论文目录 | |
| 中文摘要 | 第11-17页 |
| Abstract | 第17-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-39页 |
| 1.1 杆状病毒 | 第22-29页 |
| 1.1.1 杆状病毒概述 | 第22页 |
| 1.1.2 杆状病毒分类 | 第22-23页 |
| 1.1.3 杆状病毒的发育循环及形态结构 | 第23-24页 |
| 1.1.4 杆状病毒的核心基因和主要的结构蛋白 | 第24-27页 |
| 1.1.5 杆状病毒的启动子 | 第27-28页 |
| 1.1.6 杆状病毒杀虫剂的研究进展 | 第28-29页 |
| 1.2 凋亡抑制因子(Inhibitors of apoptosis，IAPs) | 第29-34页 |
| 1.2.1 凋亡抑制因子的发现 | 第29页 |
| 1.2.2 凋亡抑制因子特征和分类 | 第29-30页 |
| 1.2.3 凋亡抑制因子IAPs的抗凋亡机制 | 第30-34页 |
| 1.3 蝎毒素 | 第34-36页 |
| 1.3.1 蝎毒素概况 | 第34-35页 |
| 1.3.2 蝎毒素的分类 | 第35页 |
| 1.3.3 东亚钳蝎神经毒素BmK IT | 第35-36页 |
| 1.3.4 蝎昆虫神经毒素的研究与应用 | 第36页 |
| 1.4 论文的设计思路 | 第36-39页 |
| 1.4.1 研究内容与意义 | 第36-37页 |
| 1.4.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 1.4.3 实验流程图 | 第38-39页 |
| 第二章 凋亡抑制因子Ac-IAP1/2 的功能分析 | 第39-64页 |
| 2.1 引言 | 第39页 |
| 2.2 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.2.1 主要实验设备 | 第39-40页 |
| 2.2.2 实验所用细胞、病毒、菌株及载体 | 第40页 |
| 2.2.3 主要试剂及其配制 | 第40-41页 |
| 2.2.4 寡聚核苷酸 | 第41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-53页 |
| 2.3.1 重组病毒AcMNPV-iap1/2-egfp的构建 | 第41-50页 |
| 2.3.2 Sf9细胞的培养 | 第50-51页 |
| 2.3.3 病毒粒子滴度 | 第51页 |
| 2.3.4 蚀斑实验分析重组病毒AcMNPV-iap1/2-egfp的效价 | 第51页 |
| 2.3.5 荧光显微镜观察和Western blot检测Ac-IAP1/2-EGFP在AcMNPV- -iap1/2-egfp感染的Sf9细胞中的表达量 | 第51-52页 |
| 2.3.6 蚀斑实验检测重组杆状病毒AcMNPV-iap1/2-egfp增殖能力 | 第52页 |
| 2.3.7 MTT实验分析重组病毒AcMNPV-iap1/2-egfp对Sf9细胞增殖的影响 | 第52页 |
| 2.3.8 虫试实验 | 第52-53页 |
| 2.4 实验结果 | 第53-62页 |
| 2.4.1 重组病毒AcMNPV-iap1-egfp的构建 | 第53-54页 |
| 2.4.2 重组病毒AcMNPV-iap2-egfp的构建 | 第54-56页 |
| 2.4.3 AcMNPV-iap1/2-egfp感染的Sf9细胞中Ac-IAP1/2-EGFP的表达量分析 | 第56-57页 |
| 2.4.4 凋亡抑制因子Ac-IAP1/2 对子代病毒增殖的影响分析 | 第57-59页 |
| 2.4.5 重组病毒AcMNPV-iap1/2-egfp对Sf9细胞增殖的影响分析 | 第59-60页 |
| 2.4.6 重组病毒AcMNPV-iap1/2-egfp的抗虫效率分析 | 第60-62页 |
| 2.5 讨论 | 第62-64页 |
| 第三章 BIR2结构域对于Ac-IAP2的抗凋亡功能至关重要 | 第64-75页 |
| 3.1 引言 | 第64页 |
| 3.2 实验材料 | 第64-65页 |
| 3.2.1 主要实验设备 | 第64页 |
| 3.2.2 实验所用细胞、病毒、菌株及载体 | 第64页 |
| 3.2.3 主要试剂及其配制 | 第64-65页 |
| 3.2.4 寡聚核苷酸 | 第65页 |
| 3.3 实验方法 | 第65-68页 |
| 3.3.1 Ac-IAP1/2 的序列和结构分析 | 第65页 |
| 3.3.2 重组病毒AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp的构建 | 第65-67页 |
