论文目录 | |
| 论文创新点 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一章 丙型肝炎病毒分子生物学 | 第12-28页 |
| 1.1 HCV的流行情况及分型 | 第12-14页 |
| 1.2 HCV基因组的结构和功能 | 第14-18页 |
| 1.2.1 5'非翻译区 | 第15页 |
| 1.2.2 3'非翻译区 | 第15页 |
| 1.2.3 HCV编码的蛋白 | 第15-18页 |
| 1.3 HCV的生活周期 | 第18-20页 |
| 1.4 病毒一细胞相互作用 | 第20-24页 |
| 1.4.1 Core | 第21页 |
| 1.4.2 E2 | 第21-22页 |
| 1.4.3 NS4B | 第22-24页 |
| 1.5 研究HCV的模式系统 | 第24-25页 |
| 1.6 抗病毒药物研究 | 第25-28页 |
| 第二章 细胞死亡 | 第28-52页 |
| 2.1 细胞凋亡 | 第28-44页 |
| 2.1.1 细胞凋亡的发现和特征 | 第28-30页 |
| 2.1.2 Caspase | 第30-36页 |
| 2.1.3 Bcl-2家族 | 第36-39页 |
| 2.1.4 线粒体释放的促凋亡因子 | 第39-40页 |
| 2.1.5 IAP | 第40-41页 |
| 2.1.6 细胞凋亡的信号通路 | 第41-44页 |
| 2.2 坏死 | 第44-45页 |
| 2.3 自噬 | 第45-46页 |
| 2.4 HCV与细胞凋亡 | 第46-52页 |
| 2.4.1 HCV感染肝脏中的细胞凋亡 | 第47页 |
| 2.4.2 in vivo HCV感染导致肝细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 2.4.3 HCV感染中由配体诱导的肝细胞凋亡 | 第48-49页 |
| 2.4.4 in vitro肝细胞凋亡 | 第49-52页 |
| 第三章 HCV NS4B诱导细胞凋亡 | 第52-66页 |
| 3.1 材料和方法 | 第52-58页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.2 构建NS4B真核表达质粒 | 第53-54页 |
| 3.1.3 细胞转染 | 第54-55页 |
| 3.1.4 Hoechst 33258染色 | 第55页 |
| 3.1.5 DNA Ladder抽提 | 第55-56页 |
| 3.1.6 SDS-PAGE和蛋白免疫印迹 | 第56-57页 |
| 3.1.7 Annexin V-APC/PI双染检测细胞凋亡 | 第57-58页 |
| 3.2 实验结果 | 第58-64页 |
| 3.2.1 HCV NS4B表达导致细胞DNA片段化 | 第58-59页 |
| 3.2.2 NS4B引起细胞核形态改变 | 第59-61页 |
| 3.2.3 流式细胞仪检测凋亡细胞 | 第61-63页 |
| 3.2.4 NS4B引起PARP的切割 | 第63-64页 |
| 3.3 小结 | 第64-66页 |
| 第四章 HCV NS4B蛋白诱导细胞凋亡的机理研究 | 第66-79页 |
| 4.1 材料和方法 | 第66-70页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第66页 |
| 4.1.2 分离线粒体 | 第66-67页 |
| 4.1.3 检测线粒体跨膜电位 | 第67页 |
| 4.1.4 细胞总RNA提取 | 第67-68页 |
| 4.1.5 逆转录 | 第68-69页 |
| 4.1.6 半定量PCR检测XBP1 mRNA的剪切 | 第69页 |
| 4.1.7 线粒体荧光探针 | 第69-70页 |
| 4.1.8 SDS-PAGE和蛋白免疫印迹 | 第70页 |
| 4.1.9 Hoechst 33258染色 | 第70页 |
| 4.1.10 间接免疫荧光 | 第70页 |
| 4.2 实验结果 | 第70-77页 |
| 4.2.1 NS4B激活caspase-3、caspase-7和caspase-9 | 第70-72页 |
| 4.2.2 NS4B引起细胞线粒体膜电位降低 | 第72-73页 |
| 4.2.3 NS4B诱导细胞色素C释放 | 第73-75页 |
| 4.2.4 NS4B定位于内质网 | 第75-76页 |
| 4.2.5 NS4B诱导的细胞凋亡不依赖内质网途径 | 第76-77页 |
| 4.3 小结 | 第77-79页 |
| 论文讨论 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-104页 |
| 在读期间发表的文章 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 武汉大学研究生学位论文作者信息 | 第106页 |
