微拟球藻表达透明颤菌血红蛋白及过表达类C4途径cyPPDK基因的初步研究
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微拟球藻表达透明颤菌血红蛋白及过表达类C4途径cyPPDK基因的初步研究
论文目录
摘要
第1-3页
abstract
第3-4页
第一章 引言
第8-16页
1.1 活性氧与光呼吸机制
第8-11页
1.1.1 活性氧的产生与清除
第8-9页
1.1.2 光呼吸机制
第9-11页
1.2 基因编辑手段提高植物光胁迫能力的研究
第11页
1.3 .血红蛋白
第11-14页
1.3.1 透明颤菌血红蛋白的结构特性
第12页
1.3.2 透明颤菌血红蛋白的氧结合功能
第12-13页
1.3.3 透明颤菌血红蛋白的应用
第13-14页
1.4 PPDK基因在微拟球藻中参与类C4 途径
第14页
1.5 本论文的研究目的及意义
第14-15页
1.6 本论文的研究创新点
第15-16页
第二章 微拟球藻高表达启动子的筛选
第16-29页
2.1 实验材料
第16-18页
2.1.1 实验藻种及培养方法
第16-17页
2.1.2 菌株和质粒
第17页
2.1.3 实验试剂与仪器
第17-18页
2.2 实验方法
第18-24页
2.2.1 转录组数据分析
第18-19页
2.2.2 GFP表达载体构建
第19-22页
2.2.3 原生质体制备
第22页
2.2.4 电转化
第22-23页
2.2.5 转化子验证
第23页
2.2.6 荧光显微镜观察
第23页
2.2.7 RT-PCR分析
第23-24页
2.3 实验结果分析
第24-27页
2.3.1 转录组分析
第24页
2.3.2 转化子验证结果
第24-25页
2.3.3 原生质体荧光显微镜观察
第25页
2.3.4 原生质体转化效率分析
第25-26页
2.3.5 GFP荧光显微镜观察
第26-27页
2.3.6 qRT-PCR分析结果
第27页
2.4 讨论
第27-28页
2.5 本章小结
第28-29页
第三章 微拟球藻透明颤菌血红蛋白的表达
第29-37页
3.1 实验材料
第29页
3.1.1 实验藻种及基础培养方法
第29页
3.1.2 主要实验仪器与试剂
第29页
3.2 实验方法
第29-31页
3.2.1 质粒载体构建
第29-30页
3.2.2 电转化与转化株筛选验证
第30页
3.2.3 转化株胞内血红蛋白活力检测
第30页
3.2.4 光合系统参数测定
第30-31页
3.2.5 油脂含量及组成分析检测
第31页
3.3 实验结果分析
第31-36页
3.3.1 信号肽预测
第31页
3.3.2 VHb蛋白活性测定
第31-32页
3.3.3 含叶绿体信号肽的VHb转化株与野生型藻株表型测定
第31-34页
3.3.4 VHb在叶绿体和细胞质内表达
第34-36页
3.4 讨论
第36页
3.5 本章小结
第36-37页
第四章 微拟球藻过表达类C4 途径cy PPDK基因的初步研究
第37-43页
4.1 实验材料
第37页
4.1.1 实验藻种与培养条件
第37页
4.2 实验方法
第37-39页
4.2.1 cy PPDK基因的克隆
第37页
4.2.2 cyPPDK过表达载体构建
第37-38页
4.2.3 电转化及转化子筛选验证
第38页
4.2.4 转化株抗性基因的传代验证
第38页
4.2.5 RT-PCR分析
第38-39页
4.3 实验结果分析
第39-42页
4.3.1 cy PPDK表达载体的构建及验证
第39-40页
4.3.2 RT-PCR分析结果
第40-41页
4.3.3 表型测定结果
第41-42页
4.4 讨论
第42页
4.5 本章小结
第42-43页
第五章 结论与展望
第43-45页
5.1 结论
第43页
5.2 展望
第43-45页
参考文献
第45-52页
攻读学位期间的研究成果
第52-53页
致谢
第53-54页
本篇论文共
54
页,
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。
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