论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
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| Abstract | 第6-11
页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22
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| · Fc 受体的分类和命名 | 第11-12
页 |
| · IgG Fc 受体的生物学特性 | 第12-14
页 |
| · FcγR 的信号转导 | 第14
页 |
| · FcγR 的免疫学功能研究进展 | 第14-19
页 |
| · FcγR 的立体结构 | 第19-20
页 |
| · Fc 受体与自身免疫病 | 第20-21
页 |
| · FcγR 药物靶标研究 | 第21
页 |
| · 本研究的目的和意义 | 第21-22
页 |
| 第二章 小鼠 FcγRIII 胞外区重组蛋白的表达与鉴定 | 第22-33
页 |
| · 材料 | 第22-24
页 |
| · 菌株、质粒、酶 | 第22
页 |
| · 试剂配制 | 第22-24
页 |
| · 主要试剂盒与仪器 | 第24
页 |
| · 方法 | 第24-29
页 |
| · 小鼠外周血白细胞分离 | 第24
页 |
| · 小鼠外周血白细胞总RNA 提取 | 第24
页 |
| · moFcγRIII 基因的克隆 | 第24-25
页 |
| · HRP 标记小鼠IgG | 第25-26
页 |
| · 大肠杆菌JM109 感受态的制备 | 第26
页 |
| · 重组质粒的转化 | 第26
页 |
| · 原核表达质粒 pET mRIII 的构建 | 第26-27
页 |
| · 蛋白表达 | 第27-28
页 |
| · 包涵体纯化与复性 | 第28-29
页 |
| · 结果 | 第29-31
页 |
| · moFcγRIII 基因的扩增 | 第29
页 |
| · moFcγRIII 原核表达质粒的构建 | 第29
页 |
| · 重组 moFcγRIII 蛋白的诱导表达 | 第29-30
页 |
| · 重组 moFcγRIII 蛋白可溶性分析、复性及纯化 | 第30-31
页 |
| · ELISA 检测复性蛋白的活性 | 第31
页 |
| · 讨论 | 第31-33
页 |
| · moFcγRIII 重组蛋白的表达与复性 | 第31-32
页 |
| · moFcγRIII 同源建模 | 第32-33
页 |
| 第三章 稳定表达小鼠 FcγRIII 共转染细胞株的建立 | 第33-47
页 |
| · 材料 | 第33-35
页 |
| · 菌株、质粒及主要试剂 | 第33
页 |
| · 细胞 | 第33
页 |
| · 试剂制备 | 第33-35
页 |
| · 方法 | 第35-41
页 |
| · 真核表达质粒pc3mRIII 的构建 | 第35-36
页 |
| · 真核表达质粒pc3mγ的构建 | 第36-37
页 |
| · FITC 标记小鼠IgG | 第37
页 |
| · 饲养细胞的制备 | 第37
页 |
| · 抗鸡红细胞(RBC)IgG 的制备 | 第37-38
页 |
| · 细胞转染 | 第38-39
页 |
| · 共转染稳定表达细胞系的建立 | 第39-40
页 |
| · 小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合 | 第40-41
页 |
| · 共转染稳定表达细胞株的鉴定 | 第41
页 |
| · 结果 | 第41-45
页 |
| · 真核表达质粒pc3mRIII 的构建 | 第41-42
页 |
| · 真核表达质粒pc3mγ的构建 | 第42
页 |
| · 抗鸡RBC 小鼠IgG 的制备 | 第42-43
页 |
| · 小鼠FcγRIII 在COS-7 细胞表面的表达及其与配体的结合 | 第43-44
页 |
| · 共转染稳定表达细胞株的鉴定 | 第44-45
页 |
| · 讨论 | 第45-47
页 |
| 第四章 小鼠 FcγRIII 线性配体结合表位鉴定 | 第47-55
页 |
| · 小鼠 FcγRIII 多肽的合成与偶联 | 第47-48
页 |
| · moFcγRIII 多肽设计 | 第47-48
页 |
| · moFcγRIII 多肽的偶联 | 第48
页 |
| · moFcγRIII 阳性肽的筛选 | 第48-49
页 |
| · Dot-blot | 第48-49
页 |
| · 竞争ELISA | 第49
页 |
| · 玫瑰花环抑制试验 | 第49
页 |
| · 结果 | 第49-52
页 |
| · 小鼠FcγRIII EC2 区多肽的合成与偶联 | 第49-50
页 |
| · Dot-blot 检测多肽与小鼠IgG 特异结合 | 第50
页 |
| · 线性配体结合表位多肽对IgG-可溶性受体结合的抑制 | 第50
页 |
| · 线性配体结合表位多肽对IgG-细胞表面受体结合的抑制 | 第50-52
页 |
| · 讨论 | 第52-55
页 |
| · 多肽的设计合成与检测 | 第52-53
页 |
| · moFcγRIII 线性配体结合表位的鉴定 | 第53
页 |
| · 配体结合表位多肽的抑制功效 | 第53-55
页 |
| 第五章 全文结论 | 第55-56
页 |
| 参考文献 | 第56-61
页 |
| 致谢 | 第61-62
页 |
| 作者简历 | 第62-63
页 |
