论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4
页 |
| Abstract | 第4-7
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| 1 绪论 | 第7-17
页 |
| · 目的意义 | 第7-8
页 |
| · 植物新基因克隆策略 | 第8-11
页 |
| · 基于表达序列标签(EST)的基因克隆 | 第8-9
页 |
| · 转座子标签技术 | 第9-10
页 |
| · 定位克隆技术 | 第10
页 |
| · mRNA差异表达筛选克隆基因 | 第10-11
页 |
| · DNA芯片技术在基因克隆上的应用 | 第11
页 |
| · 非特异性脂质转移蛋白 | 第11-13
页 |
| · 非特异性脂质转移蛋白的结构及生化性质 | 第11-13
页 |
| · 非特异性脂质转移蛋白的生物学功能 | 第13
页 |
| · 实时荧光定量PCR技术 | 第13-16
页 |
| · 实时定量PCR的原理 | 第14
页 |
| · 荧光定量PCR反应系统试验设计原则 | 第14-15
页 |
| · 实时定量PCR的优点 | 第15
页 |
| · 实时定量PCR的应用 | 第15-16
页 |
| · 存在的问题及应用前景 | 第16
页 |
| · 有关西伯利亚蓼的研究 | 第16-17
页 |
| 2 西伯利亚蓼抗病基因的克隆、表达分析 | 第17-35
页 |
| · 材料 | 第17-18
页 |
| · 植物材料 | 第17
页 |
| · 菌株与材料 | 第17
页 |
| · 分子生物学及生化试剂 | 第17
页 |
| · 培养基 | 第17
页 |
| · 寡聚核苷酸引物 | 第17
页 |
| · RNA提取缓冲液的配制 | 第17-18
页 |
| · 主要仪器 | 第18
页 |
| · 实验方法 | 第18-35
页 |
| · 植物材料西伯利亚蓼的处理 | 第18
页 |
| · 从SSH中分析筛选抗病相关基因EST | 第18-19
页 |
| · 西伯利亚蓼总RNA的提取 | 第19
页 |
| · 5′RACE及3′RACE模板的cDNA合成 | 第19-20
页 |
| · 西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白基因的克隆和序列分析 | 第20-23
页 |
| · 盐胁迫下PsnsLTPs基因在西伯利亚蓼中的表达特性研究 | 第23-24
页 |
| · 实时荧光定量RT-PCR检测 | 第24
页 |
| · 实验结果 | 第24-30
页 |
| · 西伯利亚蓼不同组织中PsnsLTPs基因的表达特性 | 第30-32
页 |
| · 讨论 | 第32-34
页 |
| · 本章小结 | 第34-35
页 |
| 3 西伯利亚蓼pROKⅡ/PsnsLTPs植物表达载体构建 | 第35-41
页 |
| · 实验材料 | 第35
页 |
| · 植物材料 | 第35
页 |
| · 菌株与质粒 | 第35
页 |
| · 分子生物学试剂及生化试剂 | 第35
页 |
| · 实验方法 | 第35-37
页 |
| · pMD18-T/PsnsLTPs的引物设计合成 | 第35
页 |
| · pMD18-T/psNSLTPs及pROKⅡ大肠杆菌质粒提取 | 第35-36
页 |
| · 获得两端带有XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点的PsnsLTPs片段 | 第36
页 |
| · pMD18-T/PsnsLTPs的PCR产物及pROKⅡ酶切反应 | 第36
页 |
| · pROK Ⅱ/PsnsLTPs连接产物检测 | 第36-37
页 |
| · 重组克隆的筛选 | 第37
页 |
| · 实验结果 | 第37-39
页 |
| · pROKⅡ/PsnsLTPs植物表达载体质粒的PCR验证 | 第37-38
页 |
| · pROKⅡ/PsnsLTPs重组克隆筛选PCR结果 | 第38
页 |
| · pROKⅡ/PsnsLTPs植物表达载体质粒的酶切验证 | 第38-39
页 |
| · 讨论 | 第39-40
页 |
| · 本章小结 | 第40-41
页 |
| 结论 | 第41-42
页 |
| 参考文献 | 第42-48
页 |
| 附录 | 第48-50
页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第50-51
页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
