论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-39页 |
| 1.1 单增李斯特菌的生物学特性 | 第17-18页 |
| 1.2 单增李斯特菌检测方法进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 定性检测方法 | 第18-21页 |
| 1.2.2 定量检测方法 | 第21页 |
| 1.3 单增李斯特菌分型技术研究 | 第21-28页 |
| 1.3.1 传统表型分型 | 第21-22页 |
| 1.3.2 分子分型 | 第22-28页 |
| 1.4 单增李斯特菌毒力因子与致病机理 | 第28-31页 |
| 1.4.1 单增李斯特菌毒力因子 | 第28-30页 |
| 1.4.2 致病机理 | 第30-31页 |
| 1.5 群体感应与食品安全 | 第31-35页 |
| 1.5.1 agr 群体感应系统 | 第32页 |
| 1.5.2 AI-2 群体感应系统 | 第32-33页 |
| 1.5.3 agr 群体感应与生物膜形成的关系 | 第33-34页 |
| 1.5.4 AI-2 群体感应与生物膜形成的关系 | 第34-35页 |
| 1.5.5 群体感应与单增李斯特菌基因转录调节 | 第35页 |
| 1.6 未来的发展方向 | 第35-36页 |
| 1.7 本论文的目的意义与研究内容 | 第36-39页 |
| 1.7.1 目的意义 | 第36-37页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第37-38页 |
| 1.7.3 本研究技术路线 | 第38-39页 |
| 第二章 华南四省即食食品中单增李斯特菌风险识别与遗传多样性分析 | 第39-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第40页 |
| 2.2.2 样品定性与定量分析 | 第40-42页 |
| 2.2.3 谱系型分析 | 第42页 |
| 2.2.4 毒力基因 PCR 扩增 | 第42页 |
| 2.2.5 抗生素敏感性分析 | 第42-43页 |
| 2.2.6 RAPD 分型 | 第43页 |
| 2.2.7 ERIC-PCR 分型 | 第43-44页 |
| 2.3 结果 | 第44-50页 |
| 2.3.1 不同食品类型污染率 | 第44-46页 |
| 2.3.2 谱系型分型 | 第46页 |
| 2.3.3 抗生素抗性分析 | 第46页 |
| 2.3.4 ERIC-PCR 分型 | 第46-48页 |
| 2.3.5 RAPD 分型 | 第48-49页 |
| 2.3.6 毒力基因分析 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-52页 |
| 2.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第三章 华南四省生鲜食品中单增李斯特菌风险识别与遗传多样性分析 | 第53-73页 |
| 3.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第54页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 3.2.1 样品采集 | 第54-55页 |
| 3.2.2 定性分析 | 第55页 |
| 3.2.3 定量分析 | 第55-56页 |
| 3.2.4 谱系型分析 | 第56页 |
| 3.2.5 ERIC-PCR 分型 | 第56页 |
| 3.2.6 菌株库构建 | 第56页 |
| 3.2.7 RAPD 分型 | 第56-57页 |
| 3.2.8 遗传多样性分析 | 第57页 |
| 3.2.9 毒力基因 PCR 扩增 | 第57页 |
| 3.2.10 抗生素敏感性分析 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-68页 |
| 3.3.1 不同食品类型污染率 | 第57-58页 |
| 3.3.2 不同食品类型污染水平 | 第58-59页 |
| 3.3.3 谱系型分型 | 第59页 |
| 3.3.4 ERIC-PCR 分型 | 第59-60页 |
| 3.3.5 RAPD 分型 | 第60-65页 |
| 3.3.6 毒力基因存在情况 | 第65页 |
| 3.3.7 抗生素抗性分析 | 第65-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-71页 |
| 3.5 本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 金针菇生产过程中单增李斯特菌污染溯源研究 | 第73-87页 |
| 4.1 实验材料 | 第73-74页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第73-74页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第74页 |
| 4.2 实验方法 | 第74-76页 |
| 4.2.1 采样和菌株分离鉴定 | 第74-75页 |
| 4.2.2 谱系型分析 | 第75页 |
| 4.2.3 遗传多样性分析 | 第75页 |
| 4.2.4 结晶紫染色法测定菌膜形成能力 | 第75-76页 |
| 4.2.5 电子扫描显微镜观察生物膜形成 | 第76页 |
| 4.3 结果 | 第76-84页 |
| 4.3.1 李斯特菌污染情况 | 第76页 |
| 4.3.2 谱系型分析 | 第76-78页 |
| 4.3.3 ERIC-PCR 分析 | 第78页 |
| 4.3.4 RAPD 分型 | 第78-79页 |
| 4.3.5 分型方法比较 | 第79-83页 |
| 4.3.6 菌膜形成能力 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-85页 |
| 4.5 本章小结 | 第85-87页 |
| 第五章 单增李斯特菌 798-1WT 全基因组测序分析 | 第87-93页 |
| 5.1 实验材料 | 第87页 |
| 5.2 实验方法 | 第87-89页 |
| 5.2.1 基因组 DNA 提取 | 第87-88页 |
| 5.2.2 基因组文库构建、测序与组装 | 第88页 |
| 5.2.3 基因 ORF 预测与注释 | 第88页 |
| 5.2.4 单增李斯特菌的比较基因组学 | 第88-89页 |
| 5.3 实验结果 | 第89-91页 |
| 5.3.1 单增李斯特菌 798-1WT 基因组组装及其基本特征 | 第89页 |
| 5.3.2 比较基因组学 | 第89-91页 |
| 5.4 讨论 | 第91-92页 |
| 5.5 本章小结 | 第92-93页 |
| 第六章 单增李斯特菌群体感应与生物膜形成关系研究 | 第93-111页 |
| 6.1 实验材料 | 第94-95页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第94页 |
| 6.1.2 实验试剂配制 | 第94页 |
| 6.1.3 实验材料和实验设备 | 第94-95页 |
| 6.2 实验方法 | 第95-101页 |
| 6.2.1 引物设计与 PCR 扩增 | 第95页 |
| 6.2.2 CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第95-96页 |
| 6.2.3 单核细胞增生李斯特菌感受态细胞的制备 | 第96页 |
| 6.2.4 同源重组载体和回复载体构建与筛选 | 第96-98页 |
| 6.2.5 同源重组突变株筛选与鉴定 | 第98-100页 |
| 6.2.6 生长曲线测定 | 第100页 |
| 6.2.7 菌株表型特征观察 | 第100页 |
| 6.2.8 生物膜形成能力测定 | 第100页 |
| 6.2.9 不同菌株抗氧胁迫能力的测定 | 第100-101页 |
| 6.3 结果 | 第101-109页 |
| 6.3.1 ΔluxS、ΔagrD 基因同源重组载体构建与突变株筛选 | 第101-103页 |
| 6.3.2 luxS、agrD 基因同源回复载体构建与回复株筛选株筛选 | 第103-104页 |
| 6.3.3 ΔluxSΔagrD 双基因缺失株筛选 | 第104-105页 |
| 6.3.4 生长曲线测定 | 第105-106页 |
| 6.3.5 菌株表型特征 | 第106-107页 |
| 6.3.6 野生株和突变株在生物膜形成能力的差异 | 第107-108页 |
| 6.3.7 缺失株对抗 H2O2胁迫能力测定 | 第108-109页 |
| 6.4 讨论 | 第109-110页 |
| 6.5 本章小结 | 第110-111页 |
| 结论与展望 | 第111-115页 |
| 参考文献 | 第115-135页 |
| 附录 | 第135-165页 |
| 攻读博士学位取得的研究成果 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167-168页 |
| 附件 | 第168页 |
