多重PCR检测食品中志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌方法的研究



多重PCR检测食品中志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌方法的研究

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多重PCR检测食品中志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌方法的研究

论文目录
摘要	第1-5页
Abstract	第5-9页
1 引言	第9-21页
· 立题背景及意义	第9-10页
· 本文涉及的食源性致病菌的简介	第10-14页
· 志贺氏菌	第10-11页
· 沙门氏菌	第11-12页
· 变形杆菌	第12-14页
· 食源性病原菌的检测方法	第14-20页
· 常规检测方法	第14页
· 免疫学检测方法	第14-16页
· 分子生物学检测方法	第16-20页
· 研究目的及内容	第20-21页
2 材料与方法	第21-29页
· 试验材料	第21-22页
· 试验菌株	第21页
· 仪器与设备	第21页
· 主要培养基	第21-22页
· 样品与生化试剂	第22页
· 试验方法	第22-23页
· 细菌的培养	第22页
· 菌体DNA 的提取	第22-23页
· 引物设计、体系和操作程序	第23-24页
· 多重PCR 的引物设计	第23-24页
· 多重PCR 反应体系	第24页
· 多重PCR 操作程序	第24页
· 多重PCR 反应条件优化	第24-25页
· 引物添加量的优化	第24页
· Mg~(2+)添加量的优化	第24页
· dNTP 添加量的优化	第24-25页
· 退火温度的优化	第25页
· Taq 酶添加量的优化	第25页
· 多重PCR 扩增产物的分析	第25-26页
· 多重PCR 反应产物检测	第25页
· 多重PCR 反应产物的克隆	第25-26页
· 多重PCR 产物的测序鉴定	第26页
· 特异性试验	第26-27页
· 多重PCR 反应特异性的检测	第26页
· 多重 PCR 引物特异性的检测	第26-27页
· 多重PCR 灵敏度的研究	第27页
· 多重 PCR 检测单一致病菌的灵敏度	第27页
· 多重 PCR 同时检测三种致病菌的灵敏度	第27页
· 人工污染猪肉中三种致病菌DNA 提取方法的比较	第27-28页
· 普通热裂解法	第27页
· 酚-氯仿抽提法	第27-28页
· 试剂盒法（EasyPureTM Genomic DNA KIT 试剂盒）	第28页
· 多重PCR 检测人工污染猪肉的检出限	第28-29页
3 结果与分析	第29-43页
· 多重PCR 反应条件优化	第29-32页
· 最适引物添加量的选择	第29页
· 最适 Mg~(2+)添加量的选择	第29-30页
· 最适dNTP 添加量的选择	第30-31页
· 最适退火温度的选择	第31页
· 最适 Taq 酶的选择	第31-32页
· 多重PCR 反应产物的测序结果	第32-35页
· 特异性试验	第35-37页
· 多重 PCR 引物特异性试验	第35-36页
· 多重 PCR 反应特异性试验	第36-37页
· 多重PCR 的灵敏度	第37-40页
· 多重 PCR 检测单一致病菌的灵敏度	第37-39页
· 多重 PCR 反应同时检测三种致病菌的灵敏度	第39-40页
· 人工污染猪肉中三种致病菌DNA 提取方法的比较结果	第40-41页
· 人工污染猪肉的检出限	第41-43页
4 讨论	第43-46页
· 多重PCR 反应程序的优化	第43-44页
· 靶基因及引物的确定	第43页
· dNTP、Taq 酶及引物添加量的确定	第43-44页
· Mg~(2+)添加量和退火温度的确定	第44页
· 多重PCR 污染防控措施	第44-45页
· 展望	第45-46页
5 结论	第46-47页
参考文献	第47-53页
硕士期间发表学术论文	第53-54页
作者简介	第54-55页
致谢	第55-56页

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