猪应激综合征HRM检测方法的建立与应用
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猪应激综合征HRM检测方法的建立与应用
论文目录
摘要
第1-8页
前言
第8-9页
文献综述
第9-20页
1 猪应激综合症(PSS)的研究进展
第9-15页
· 猪应激综合症(PSS)致病基因的定位
第9-10页
· 猪应激综合症(PSS)的致病机理
第10-11页
· 氟烷基因的危害
第11-12页
· 氟烷基因对肉质的影响
第11页
· 氟烷基因对猪繁殖性能的影响
第11-12页
· 猪应激综合症检测方法的研究进展
第12-15页
· 氟烷测验
第12-13页
· CK血清测定法
第13-14页
· 血型与同工酶型鉴别
第14页
· 探针检测法
第14页
· PCR-RFLP法
第14-15页
· PCR-SSCP法
第15页
2 高分辨率熔解曲线技术简介
第15-20页
· HRM的技术原理
第16页
· 高分辨率熔解曲线的技术基础及对硬件要求
第16-17页
· 对仪器设备自身温差的要求
第16-17页
· 对仪器设备温度分辨率的要求
第17页
· PCR体系与条件的要求
第17页
· HRM小片段法及应用
第17-18页
· HRM非标记探针法及应用
第18-20页
实验一 C/C型和T/T型两种标准质粒的扩大培养
第20-23页
1 实验材料与试剂
第20-21页
· 样品
第20页
· 试剂及试剂盒
第20页
· 主要试剂的配制
第20-21页
2 方法
第21-22页
· 标准质粒的扩大培养
第21页
· 标准质粒的提取
第21-22页
· 杂合型质粒的构建
第22页
3 结果与分析
第22页
4 小结
第22-23页
实验二 PSS RYR1基因HRM小片段检测方法的建立
第23-32页
1 实验材料与试剂
第23页
· 质粒
第23页
· 样品
第23页
· 试剂及试剂盒
第23页
· 主要试剂的配制
第23页
2 方法
第23-27页
· 猪尾组织DNA的提取及检测
第23-24页
· 引物的设计合成
第24-26页
· 引物的设计与合成
第24-25页
· HRM小片段法目的基因的扩增
第25-26页
· HRM小片段法检测PSS方法的初步建立
第26-27页
· PCR反应条件的优化
第26-27页
· HRM的分型过程
第27页
· 猪基因组样品DNA的检测
第27页
3 结果与分析
第27-31页
· 猪基因组DNA电泳结果
第27-28页
· PCR扩增电泳结果
第28页
· 退火温度的优化结果
第28-29页
· 引物的优化结果
第29页
· 样品检测结果
第29-31页
4 小结
第31-32页
实验三 PSS RYR1基因HRM非标记性探针检测方法的建立
第32-40页
1 实验材料及试剂
第32页
· 质粒
第32页
· 样品
第32页
· 试剂及试剂盒
第32页
· 主要试剂的配制
第32页
2 方法
第32-35页
· 引物与探针的设计合成
第32-33页
· HRM探针法目的基因的扩增
第33-34页
· HRM非标记性探针法检测RYR1的初步建立
第34-35页
· 反应条件的优化
第35页
· HRM分型过程
第35页
· 猪尾组织基因组DNA的检测
第35页
3 结果
第35-39页
· PCR扩增电泳结果
第35-36页
· 退火温度的优化结果
第36-37页
· 不对称PCR反应体系优化结果
第37页
· 上游引物浓度的确定
第37页
· 上游引物与下游引物比例的确定
第37页
· 样品检测结果
第37-39页
4 小结
第39-40页
实验四 PSS RYR1基因的PCR-RFLP检测
第40-44页
1 实验材料与试剂
第40页
· 样品
第40页
· 试剂及试剂盒
第40页
· 主要试剂的配制
第40页
2 方法
第40-42页
· RYR1的PCR扩增
第40-41页
· 引物的合成
第40页
· PCR反应体系
第40-41页
· RFLP分析
第41-42页
3 结果与分析
第42-43页
· PCR电泳结果
第42-43页
· 酶切电泳结果
第43页
4 小结
第43-44页
讨论
第44-47页
· 检测猪应激综合症PSS方法中标准质粒的构建及意义
第44页
2 建立HRM检测PSS的意义
第44-45页
· HRM小片段法与非标记探针法的比较
第45-47页
结论
第47-48页
参考文献
第48-53页
Abstract
第53-55页
致谢
第55页
本篇论文共
55
页,
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