| 3.3.3 Sf9细胞的培养 | 第67页 |
| 3.3.4 蚀斑实验分析重组病毒AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp的效价 | 第67-68页 |
| 3.3.5 荧光显微镜观察和Western blot检测Ac-IAP2~(-BIR2 (iap1))-EGFP在AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp感染的Sf9细胞中的表达量 | 第68页 |
| 3.3.6 MTT实验分析重组病毒AcMNPV-iap2-BIR2 (iap1)-egfp对Sf9细胞增殖的影响 | 第68页 |
| 3.4 实验结果 | 第68-73页 |
| 3.4.1 Ac-IAP1/2 的序列与结构 | 第68-69页 |
| 3.4.2 重组病毒AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp的构建 | 第69-72页 |
| 3.4.3 AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp感染的Sf9细胞中Ac-IAP2~(-BIR2 (iap1))-EGFP的表达量 | 第72-73页 |
| 3.4.4 重组病毒AcMNPV-iap2~(-BIR2 (iap1))-egfp对Sf9细胞增殖的影响 | 第73页 |
| 3.5 讨论 | 第73-75页 |
| 第四章 Ac-IAP1/2 对重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10)促凋亡活性的协同效应分析 | 第75-87页 |
| 4.1 引言 | 第75页 |
| 4.2 实验材料 | 第75-76页 |
| 4.2.1 主要实验设备 | 第75页 |
| 4.2.2 实验所用细胞及病毒 | 第75-76页 |
| 4.2.3 主要试剂及其配制 | 第76页 |
| 4.2.4 寡聚核苷酸 | 第76页 |
| 4.3 实验方法 | 第76-80页 |
| 4.3.1 Sf9细胞的培养 | 第76页 |
| 4.3.2 病毒粒子滴度检测 | 第76-77页 |
| 4.3.3 重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10) 侵染的Sf9细胞中的病毒粒子积累量的检测 | 第77页 |
| 4.3.4 重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10) 侵染的Sf9细胞中BmK IT的转录水平分析 | 第77-79页 |
| 4.3.5 Real-time PCR检测重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10)对病毒衣壳蛋白VP39转录水平的影响 | 第79页 |
| 4.3.6 DAPI染料检测AcMNPV和AcMNPV-BmK IT (P10)侵染的宿主细胞的核形态 | 第79-80页 |
| 4.3.7 MTT分析重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10)和AcMNPV-iap1/2-egfp协同共侵染对Sf9细胞增殖的影响 | 第80页 |
| 4.4 实验结果 | 第80-85页 |
| 4.4.1 重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10) 在宿主细胞内子代病毒粒子积累量的分析 | 第80页 |
| 4.4.2 重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10)侵染宿主细胞过程中BmK IT的转录水平分析 | 第80-81页 |
| 4.4.3 重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10)侵染过程中衣壳主蛋白VP39的转录水平分析 | 第81-82页 |
| 4.4.4 病毒AcMNPV和AcMNPV-BmK IT (P10)对宿主细胞核形态的影响 | 第82-83页 |
| 4.4.5 Ac-IAP1/2 对重组病毒AcMNPV-BmK IT (P10) 促凋亡活性的协同效应分析 | 第83-85页 |
| 4.5 讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 总结与展望 | 第97-100页 |
| 附录 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 个人简况及联系方式 | 第103-104页 |
