应用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得高直链淀粉马铃薯
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应用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得高直链淀粉马铃薯
论文目录
摘要
第4-6页
ABSTRACT
第6-10页
缩略词
第10-11页
一. 前言
第11-19页
1.1 马铃薯
第11页
1.2 马铃薯直链淀粉及淀粉分支酶
第11-14页
1.2.2 马铃薯直链淀粉特性及应用
第11-12页
1.2.3 淀粉合成途径及相关酶
第12-13页
1.2.4 淀粉分支酶基因(SBE)
第13-14页
1.3 CRISPR-Cas9基因编辑技术
第14-18页
1.3.1 CRISPR技术基本原理及优势
第14-16页
1.3.2 CRISPR技术在动植物中的应用
第16-17页
1.3.3 CRISPR编辑效率的影响因素
第17-18页
1.4 研究目的和意义
第18-19页
二. 实验材料与方法
第19-27页
2.1 实验材料
第19-20页
2.1.1 植物材料
第19页
2.1.2 菌株
第19页
2.1.3 载体
第19页
2.1.4 试剂与仪器
第19-20页
2.2 实验方法
第20-27页
2.2.1 设计基因靶序列
第20页
2.2.2 CRISPR载体构建
第20-22页
2.2.3 三亲融合法
第22页
2.2.4 马铃薯试管苗的培养
第22-23页
2.2.5 农杆菌介导的马铃薯茎段转化
第23页
2.2.6 植物基因组DNA的提取
第23页
2.2.7 阳性株鉴定
第23-24页
2.2.8 测序检测阳性株打靶效果
第24-25页
2.2.9 盆苗种植及薯块收获
第25页
2.2.10 直链淀粉含量测定
第25-27页
三. 实验结果
第27-41页
3.1 载体构建
第27-30页
3.1.1 SBEⅠ和SBEⅡ靶序列选择及合成
第27-28页
3.1.2 载体构建及阳性筛选
第28-30页
3.2 马铃薯转化株的获得及鉴定
第30-35页
3.2.1 转化株的获得
第30-32页
3.2.2 转化株打靶检测
第32-35页
3.3 收获及测产
第35-37页
3.4 直链淀粉含量测定
第37页
3.5 载体优化
第37-41页
四. 讨论
第41-42页
参考文献
第42-45页
附表1 引物序列
第45-46页
附录2 培养基、试剂配方及贮存
第46-48页
附录3 实验方法与操作
第48-52页
致谢
第52页
本篇论文共
52
页,
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