论文目录 | |
| 缩略词表 | 第1-7
页 |
| 中文摘要 | 第7-8
页 |
| 英文摘要 | 第8-9
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| 第一部分 文献综述 | 第9-16
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| · 超抗原简介 | 第9
页 |
| · 超抗原的抗肿瘤作用机制 | 第9-11
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| · SDCC 作用 | 第9-10
页 |
| · 细胞因子的作用 | 第10-11
页 |
| · LAK 细胞样细胞毒活性作用 | 第11
页 |
| · 超抗原抗肿瘤研究 | 第11
页 |
| · 单纯超抗原抗肿瘤存在的问题 | 第11
页 |
| · 单克隆抗体与超抗原的结合 | 第11-12
页 |
| · 基因工程抗体靶向超抗原的抗肿瘤作用 | 第12-14
页 |
| · Fab-SEA 的抗肿瘤作用 | 第12-13
页 |
| · 单链抗体-超抗原融合蛋白抗肿瘤 | 第13
页 |
| · 突变的SEA 在肿瘤导向治疗中的应用 | 第13-14
页 |
| · 其他形式的超抗原融合蛋白 | 第14
页 |
| · 小结 | 第14-16
页 |
| · 抗体分子 | 第14
页 |
| · 抗体与效应蛋白超抗原的连接 | 第14-15
页 |
| · 效应分子-超抗原的安全性 | 第15-16
页 |
| 第二部分 实验部分 | 第16-38
页 |
| · 材料 | 第17-18
页 |
| · 实验方法 | 第18-26
页 |
| · 寡聚核苷酸引物的设计及合成 | 第18-19
页 |
| · B3VH 和B3VL 的扩增 | 第19
页 |
| · 以柱离心式DNA 纯化试剂盒纯化回收PCR 产物 | 第19-20
页 |
| · B3VH 和B3VL 的PCR 连接 | 第20
页 |
| · B3ds-ScFv 重组克隆质粒的构建 | 第20
页 |
| · B3ds-ScFv 重组克隆质粒的筛选及鉴定 | 第20-21
页 |
| · B3ds-ScFv-PET 重组质粒的构建 | 第21
页 |
| · B3ds-ScFv-PET 重组质粒的筛选及鉴定 | 第21
页 |
| · SEA(D227A)-T 的构建 | 第21-22
页 |
| · 序列分析 | 第22
页 |
| · B3dsscFv-SEA-pET 表达载体的构建 | 第22
页 |
| · B3dsscFv-SEA-pET 表达载体的筛选及鉴定 | 第22-23
页 |
| · B3ds-scFv-SEA 融合蛋白的诱导表达 | 第23
页 |
| · 目的蛋白的 SDS-PAGE 鉴定 | 第23-24
页 |
| · 表达产物的 western blot 鉴定 | 第24
页 |
| · 包涵体的洗涤及变复性 | 第24
页 |
| · 复性产物的纯化 | 第24-25
页 |
| · 纯化蛋白的定量 | 第25
页 |
| · 复性后蛋白二硫键形成鉴定 | 第25
页 |
| · ELISA 鉴定 B3ds-scFv-SEA 中抗体的活性 | 第25-26
页 |
| · 融合蛋白稳定性实验 | 第26
页 |
| · MTS 法测定复性纯化后的 B3dsscFv-SEA 对肿瘤细胞的杀伤活性 | 第26
页 |
| · 结 果 | 第26-38
页 |
| 第三部分 本研究的特色、意义及所取得的主要结果 | 第38-40
页 |
| 参考文献 | 第40-45
页 |
| 致谢 | 第45-46
页 |
| 作者简介 | 第46
页 |
