论文目录 | |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
引言 | 第9-17页 |
1. OVATE蛋白家族的研究进展 | 第9-13页 |
1.1 OVATE基因的发现 | 第9页 |
1.2 OVATE蛋白的结构 | 第9-10页 |
1.3 拟南芥OVATE蛋白家族的分类和功能分析 | 第10-13页 |
2. ER对拟南芥荚果形态的调控 | 第13-14页 |
3. 蛋白磷酸化修饰 | 第14-15页 |
4. 本论文的研究目的及意义 | 第15-17页 |
材料与方法 | 第17-34页 |
1. 实验材料 | 第17-22页 |
1.1 植物材料 | 第17页 |
1.2 质粒和菌株 | 第17页 |
1.3 试剂与试剂盒 | 第17-19页 |
1.4 仪器与设备 | 第19页 |
1.5 引物设计与合成 | 第19-20页 |
1.6 培养基及主要缓冲液的配制 | 第20-22页 |
2. 实验方法 | 第22-34页 |
2.1 载体的构建 | 第22-25页 |
2.2 基因定点突变系统 | 第25-27页 |
2.3 拟南芥的培养 | 第27页 |
2.4 拟南芥基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
2.5 拟南芥RNA的提取、反转录及PCR | 第28-30页 |
2.6 拟南芥原生质体瞬时转染 | 第30-31页 |
2.7 拟南芥亚细胞定位的观察 | 第31页 |
2.8 拟南芥的转化和转基因纯合体植株的筛选 | 第31-33页 |
2.9 GUS组织化学染色 | 第33页 |
2.10 拟南芥植株的有性杂交 | 第33-34页 |
结果与分析 | 第34-45页 |
1. AtOFP15是一个转录抑制子 | 第34-36页 |
1.1 载体pUC-GFP-At OFP15的构建 | 第34页 |
1.2 AtOFP15是核定位蛋白 | 第34-35页 |
1.3 AtOFP15具有转录抑制活性 | 第35-36页 |
2. AtOFP15是被动抑制子 | 第36-39页 |
2.1 载体pUC-GD-AtOFP15-VP16和pPZP211-AtOFP15-VP16的构建 | 第36-37页 |
2.2 AtOFP15-VP16具有转录激活活性 | 第37页 |
2.3 过量表达AtOFP15和AtOFP15-VP16的转基因植物表型比较 | 第37-39页 |
3. AtOFP15在拟南芥中的表达模式 | 第39-40页 |
4. AtOFP15与ER在调控荚果形态上的关系 | 第40-42页 |
4.1 过量表达ER可恢复过表达AtOFP15的表型 | 第40页 |
4.2 过量表达AtOFP15-VP16不影响er突变体的表型 | 第40-41页 |
4.3 敲除AtOFP15基因不影响er突变体植株的表型 | 第41-42页 |
5. 蛋白磷酸化对AtOFP15功能的影响 | 第42-45页 |
5.1 构建AtOFP15磷酸化位点突变体 | 第42-43页 |
5.2 突变后植株表型分析 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-47页 |
1. AtOFP15是一个核定位的转录抑制子 | 第45页 |
2. AtOFP15与ER通过同一信号途径调控荚果形态 | 第45-46页 |
3. AtOFP15第 216、219 位氨基酸的磷酸化并不影响其功能 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
在校期间学术成果情况 | 第57页 |