论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10
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| 英文摘要 | 第10-12
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| 1 引言 | 第12-25
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| · 兔病毒性出血症的流行现状 | 第12-13
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| · 兔病毒出血症病原学分类及主要生物学特征 | 第13-14
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| · 病毒基因组结构与功能 | 第14-15
页 |
| · RHDV的结构蛋白与非结构蛋白 | 第15-16
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| · 结构蛋白 | 第15-16
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| · 非结构蛋白 | 第16
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| · 兔病毒性出血症疫苗研究进展 | 第16-19
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| · 兔病毒性出血症灭活疫苗研究进展 | 第16-17
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| · 不同载体表达兔出血症病毒VP60蛋白研究进展 | 第17-19
页 |
| · 乳酸菌概述 | 第19-23
页 |
| · 乳酸菌的益生作用 | 第19
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| · 乳酸菌的抑菌作用 | 第19-20
页 |
| · 乳酸菌的表达系统 | 第20-21
页 |
| · 乳酸菌与黏膜免疫 | 第21-22
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| · 乳酸菌作为口服疫苗载体研究进展 | 第22-23
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| · 本研究的目的及意义 | 第23-25
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| 2 材料与方法 | 第25-41
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| · 试验材料 | 第25-28
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| · 病料、菌株 | 第25
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| · 抗体与检测制剂 | 第25
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| · 主要试剂 | 第25
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| · 试验动物 | 第25
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| · 培养基及溶液的配制 | 第25-26
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| · 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)主要试剂 | 第26
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| · 间接ELISA检测抗体主要试剂 | 第26-27
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| · 免疫印迹(Western-blot)主要试剂 | 第27
页 |
| · 主要实验仪器与设备 | 第27
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| · 引物合成 | 第27-28
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| · 试验方法 | 第28-41
页 |
| · 病料的处理及动物感染 | 第28-29
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| · VP60基因的克隆及序列测定 | 第29-31
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| · 目的基因VP60的亚克隆与鉴定 | 第31-35
页 |
| · 重组干酪乳杆菌的构建 | 第35-38
页 |
| · 重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第38-39
页 |
| · 口服重组干酪乳杆菌免疫学指标的测定 | 第39-40
页 |
| · 免疫兔攻RHDV保护性试验 | 第40-41
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| 3 实验结果 | 第41-55
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| · RHDV的鉴定 | 第41
页 |
| · 敏感兔接种试验 | 第41
页 |
| · HA和HI试验 | 第41
页 |
| · 病毒VP60基因的RT-PCR | 第41
页 |
| · VP60基因的序列测定及生物信息学分析 | 第41-42
页 |
| · 重组质粒pMD18-T-VP60的鉴定结果 | 第42
页 |
| · 重组乳酸菌表达载体的鉴定 | 第42-46
页 |
| · 表面表达型重组载体pPG-1-VP60的鉴定结果 | 第42-46
页 |
| · 分泌表达型重组载体pPG-2-VP60的鉴定结果 | 第46
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| · 重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定 | 第46-50
页 |
| · 细胞表面表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第46-48
页 |
| · 分泌表达型重组干酪乳杆菌的诱导表达鉴定结果 | 第48-50
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| · 重组乳酸菌口服免疫兔免疫学指标的测定 | 第50-55
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| · ELISA方法检测免疫兔血清中抗RHDV-VP60特异性抗体IgG测定 | 第50-51
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| · 应用血凝抑制试验检测免疫兔的血清效价 | 第51
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| · 家兔粪便中抗RHDV-VP60特异性sIgA检测结果 | 第51
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| · 家兔鼻洗液中抗RHDV-VP60特异性sIgA检测结果 | 第51
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| · 免疫兔攻RHDV保护性试验 | 第51-55
页 |
| 4 讨论 | 第55-60
页 |
| · 兔病毒性出血症病毒09-SD株衣壳蛋白的遗传变异分析 | 第55-56
页 |
| · 口服重组干酪乳杆菌诱导的体液免疫应答 | 第56-57
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| · 口服重组干酪乳杆菌诱导的免疫保护作用 | 第57-58
页 |
| · 表面表达和分泌表达诱导免疫应答的差异分析 | 第58-60
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| 5 结论 | 第60-61
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| 致谢 | 第61-62
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| 参考文献 | 第62-69
页 |
| 附录 | 第69-70
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| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
