论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5
页 |
| Abstract | 第5-11
页 |
| 1 绪论 | 第11-19
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| · 植物的耐盐机理 | 第11-12
页 |
| · 植物的盐害 | 第11-12
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| · 植物的耐盐性 | 第12
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| · 基因组学方法在植物耐盐机理研究中的应用 | 第12-15
页 |
| · EST分析技术及应用 | 第13-14
页 |
| · cDNA微阵列技术在植物抗逆研究中的应用 | 第14-15
页 |
| · 耐盐基因分类及液泡型H~+-ATPase c亚基基因主要研究进展 | 第15-16
页 |
| · 耐盐基因的分类 | 第15
页 |
| · 液泡型H~+-ATPase c亚基基因功能研究进展 | 第15-16
页 |
| · 二色补血草简介 | 第16-17
页 |
| · 生物学特性 | 第16
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| · 作为耐盐研究材料的可行性 | 第16-17
页 |
| · 本项研究的目的和意义 | 第17
页 |
| · 研究的目的 | 第17
页 |
| · 研究的意义 | 第17
页 |
| · 本研究的主要内容及技术路线 | 第17-19
页 |
| · 本研究的主要内容 | 第17
页 |
| · 技术路线 | 第17-19
页 |
| 2 NaHCO_3胁迫下二色补血草基因表达的研究 | 第19-51
页 |
| · 实验材料 | 第19-20
页 |
| · 植物材料 | 第19
页 |
| · 酶及主要化学试剂 | 第19
页 |
| · 主要仪器设备 | 第19-20
页 |
| · 实验方法 | 第20-32
页 |
| · 二色补血草总RNA提取 | 第20-21
页 |
| · 磁性球珠分离mRNA | 第21
页 |
| · cDNA第一、二链合成 | 第21-22
页 |
| · cDNA末端处理与分步收集 | 第22-24
页 |
| · cDNA连接与包装 | 第24-25
页 |
| · 插入片段的PCR检测 | 第25
页 |
| · 噬菌体的体外切除 | 第25-26
页 |
| · 菌体培养与保存 | 第26-27
页 |
| · 质粒提取 | 第27
页 |
| · cDNA序列的测定 | 第27-28
页 |
| · 序列的编辑与分析 | 第28-29
页 |
| · cDNA芯片的制备 | 第29-30
页 |
| · 荧光标记与芯片杂交 | 第30
页 |
| · 数据分析 | 第30-31
页 |
| · cDNA芯片数据的可信度验证 | 第31-32
页 |
| · EST序列分析及二色补血草表达谱的建立 | 第32
页 |
| · 结果与分析 | 第32-49
页 |
| · 总RNA提取 | 第32
页 |
| · mRNA的分离 | 第32-33
页 |
| · cDNA文库的构建及质量检测 | 第33-34
页 |
| · cDNA文库测序 | 第34
页 |
| · cDNA文库ESTs分析 | 第34-37
页 |
| · cDNA芯片数据分析 | 第37-48
页 |
| · 二色补血草耐盐途径分析 | 第48-49
页 |
| · 本章小结 | 第49
页 |
| · 讨论 | 第49-51
页 |
| 3 二色补血草VHA-c基因生物信息学分析及其在盐碱胁迫下的表达模式 | 第51-59
页 |
| · 二色补血草VHA-c基因的生物信息学分析 | 第51-55
页 |
| · VHA-c亚基基因的序列分析 | 第51-52
页 |
| · VHA-c基因的疏水性预测 | 第52
页 |
| · VHA-c基因的跨膜区预测 | 第52-53
页 |
| · VHA-c基因多序列比对与分子进化树分析 | 第53-55
页 |
| · 二色补血草VHA-c基因应答盐碱胁迫的表达模式 | 第55-57
页 |
| · 材料处理 | 第55
页 |
| · 实验方法 | 第55
页 |
| · 结果与分析 | 第55-57
页 |
| · 本章小结 | 第57
页 |
| · 讨论 | 第57-59
页 |
| 4 二色补血草VHA-c基因对烟草的遗传转化 | 第59-71
页 |
| · 植物表达载体构建 | 第59-62
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| · 实验材料 | 第59
页 |
| · 实验方法 | 第59-60
页 |
| · 结果与分析 | 第60-62
页 |
| · 根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第62-63
页 |
| · 实验材料 | 第62-63
页 |
| · 实验方法 | 第63
页 |
| · 转VHA-c基因烟草的分子检测 | 第63-71
页 |
| · 试剂 | 第63-64
页 |
| · 仪器设备 | 第64-65
页 |
| · 实验方法 | 第65-68
页 |
| · 结果与分析 | 第68-69
页 |
| · 本章小结 | 第69-70
页 |
| · 讨论 | 第70-71
页 |
| 5 以烟草为载体的二色补血草VHA-c基因功能验证 | 第71-79
页 |
| · 实验材料 | 第71
页 |
| · 植物材料 | 第71
页 |
| · 主要试剂 | 第71
页 |
| · 仪器设备 | 第71
页 |
| · 实验方法 | 第71-73
页 |
| · NaCl胁迫处理及取材 | 第71
页 |
| · 超氧化歧化酶(SOD)活性测定 | 第71-72
页 |
| · 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第72-73
页 |
| · 丙二醛(MDA)含量测定 | 第73
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| · 相对生长量测定 | 第73
页 |
| · 相对含水量测定 | 第73
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| · 结果与分析 | 第73-78
页 |
| · NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草SOD活性比较 | 第73-74
页 |
| · NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草POD活性比较 | 第74-75
页 |
| · NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草MDA含量比较 | 第75-77
页 |
| · NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草相对生长量比较 | 第77
页 |
| · NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草相对含水量比较 | 第77-78
页 |
| · 本章小结 | 第78
页 |
| · 讨论 | 第78-79
页 |
| 6 讨论 | 第79-83
页 |
| · NaHCO_3胁迫二色补血草基因表达谱的建立 | 第79
页 |
| · 二色补血草的耐盐途径分析 | 第79-80
页 |
| · 二色补血草VHA-c基因及其在盐胁迫下的表达模式分析 | 第80
页 |
| · 二色补血草VHA-c基因对烟草的遗传转化及耐盐性分析 | 第80-83
页 |
| · 转基因烟草的耐盐性增强 | 第80-81
页 |
| · 转基因烟草耐盐性提高与Northern杂交结果的相关性分析 | 第81-82
页 |
| · VHA-c基因功能评价 | 第82-83
页 |
| 结论 | 第83-84
页 |
| 参考文献 | 第84-92
页 |
| 附录 | 第92-93
页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第93-94
页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
