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微拟球藻表达透明颤菌血红蛋白及过表达类C4途径cyPPDK基因的初步研究

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微拟球藻表达透明颤菌血红蛋白及过表达类C4途径cyPPDK基因的初步研究
论文目录
 
摘要第1-3页
abstract第3-4页
第一章 引言第8-16页
    1.1 活性氧与光呼吸机制第8-11页
        1.1.1 活性氧的产生与清除第8-9页
        1.1.2 光呼吸机制第9-11页
    1.2 基因编辑手段提高植物光胁迫能力的研究第11页
    1.3 .血红蛋白第11-14页
        1.3.1 透明颤菌血红蛋白的结构特性第12页
        1.3.2 透明颤菌血红蛋白的氧结合功能第12-13页
        1.3.3 透明颤菌血红蛋白的应用第13-14页
    1.4 PPDK基因在微拟球藻中参与类C4 途径第14页
    1.5 本论文的研究目的及意义第14-15页
    1.6 本论文的研究创新点第15-16页
第二章 微拟球藻高表达启动子的筛选第16-29页
    2.1 实验材料第16-18页
        2.1.1 实验藻种及培养方法第16-17页
        2.1.2 菌株和质粒第17页
        2.1.3 实验试剂与仪器第17-18页
    2.2 实验方法第18-24页
        2.2.1 转录组数据分析第18-19页
        2.2.2 GFP表达载体构建第19-22页
        2.2.3 原生质体制备第22页
        2.2.4 电转化第22-23页
        2.2.5 转化子验证第23页
        2.2.6 荧光显微镜观察第23页
        2.2.7 RT-PCR分析第23-24页
    2.3 实验结果分析第24-27页
        2.3.1 转录组分析第24页
        2.3.2 转化子验证结果第24-25页
        2.3.3 原生质体荧光显微镜观察第25页
        2.3.4 原生质体转化效率分析第25-26页
        2.3.5 GFP荧光显微镜观察第26-27页
        2.3.6 qRT-PCR分析结果第27页
    2.4 讨论第27-28页
    2.5 本章小结第28-29页
第三章 微拟球藻透明颤菌血红蛋白的表达第29-37页
    3.1 实验材料第29页
        3.1.1 实验藻种及基础培养方法第29页
        3.1.2 主要实验仪器与试剂第29页
    3.2 实验方法第29-31页
        3.2.1 质粒载体构建第29-30页
        3.2.2 电转化与转化株筛选验证第30页
        3.2.3 转化株胞内血红蛋白活力检测第30页
        3.2.4 光合系统参数测定第30-31页
        3.2.5 油脂含量及组成分析检测第31页
    3.3 实验结果分析第31-36页
        3.3.1 信号肽预测第31页
        3.3.2 VHb蛋白活性测定第31-32页
        3.3.3 含叶绿体信号肽的VHb转化株与野生型藻株表型测定第31-34页
        3.3.4 VHb在叶绿体和细胞质内表达第34-36页
    3.4 讨论第36页
    3.5 本章小结第36-37页
第四章 微拟球藻过表达类C4 途径cy PPDK基因的初步研究第37-43页
    4.1 实验材料第37页
        4.1.1 实验藻种与培养条件第37页
    4.2 实验方法第37-39页
        4.2.1 cy PPDK基因的克隆第37页
        4.2.2 cyPPDK过表达载体构建第37-38页
        4.2.3 电转化及转化子筛选验证第38页
        4.2.4 转化株抗性基因的传代验证第38页
        4.2.5 RT-PCR分析第38-39页
    4.3 实验结果分析第39-42页
        4.3.1 cy PPDK表达载体的构建及验证第39-40页
        4.3.2 RT-PCR分析结果第40-41页
        4.3.3 表型测定结果第41-42页
    4.4 讨论第42页
    4.5 本章小结第42-43页
第五章 结论与展望第43-45页
    5.1 结论第43页
    5.2 展望第43-45页
参考文献第45-52页
攻读学位期间的研究成果第52-53页
致谢第53-54页

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