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猪应激综合征HRM检测方法的建立与应用

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猪应激综合征HRM检测方法的建立与应用
论文目录
 
摘要第1-8页
前言第8-9页
文献综述第9-20页
  1 猪应激综合症(PSS)的研究进展第9-15页
    · 猪应激综合症(PSS)致病基因的定位第9-10页
    · 猪应激综合症(PSS)的致病机理第10-11页
    · 氟烷基因的危害第11-12页
      · 氟烷基因对肉质的影响第11页
      · 氟烷基因对猪繁殖性能的影响第11-12页
    · 猪应激综合症检测方法的研究进展第12-15页
      · 氟烷测验第12-13页
      · CK血清测定法第13-14页
      · 血型与同工酶型鉴别第14页
      · 探针检测法第14页
      · PCR-RFLP法第14-15页
      · PCR-SSCP法第15页
  2 高分辨率熔解曲线技术简介第15-20页
    · HRM的技术原理第16页
    · 高分辨率熔解曲线的技术基础及对硬件要求第16-17页
      · 对仪器设备自身温差的要求第16-17页
      · 对仪器设备温度分辨率的要求第17页
      · PCR体系与条件的要求第17页
    · HRM小片段法及应用第17-18页
    · HRM非标记探针法及应用第18-20页
实验一 C/C型和T/T型两种标准质粒的扩大培养第20-23页
  1 实验材料与试剂第20-21页
    · 样品第20页
    · 试剂及试剂盒第20页
    · 主要试剂的配制第20-21页
  2 方法第21-22页
    · 标准质粒的扩大培养第21页
    · 标准质粒的提取第21-22页
    · 杂合型质粒的构建第22页
  3 结果与分析第22页
  4 小结第22-23页
实验二 PSS RYR1基因HRM小片段检测方法的建立第23-32页
  1 实验材料与试剂第23页
    · 质粒第23页
    · 样品第23页
    · 试剂及试剂盒第23页
    · 主要试剂的配制第23页
  2 方法第23-27页
    · 猪尾组织DNA的提取及检测第23-24页
    · 引物的设计合成第24-26页
      · 引物的设计与合成第24-25页
      · HRM小片段法目的基因的扩增第25-26页
    · HRM小片段法检测PSS方法的初步建立第26-27页
      · PCR反应条件的优化第26-27页
      · HRM的分型过程第27页
    · 猪基因组样品DNA的检测第27页
  3 结果与分析第27-31页
    · 猪基因组DNA电泳结果第27-28页
    · PCR扩增电泳结果第28页
    · 退火温度的优化结果第28-29页
    · 引物的优化结果第29页
    · 样品检测结果第29-31页
  4 小结第31-32页
实验三 PSS RYR1基因HRM非标记性探针检测方法的建立第32-40页
  1 实验材料及试剂第32页
    · 质粒第32页
    · 样品第32页
    · 试剂及试剂盒第32页
    · 主要试剂的配制第32页
  2 方法第32-35页
    · 引物与探针的设计合成第32-33页
    · HRM探针法目的基因的扩增第33-34页
    · HRM非标记性探针法检测RYR1的初步建立第34-35页
      · 反应条件的优化第35页
      · HRM分型过程第35页
    · 猪尾组织基因组DNA的检测第35页
  3 结果第35-39页
    · PCR扩增电泳结果第35-36页
    · 退火温度的优化结果第36-37页
    · 不对称PCR反应体系优化结果第37页
      · 上游引物浓度的确定第37页
      · 上游引物与下游引物比例的确定第37页
    · 样品检测结果第37-39页
  4 小结第39-40页
实验四 PSS RYR1基因的PCR-RFLP检测第40-44页
  1 实验材料与试剂第40页
    · 样品第40页
    · 试剂及试剂盒第40页
    · 主要试剂的配制第40页
  2 方法第40-42页
    · RYR1的PCR扩增第40-41页
      · 引物的合成第40页
      · PCR反应体系第40-41页
    · RFLP分析第41-42页
  3 结果与分析第42-43页
    · PCR电泳结果第42-43页
    · 酶切电泳结果第43页
  4 小结第43-44页
讨论第44-47页
  · 检测猪应激综合症PSS方法中标准质粒的构建及意义第44页
  2 建立HRM检测PSS的意义第44-45页
  · HRM小片段法与非标记探针法的比较第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-53页
Abstract第53-55页
致谢第55页

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