甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆分析及原核表达



甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆分析及原核表达

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甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆分析及原核表达

论文目录
中文摘要	第1-8页
英文摘要	第8-10页
一前言	第10-19页
1 甘蔗黄叶综合症(Sugarcane Yellow leaf Syndrome.SYLS)及其病原	第10-12页
· 甘蔗黄叶综合症及其危害	第10-11页
· 甘蔗黄叶综合症病原	第11页
· 甘蔗黄叶综合症病原的传播和寄主	第11-12页
2 黄症病毒科(Luteoviridae)的分类与基因组结构	第12-15页
· 黄症病毒科的分类	第12页
· 基因组结构	第12-15页
3 黄症病毒与蚜虫宿主细胞组分的分子反应	第15-16页
4 CP基因及其表达产物介导的植物抗性	第16-18页
· 蛋白介导的抗性	第16页
· 非蛋白介导的抗性	第16-17页
· 黄症病毒科成员CP基因转基因研究现状	第17-18页
5 本研究的内容、目的与意义	第18-19页
二材料和方法	第19-31页
1 实验材料	第19页
· 植物材料	第19页
· 试剂载体及菌株	第19页
· 主要实验仪器	第19页
2 实验方法	第19-31页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因的克隆	第19-24页
· 甘蔗叶片总RNA提取	第19-20页
· 第一链cDNA的获得	第20页
· 目的片段获得	第20-21页
· 目的片段回收	第21页
· 目的片段与载体连接	第21-22页
· 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化	第22页
· 鉴定阳性克隆	第22-24页
· 目的片段测序	第24页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白(SCYLV-CP)基因的原核表达	第24-27页
· SCYLV-CP基因的分子鉴定及回收	第24-25页
· 原核表达载体质粒pET-29a(+)的提取、酶切及回收	第25-26页
· 目的片段与表达载体的连接	第26页
· 大肠杆菌BL21感受态细胞的制备与转化	第26页
· 原核表达载体拟重组子的鉴定	第26-27页
· 表达目的蛋白检测	第27-28页
· 目的蛋白的诱导表达	第27页
· 表达菌的裂解	第27页
· SDS-PAGE凝胶电泳	第27-28页
· 考马斯亮蓝染色	第28页
· 目的蛋白纯化	第28-31页
· 天然条件下样品的制备	第28-29页
· 蛋白纯化柱的准备	第29页
· 表达蛋白的过柱纯化	第29页
· ELISA法检测目的蛋白	第29-31页
三结果及分析	第31-40页
1 SCYLV外壳蛋白基因的克隆	第31-36页
· 甘蔗总RNA的提取	第31页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因的获得	第31-32页
· 甘蔗黄叶病毒外科蛋白基因回收	第32页
· 连接和转化	第32-33页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因序列及分析	第33-35页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因的氨基酸序列分析	第35-36页
2 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因的原核表达	第36-40页
· 原核表达载体的构建和验证	第36-38页
· 拟重组子检测	第38页
· 甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因诱导表达情况	第38-39页
· 目的蛋白的纯化	第39-40页
· 目的蛋白检测	第40页
四讨论	第40-45页
1 黄症病毒科内成员之间和同种不同株系间CP基因的变异与分类	第40-43页
2 关于甘蔗RNA的提取	第43-44页
3 关于cDNA第一链的合成所采用的酶	第44页
4 有关研究的后续工作	第44-45页
五结论	第45-46页
参考文献	第46-51页
附录一	第51-53页
附录二	第53-59页
致谢	第59页

本篇论文共59页，点击这进入下载页面。

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