多酚氧化酶基因的克隆及原核、真核表达研究



多酚氧化酶基因的克隆及原核、真核表达研究

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多酚氧化酶基因的克隆及原核、真核表达研究

论文目录
摘要	第1-6页
ABSTRACT	第6-12页
第一章绪论	第12-22页
1 茶黄素研究现状	第12-15页
· 茶黄素制备的研究	第12-14页
· 化学氧化制备	第12-13页
· 酶促氧化制备	第13-14页
· 茶黄素功能的研究	第14页
· 茶黄素研究展望	第14-15页
2 多酚氧化酶的研究现状	第15-21页
· 多酚氧化酶的分类	第15-16页
· 多酚氧化酶的分布	第16-17页
· 多酚氧化酶酶源及其同工酶	第17页
· 多酚氧化酶基因水平上的研究	第17-18页
· 多酚氧化酶蛋白质水平上的研究	第18-19页
· 多酚氧化酶的生理功能	第19-20页
· 多酚氧化酶与红茶品质的关系	第19页
· 多酚氧化酶的其他功能	第19-20页
· 多酚氧化酶基因克隆与表达的研究	第20-21页
3 研究目的和意义	第21页
4 研究内容	第21-22页
第二章多酚氧化酶基因的克隆及序列分析	第22-43页
1 材料、试剂与方法	第22-28页
· 材料	第22页
· 仪器与试剂	第22页
· 方法	第22-27页
· 丰水梨基因组DNA的提取	第23页
· PPO基因的PCR扩增	第23-24页
· 琼脂糖凝胶电泳	第24页
· 目的基因回收	第24页
· PPO基因的重组克隆	第24-26页
· 重组质粒双酶切检测	第26页
· 目的基因测序	第26-27页
· 表达体系的建立	第27-28页
· 原核表达载体的构建	第27页
· 重组表达载体转化大肠杆菌DE3感受态细胞	第27页
· 重组表达菌株的菌落鉴定	第27页
· 重组质粒双酶切检测	第27-28页
· PPO基因的序列分析	第28页
2 结果与分析	第28-41页
· 改良CTAB法提取风水梨基因组DNA	第28页
· 多酚氧化酶基因的PCR扩增	第28-29页
· 重组pMD19-T-PPO载体的检测	第29-30页
· 重组表达载体pET32a-PPO的检测	第30-31页
· 目的基因的测序及生物信息学分析	第31-41页
· PPO核苷酸和氨基酸序列分析	第31-36页
· PPO亲/疏水性分析	第36-37页
· PPO信号肽及跨膜分析	第37-39页
· PPO结构域分析	第39-40页
· PPO二级结构预测	第40-41页
3 讨论	第41页
· 实验材料的选择	第41页
· T-A克隆	第41页
· PPO基因克隆引物的设计	第41页
4 小结	第41-43页
第三章多酚氧化酶的原核诱导表达	第43-51页
1 材料与方法	第43-46页
· 菌株及质粒	第43页
· 方法	第43-45页
· PPO的原核诱导表达	第44页
· SDS-PAGE电泳及检测	第44-45页
· 蛋白诱导条件	第45页
· 包涵体复性	第45页
· 透析袋准备	第45页
· 包涵体复性	第45页
· 酶活性测定	第45页
· PPO体外氧化儿茶素	第45-46页
2 结果与分析	第46-49页
· PPO原核诱导表达	第46-47页
· 包涵体复性	第47-48页
· PPO氧化儿茶素生成茶黄素	第48-49页
3 讨论	第49页
4 结论	第49-51页
第四章多酚氧化酶真核表达载体的构建	第51-56页
1 材料、试剂与方法	第51-52页
· 材料与试剂	第51页
· 方法	第51-52页
· 引物设计	第51页
· 丰水梨基因组DNA的提取	第51页
· PPO基因的PCR扩增	第51页
· 琼脂糖凝胶电泳	第51页
· 目的基因回收	第51页
· PPO基因的重组克隆	第51页
· 重组质粒的菌落PCR检测和质粒双酶切检测	第51-52页
· 目的基因的序列测定	第52页
2 结果分析	第52-54页
· PPO基因PCR扩增及回收	第52页
· 重组pMD19-T-PPO载体的检测	第52-53页
· 重组pPICZα-A-PPO载体的检测	第53-54页
· 目的基因测序与分析	第54页
3 讨论	第54-55页
4 结论	第55-56页
第五章全文总结	第56-57页
1 主要研究结果	第56页
2 展望	第56-57页
参考文献	第57-64页
致谢	第64-65页
作者简介	第65页

本篇论文共65页，点击这进入下载页面。

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