论文目录 | |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 中英文缩写对照 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 酵母研究背景简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 酵母细胞周期及其特征 | 第11-12页 |
| 1.1.2 酵母细胞基因组特征 | 第12页 |
| 1.1.3 酵母细胞研究模型优势 | 第12-14页 |
| 1.2 综述 | 第14-21页 |
| 1.2.1 Pol5的DNA聚合酶功能 | 第14页 |
| 1.2.2 Pol5的核糖体DNA转录调控功能 | 第14-16页 |
| 1.2.3 Pol5的功能简介 | 第16-18页 |
| 1.2.4 MYBBP1A的功能简介 | 第18-19页 |
| 1.2.5 MYBBP1A与P53基因及癌症的关系 | 第19-20页 |
| 1.2.6 MYBBP1A的细胞周期调控 | 第20页 |
| 1.2.7 蛋白磷酸化修饰的功能与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验菌株 | 第21页 |
| 2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.4 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.4.0 常用培养基的配制 | 第22-24页 |
| 2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.4.2 质粒DNA pCloneNat Pol5和pdbletPol5HA的大肠杆菌转化 | 第25页 |
| 2.4.3 pCloneNatPol5和pdblet Pol5HA的大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.4.4 质粒DNA pCloneNatPol5和pdbletPol5HA的酶切反应 | 第26页 |
| 2.4.5 Qiagen DNA回收试剂盒回收酶切产物 | 第26页 |
| 2.4.6 二次酶切反应 | 第26-27页 |
| 2.4.7 Qiagen凝胶回收试剂盒回收目的片段 | 第27-28页 |
| 2.4.8 酶切反应后的CIP处理 | 第28页 |
| 2.4.9 酶切产物的连接反应 | 第28-29页 |
| 2.4.10 连接产物的大肠杆菌DH5α 转化 | 第29页 |
| 2.4.11 大肠杆菌的质粒测序 | 第29页 |
| 2.4.12 大肠杆菌的冻存 | 第29-30页 |
| 2.4.13 酵母重组DNA的制备 | 第30页 |
| 2.4.14 酵母DNA重组转化 | 第30-31页 |
| 2.4.15 酵母菌株冻存 | 第31页 |
| 2.4.16 酵母总蛋白提取 | 第31-32页 |
| 2.4.17 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32页 |
| 2.4.18 蛋白转移致硝酸纤维素膜上 | 第32-33页 |
| 2.4.19 Western blotting | 第33页 |
| 2.4.20 PCloneNatPol5HA定点突变质粒的构建、基因重组及表达 | 第33-35页 |
| 2.4.21 所得酵母株的细胞核DAPI染色 | 第35-36页 |
| 第3章 实验结果 | 第36-54页 |
| 3.1 pCloneNatpol5HA质粒的构建 | 第36-44页 |
| 3.2 pCloneNatpol5HA质粒的同源重组与表达 | 第44-45页 |
| 3.3 pCloneNatpol5HA定位点突变质粒的构建 | 第45-51页 |
| 3.4 pCloneNatpol5HA定位点突变质粒的同源重组与表达 | 第51-54页 |
| 第4章 讨论 | 第54-56页 |
| 第5章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 作者简介及发表论文情况 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
