论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-16页 |
| 第2章 材料方法 | 第16-29页 |
| 第1部分 丝氨酸羟甲基转移酶的基因的克隆和检测 | 第16-23页 |
| · 实验材料 | 第16-17页 |
| · 细菌与质粒 | 第16页 |
| · 主要仪器 | 第16页 |
| · 试剂 | 第16-17页 |
| · 实验方法 | 第17-23页 |
| · 殊异韦荣菌基因组总 DNA 的提取 | 第17-18页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因及其前后部分片段的克隆及鉴定 | 第18-19页 |
| · PCR 产物的回收 | 第19-20页 |
| · PCR 产物与 PMD-18T 载体连接 | 第20-21页 |
| · 制备大肠杆菌 JM109 感受态细胞 | 第21页 |
| · gly-PMD18-T 重组质粒的转化 | 第21页 |
| · 殊异韦荣菌 gly-PMD18-T 克隆质粒的鉴定 | 第21-22页 |
| · 序列测定 | 第22-23页 |
| 第2部分 殊异韦荣菌丝氨酸羟甲基转移酶基因表达载体的构建及初步表达 | 第23-29页 |
| · 实验材料 | 第23页 |
| · 菌株和质粒 | 第23页 |
| · 主要仪器和试剂 | 第23页 |
| · 实验方法 | 第23-29页 |
| · 引物设计 | 第23页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因的 PCR 扩增 | 第23-24页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因 PCR 产物的纯化回收 | 第24页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因 PCR 产物的双酶切及纯化回收 | 第24页 |
| · pET28a 质粒的制备 | 第24-25页 |
| · pET 28a 与 gly 目的基因的连接 | 第25页 |
| · BL21 感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| · gly- pET 28a 重组质粒的转化 | 第26页 |
| · gly- pET 28a 重组质粒的双酶切鉴定 | 第26页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第26-29页 |
| 第3章 结果 | 第29-39页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因的 PCR 扩增产物鉴定 | 第29-30页 |
| · 殊异韦荣菌 gly-PMD18-T 克隆质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| · 实验第二部分殊异韦荣菌 gly 基因 PCR 扩增产物鉴定 | 第30-31页 |
| · 殊异韦荣菌 gly- PET 28a 重组质粒的酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
| · 殊异韦荣菌 gly- PET 28a 重组表达的 SDS-PAGE 电泳结果 | 第32-34页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因的 GenBank 登陆图 | 第34-37页 |
| · GenBank 上所测得的 gly 基因的 BLAST 结果 | 第37-39页 |
| 第4章 讨论 | 第39-44页 |
| · 殊异韦荣菌 gly 基因 DNA 序列及同源性分析 | 第39页 |
| · 微生物基因序列测定的可行性及必要性分析 | 第39-40页 |
| · 目标基因功能的研究手段及方法 | 第40-41页 |
| · 影响外源基因表达的因素 | 第41-44页 |
| · 表达载体的选择 | 第41-42页 |
| · 大肠杆菌表达系统 | 第42页 |
| · 培养条件的控制 | 第42-43页 |
| · IPTG 诱导浓度及诱导时间 | 第43-44页 |
| 第5章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51
页 |
