转TaEDR1反义基因抗白粉病小麦的选育
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转TaEDR1反义基因抗白粉病小麦的选育
论文目录
致谢
第1-8页
摘要
第8-9页
1 文献综述
第9-22页
· 小麦抗白粉病机制
第9-11页
· 植物的专化抗病性
第9页
· 植物的诱导抗病性
第9-11页
· 水杨酸介导的信号传导途径
第10页
· 水杨酸与乙烯/茉莉酸的信号交叉
第10-11页
· 蛋白质磷酸化在信号传导中的作用
第11页
· 防卫系统
第11页
· 拟南芥EDR1 基因的研究进展
第11-13页
· 抗病调控基因EDR1 的分子机制
第12页
· 拟南芥EDR1 基因的研究进展
第12-13页
· 植物抗病相关基因的克隆方法
第13-16页
· 图位克隆法
第13页
· 基因芯片杂交技术
第13-14页
· RACE 技术
第14-16页
· RACE 技术概述
第14-15页
· Matz 改进后的5'-RACE 原理
第15页
· 获取全长cDNA 克隆的方法
第15页
· RACE 技术的优点
第15页
· RACE 技术的的缺点
第15页
· RACE 技术的应用
第15-16页
· 植物转基因方法
第16-20页
· 农杆菌介导法
第16-17页
· 基因枪法
第17页
· 花粉管通道法
第17-19页
· 花粉管通道法概述
第17-18页
· 花粉管通道法的原理
第18页
· 花粉管通道法的应用
第18页
· 花粉管通道法的优缺点
第18-19页
· 花粉管通道法研究进展
第19页
· 小麦转基因研究趋势
第19-20页
· 小麦抗白粉病转基因研究进展
第20-22页
· 防卫基因的研究
第20页
· 转抗真菌蛋白(Ag-AFP)、第Ⅱ类大麦几丁质酶和大麦Ⅰ型RIP
第20-21页
· 转β-1,3 葡聚糖酶基因(BG2)
第21页
· 转TaPR-1
第21-22页
2 研究报告
第22页
3 材料和方法
第22-30页
· 材料
第22-23页
· 植物材料
第22页
· 菌株与载体
第22页
· 仪器与试剂
第22-23页
· 方法
第23-30页
· 小麦抗白粉病调控基因 TaEDR1 的克隆与分析
第23-27页
· 总RNA 提取
第23页
· 总RNA 定量与完整性检测
第23页
· mRNA 的分离
第23-24页
· RACE
第24页
· PCR 扩增
第24-25页
· RACE 产物的纯化回收
第25页
· 回收DNA 与TE 载体连接
第25页
· 制备感受态细胞
第25页
· 转化(热击法)
第25页
· 小量提取质粒DNA
第25-26页
· 酶切、扩增检测
第26页
· 同源性比较及开放读码框寻找
第26页
· Semi-QRT-PCR
第26-27页
· pAHC25-anti2-TaEDR1 载体构建
第27-28页
· PCR 扩增
第27页
· 酶切表达载体以及扩增产物
第27-28页
· 感受态细胞的制备
第28页
· 转化
第28页
· 小量提取质粒 DNA
第28页
· 载体构建检测
第28页
· 质粒DNA 的大量提取
第28页
· 花粉管通道法进行遗传转化
第28页
· 转基因植株筛选
第28-30页
· 转基因植株的PPT 抗性筛选
第28-29页
· 田间成株白粉病抗性鉴定
第29页
· 转基因植株的分子检测
第29-30页
4 结果与分析
第30-42页
· 小麦TaEDR1 基因的克隆与分析
第30-36页
· 总RNA 的质量的检测
第30-31页
· 小麦TaEDR1 基因的全长cDNA 克隆
第31页
· 小麦TaEDR1 基因编码蛋白结构分析
第31页
· TaEDR1 基因在小麦叶片中的表达分析
第31页
· TaEDR1 基因在小麦其它器官中的表达分析
第31-36页
· 表达载体的构建及鉴定
第36-38页
· pAHC25-anti2-TaEDR1 导入小麦
第38页
· T_0 代转基因植株的获得
第38-42页
· 转基因植株幼苗期筛选
第38-40页
· PPT 抗性筛选
第39页
· 抗性植株的分子检测
第39-40页
· 转基因植株成株期筛选
第40-41页
· 大田白粉病鉴定结果
第40页
· 抗性植株分子检测
第40-41页
· T_0 转基因植株的收获
第41-42页
5 讨论
第42-44页
· TaEDR1 基因的克隆与分析鉴定
第42页
· 表达载体的构建
第42页
· 转基因植株的获得
第42-43页
· 转基因植物的展望
第43-44页
参考文献
第44-49页
ABSTRACT
第49-50页
本篇论文共
50
页,
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