苦荞麦胰蛋白酶抑制剂的分离纯化、基因克隆表达及其抗病虫害研究



苦荞麦胰蛋白酶抑制剂的分离纯化、基因克隆表达及其抗病虫害研究

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苦荞麦胰蛋白酶抑制剂的分离纯化、基因克隆表达及其抗病虫害研究

论文目录
中文摘要	第1-6页
Abstract	第6-11页
第一章文献综述	第11-25页
· 植物病虫害的危害	第11-13页
· 蛋白酶抑制剂研究进展	第13-16页
· 荞麦蛋白酶抑制剂研究进展	第16-17页
· 植物基因的克隆和表达	第17-20页
· 荞麦胰蛋白酶抑制剂的研究现状	第20-22页
· 目前存在的问题和研究前景	第22-23页
· 本次研究的目的和意义	第23-25页
第二章苦荞胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质分析	第25-44页
1. 材料、试剂和仪器	第25-26页
· 材料	第25页
· 试剂和仪器	第25-26页
2. 方法	第26-33页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂的分离纯化方案	第26-27页
· FtTI的提取和纯化	第27-29页
· 胰蛋白酶抑制剂活性测定	第29-30页
· FtTI的抑制动力学参数测定	第30页
· 聚丙烯酰胺凝胶电泳	第30页
· 蛋白质含量测定采用Bradford法	第30页
· 基质辅助飞行时间质谱分析	第30-31页
· 氨基酸组成分析及N-端氨基酸序列测定	第31-32页
· FtTI的pH和热稳定性	第32页
· FtTI的钝化	第32-33页
3. 结果与分析	第33-41页
· FtTI的纯化	第33-35页
· FtTI的质谱分析	第35页
· FtTI的抑制动力学参数分析	第35-37页
· FtTI的氨基酸含量和N-端氨基酸序列测定	第37-38页
· FtTI的pH和热稳定性	第38-39页
· FtTI的钝化	第39-41页
4. 讨论	第41-44页
· FtTI的分离纯化	第41-42页
· FtTI的性质分析	第42-44页
第三章苦荞胰蛋白酶抑制剂基因全长序列的克隆表达	第44-74页
1. 材料、试剂和仪器	第44-46页
· 材料	第44页
· 试剂和仪器	第44-45页
· 培养基	第45-46页
2. 实验方法	第46-59页
· 实验路线	第46页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂基因全长序列的克隆	第46-54页
· FtTI基因全长序列的获得及其在毕赤酵母中的高效表达	第54-58页
· GS115-FtTI表达条件的优化	第58-59页
· GS115-FtTI表达产物的纯化	第59页
· rFtTI的抑制活力及抑制常数的测定	第59页
3. 结果与分析	第59-70页
· 苦荞麦DNA和RNA的提取	第59-60页
· FtTI基因保守区的克隆	第60-61页
· FtTI基因5'末端序列的克隆	第61-62页
· FtTI基因3'末端序列的克隆	第62页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂基因全长序列的拼接	第62-65页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂基因全长序列的获得	第65-66页
· pPIC9k-FtTI在毕赤酵母中的高效表达	第66页
· GS115-FtTIⅦ表达条件的优化	第66-69页
· rFtTI的纯化及抑制活性检测	第69-70页
4. 讨论	第70-74页
· 荞麦胰蛋白酶抑制剂基因研究现状	第70-71页
· 引物设计	第71页
· 重组表达载体的构建	第71-72页
· 毕赤酵母表达研究	第72页
· 表达条件优化研究	第72-73页
· 重组苦荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导表达、纯化和鉴定	第73-74页
第四章苦荞胰蛋白酶抑制剂的抗病虫害研究	第74-87页
1. 材料、试剂和仪器	第74-76页
· 材料	第74-75页
· 试剂和仪器	第75页
· 培养基	第75-76页
2. 实验方法	第76-77页
· 抑制植物病原真菌实验	第76-77页
· FtTI的抗虫性研究	第77页
3. 结果与分析	第77-85页
· FtTI的抗病原真菌效果	第77-81页
· FtTI纯化产物的抗虫效果	第81-85页
4. 讨论	第85-87页
· FtTI的抗植物病原真菌实验	第85页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂的抗虫性研究	第85-86页
· 苦荞麦胰蛋白酶抑制剂应用前景	第86-87页
小结	第87-89页
本论文主要的创新点	第87页
研究展望	第87-89页
参考文献	第89-93页
致谢	第93-94页
1.申请专利	第94页
2.发表论文	第94页
3.在审论文	第94-95 页

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