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外源基因在家蚕中的插入与表达研究
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外源基因在家蚕中的插入与表达研究
论文目录
 
中文摘要第1-5 页
英文摘要第5-11 页
第一章 转基因蚕研究进展第11-13 页
第一节 转基因蚕研究中采用的报告基因第13-49 页
　　1．1 绿色荧光蛋白第13-14 页
　　1．2 荧光素酶第14-16 页
　　1．3 新霉素抗性基因第16 页
　　1．4 氯霉素乙酰转移酶第16-17 页
　　1．5 Lac-Z第17-18 页
　　第二节 外源基因导入蚕的方法第18-26 页
　　　　2．1 显微注射法第18-20 页
　　　　2．2 精子介导的外源DNA导入法第20-21 页
　　　　2．3 基因枪法第21-23 页
　　　　2．4 电穿孔法第23 页
　　　　2．5 病毒介导法第23-25 页
　　　　2．6 脉冲场电泳法第25-26 页
　　第三节 外源基因向基因组的整合与表达第26-38 页
　　　　3．1 启动子第26-29 页
　　　　3．2 整合策略第29-34 页
　　　　3．3 影响表达的因素第34-38 页
　　第四节 整合、表达的检测和系统维持第38-49 页
　　　　4．1 检测第38-39 页
　　　　4．2 转基因蚕个体筛选及系统维持第39-40 页
　　　　参考文献第40-49 页
第二章 材料和方法第49-66 页
　　第一节 材料第49-55 页
　　第二节 方法第55-66 页
第三章 新霉素抗性转基因蚕第66-80 页
　　摘要第66-68 页
　　第一节 材料和方法第68-70 页
　　　　1．1 材料第68 页
　　　　1．2 方法第68-70 页
　　第二节 结果第70-77 页
　　　　2．1 质粒的构建第70 页
　　　　2．2 质粒pFN转染家蚕Bm-N细胞第70 页
　　　　2．3 G418抗性细胞的基因组DNA检测第70 页
　　　　2．4 用含新霉素人工饲料饲育筛选转基因蚁蚕第70-75 页
　　　　2．5 Neo~R基因在家蚕基因组中的整合检测第75-77 页
　　第三节 讨论第77-80 页
　　　　3．1 质粒的构建第77 页
　　　　3．2 实验用含新霉素的人工饲料第77 页
　　　　3．3 导入方法第77 页
　　　　3．4 以Neo~R为选择标记第77-78 页
　　　　参考文献第78-80 页
第四章 抗NPV核酶转基因蚕第80-117 页
　　摘要第80-84 页
　　第一节 材料和方法第84-87 页
　　　　1．1 材料第84-85 页
　　　　1．2 方法第85-87 页
　　第二节 结果第87-111 页
　　　　2．1 质粒的构建和导入第87-89 页
　　　　2．2 转基因蚕的筛选、继代第89-99 页
　　　　2．3 核酶在家蚕基因组的插入表达第99-105 页
　　　　2．4 转基因家蚕体内核酶的活性鉴定第105-109 页
　　　　2．5 转基因家蚕体内荧光素酶活性的检测第109-111 页
　　第三节 讨论第111-117 页
　　　　3．1 载体的构建第111-112 页
　　　　3．2 转基因蚕的筛选和继代第112-113 页
　　　　3．3 核酶在家蚕基因组的整合分析第113-114 页
　　　　3．4 核酶活性的检测第114-115 页
　　　　3．5 核酶对BmNPV的“基因治疗”第115 页
　　　　3．6 结语第115-116 页
　　　　参考文献第116-117 页
第五章 利用同源重组将GFP导入家蚕、整合至Fib-L链第117-134 页
　　摘要第117-119 页
　　第一节 材料和方法第119-122 页
　　　　1．1 材料第119 页
　　　　1．2 方法第119-122 页
　　第二节 结果第122-131 页
　　　　2．1 构建同源重组质粒p2GFP3第122-127 页
　　　　2．2 转基因蚕的继代第127 页
　　　　2．3 同源重组的检测第127-129 页
　　　　2．4 蛋白质的鉴定第129-130 页
　　　　2．5 蛋白溶液中GFP的ELASA的鉴定第130-131 页
　　第三节 讨论第131-134 页
　　参考文献第134 页
第六章 小结第134-140 页
研究生期间发表论文第140-141 页
致谢第141页

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