论文目录 | |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-20页 |
| 1 白血病的危害 | 第13页 |
| 2 白血病的分类 | 第13页 |
| 3 白血病治疗和诊断方法研究进展 | 第13-15页 |
| 3.1 细胞依赖性治疗方法 | 第14页 |
| 3.2 骨髓移植治疗方法 | 第14页 |
| 3.3 靶向治疗方法 | 第14-15页 |
| 3.4 抗体微阵列诊断法 | 第15页 |
| 4 Annexin A1蛋白简介 | 第15-16页 |
| 5 Annexin A1结构 | 第16-17页 |
| 6 Annexin A1与细胞凋亡和分化的关系 | 第17-18页 |
| 6.1 Annexin A1与细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 6.2 Annexin A1与细胞分化 | 第18页 |
| 7 Annexin A1与肿瘤的发生发展和转移的研究进展 | 第18-19页 |
| 8 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 Annexin A1在急性髓系白血病患者及细胞系中的表达研究 | 第20-29页 |
| 1 实验材料、仪器和试剂 | 第20-23页 |
| 1.1 主要材料 | 第20页 |
| 1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第21-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.1 细胞复苏、培养及冻存 | 第23页 |
| 2.2 髓系白血病细胞蛋白样品的制备 | 第23页 |
| 2.3 急性髓系白血病患者和健康志愿者外周血的收集与处理 | 第23-24页 |
| 2.4 Western blot | 第24-25页 |
| 2.5 数据分析 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-29页 |
| 3.1 急性髓系白血病患者外周血白细胞中Annexin A1表达情况 | 第25-28页 |
| 3.2 髓系白血病细胞系中Annexin A1的表达情况 | 第28-29页 |
| 第三章 Annexin A1在急性髓系白血病细胞中的功能研究 | 第29-47页 |
| 1 实验材料、仪器和试剂 | 第29-30页 |
| 1.1 主要材料 | 第29页 |
| 1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 1.3 实验试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 主要试剂及其配制 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-38页 |
| 2.1 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第32页 |
| 2.3 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体转化DH5α感受态细胞 | 第32-33页 |
| 2.4 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的抽提 | 第33-34页 |
| 2.5 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的双酶切 | 第34页 |
| 2.6 包装慢病毒颗粒并转染急性髓系白血病细胞KG-1a和HL60细胞 | 第34-35页 |
| 2.7 细胞计数法绘制生长曲线 | 第35-36页 |
| 2.8 流式细胞术检测细胞周期 | 第36页 |
| 2.9 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 2.10 免疫细胞化学 | 第37-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-47页 |
| 3.1 重组质粒Annexin A1-shRNA的双酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2 Western blot检验Annexin A1在构建的细胞模型中表达情况 | 第39-40页 |
| 3.3 免疫细胞化学检测Annexin A1在KG-1a细胞中的敲降表达效果 | 第40页 |
| 3.4 细胞生长曲线实验结果 | 第40-43页 |
| 3.5 Annexin A1的敲降表达对急性髓系白血病细胞周期的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 Annexin A1的敲降表达对急性髓系白血病细胞凋亡的影响 | 第44-47页 |
| 第四章 Annexin A1蛋白促进急性髓系白血病细胞增殖的机制研究 | 第47-56页 |
| 1 实验材料、仪器和试剂 | 第47-48页 |
| 1.1 主要材料 | 第47页 |
| 1.2 主要仪器 | 第47页 |
| 1.3 主要试剂 | 第47-48页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-50页 |
| 2.1 免疫细胞化学实验 | 第48页 |
| 2.2 免疫蛋白共沉淀 | 第48-49页 |
| 2.3 MTT实验 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-56页 |
| 3.1 Western blot检测细胞增殖相关蛋白 | 第50-51页 |
| 3.2 免疫细胞化学检测Annexin A1与Notch1共定位情况 | 第51-52页 |
| 3.3 免疫共沉淀研究Annexin A1和Notch1的相互作用 | 第52-53页 |
| 3.4 Annexin A1促进了Notch1在急性髓系白血病细胞内的降解 | 第53-56页 |
| 第五章 Annexin A1在荷瘤裸鼠体内的功能研究 | 第56-61页 |
| 1 实验材料、仪器和试剂 | 第56页 |
| 1.1 主要材料 | 第56页 |
| 1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 1.3 主要试剂 | 第56页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-57页 |
| 2.1 KG-1a和KG-1a-sh Annexin A1细胞成瘤实验 | 第56-57页 |
| 3 实验结果 | 第57-61页 |
| 3.1 KG-1a和KG-1a-shAnnexin A1在小鼠中成瘤情况比较 | 第57-59页 |
| 3.2 Annexin A1对裸鼠脏器指数的影响 | 第59-61页 |
| 第六章 讨论和结论 | 第61-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
