
· Bradford 法蛋白定量
第34页
· β-伴球蛋白的α亚基切胶回收
第34-35页
· 免疫兔子
第35-36页
· Western blotting
第36-37页
· β-伴球蛋白的α亚基B 细胞表位预测
第37页
· 抗β-伴球蛋白α亚基PcAb 和McAb 制备
第37-40页
· PcAb-60K-A、B 和McAb-60K 特异性分析
第40页
· cELISA 检测方法的建立
第40-41页
· β-伴球蛋白α亚基含量测定
第41页
· 结果与分析
第41-54页
· α亚基切胶纯化
第41-42页
· α亚基B 细胞表位预测
第42-45页
· 抗原制备
第45页
· PcAb-60K-A 和B 特异性
第45页
· McAb 的制备
第45-50页
· cELISA 检测方法
第50-53页
· 大豆和豆粕中 β-伴球蛋白 α 亚基含量检测
第53-54页
· 讨论
第54-56页
· 小结
第56-57页
第三章 P34 蛋白iELISA 检测方法建立
第57-74页
· 引言
第57页
· 材料
第57-58页
· 主要试剂和耗材
第57页
· 实验动物和植物材料
第57页
· 质粒和菌株
第57页
· 主要仪器
第57页
· 培养基和主要缓冲液配制
第57-58页
· 方法
第58-64页
· P34 基因和引物合成
第58页
· E.coli 感受态制备
第58-59页
· P34 原核表达载体构建
第59-61页
· 重组P34 蛋白的原核表达
第61-62页
· PcAb 制备
第62-63页
· Western blotting 检测
第63页
· iELISA 检测方法的建立
第63页
· P34 蛋白含量测定
第63-64页
· 结果与分析
第64-71页
· P34 基因合成
第64页
· P34 原核表达载体构建
第64-65页
· P34 融合蛋白的原核表达
第65页
· P34 融合蛋白的纯化
第65-66页
· PcAb 制备
第66-68页
· Western blotting 检测
第68页
· iELISA 检测方法
第68-70页
· P34 蛋白含量
第70-71页
· 讨论
第71-73页
· 小结
第73-74页
第四章 Gly m Bd 28K 蛋白iELISA 检测方法建立
第74-88页
· 引言
第74页
· 材料
第74页
· 方法
第74-77页
· Gly m Bd 28K 基因和引物合成
第74页
· Gly m Bd 28K 原核表达载体构建
第74-75页
· 重组Gly m Bd 28K 蛋白的原核表达
第75-76页
· PcAb 制备和效价测定
第76-77页
· Western blotting 检测
第77页
· iELISA 检测方法的建立
第77页
· Gly m Bd 28K 蛋白含量测定
第77页
· 结果与分析
第77-86页
· Gly m Bd 28K 基因合成
第77-78页
· Gly m Bd 28K 原核表达载体构建
第78-79页
· Gly m Bd 28K 融合蛋白的原核表达
第79-82页
· PcAb 制备
第82页
· Western blotting 检测
第82-83页
· iELISA 检测方法
第83-85页
· Gly m Bd 28K 蛋白含量
第85-86页
· 讨论
第86页
· 小结
第86-88页
第五章 大豆球蛋白酸性多肽分析和表达
第88-98页
· 引言
第88页
· 材料
第88页
· 质粒和菌株
第88页
· 主要试剂
第88页
· 分析软件
第88页
· 方法
第88-91页
· 11S 球蛋白酸性多肽序列分析
第88页
· 基因和引物合成
第88-89页
· 原核表达载体构建
第89-90页
· 重组蛋白的原核表达
第90页
· Western blotting 检测
第90-91页
· 结果与分析
第91-97页
· 11S 球蛋白酸性多肽同源性分析
第91页
· 基因合成
第91页
· 原核表达载体构建
第91-94页
· 重组蛋白的原核表达
第94-97页
· Western blotting 检测
第97页
· 讨论
第97页
· 小结
第97-98页
第六章 结论
第98-100页
·本研究的主要结论
第98-99页
·本研究主要创新点
第99页
·后续工作设想
第99-100页
参考文献
第100-111页
致谢
第111-112页
作者简历
第112页
本篇论文共
112
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