论文目录 | |
摘要 | 第1-7
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ABSTRACT | 第7-13
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第一章 文献综述 | 第13-26
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1 水稻矮缩病毒研究进展 | 第13-17
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· 水稻矮缩病毒简介 | 第13
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· 水稻矮缩病毒病毒粒子结构 | 第13-14
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· 水稻矮缩病毒基因组结构及编码蛋白的功能 | 第14-16
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· 水稻矮缩病毒的侵染、复制和组装 | 第16-17
页 |
2 真核转录因子简介 | 第17-20
页 |
· DNA 结合结构域 | 第18
页 |
· 寡聚化位点(Oligomerization site) | 第18
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· 转录调节结构域(Transcription-regulation domain) | 第18-19
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· 转录激活结构域 | 第18-19
页 |
· 转录抑制结构域 | 第19
页 |
· 核定位信号(Nuclear localization signal, NLS) | 第19-20
页 |
3 酵母双杂交系统(YEAST TWO-HYBRID SYSTEM, YTHS) | 第20-26
页 |
· 酵母双杂交系统的基本原理 | 第21-22
页 |
· 酵母双杂交系统的优缺点及改进 | 第22-24
页 |
· 酵母双杂交系统的衍生系统-酵母单杂交系统(One-hybrid system) | 第24
页 |
· 酵母双杂交系统在植物病毒研究中的应用 | 第24-26
页 |
第二章 RDV 56、57、59、512 的 CDNA 克隆和表达 | 第26-31
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1 材料和方法 | 第26-28
页 |
· 材料 | 第26
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· 质粒及菌株 | 第26
页 |
· 引物设计 | 第26
页 |
· 感病材料 | 第26
页 |
· 酶、试剂和抗体 | 第26
页 |
· 方法 | 第26-28
页 |
· RT-PCR | 第26-27
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· 植物表达载体的构建 | 第27
页 |
· 农杆菌的转化 | 第27
页 |
· 农杆菌的渗入法 | 第27
页 |
· Western 印迹分析 56、57、59 和 512 编码蛋白在植物中的表达 | 第27-28
页 |
2 结果 | 第28-30
页 |
· RT-PCR 得到目的cDNA | 第28
页 |
· RDV 56、57、59 和512 编码蛋白在植物中的表达 | 第28-30
页 |
3 讨论 | 第30-31
页 |
第三章 RDV P9 酵母中转录激活活性的发现和鉴定 | 第31-37
页 |
1 材料与方法 | 第31-33
页 |
· 材料 | 第31-32
页 |
· 质粒及菌株 | 第31-32
页 |
· 试剂与培养基 | 第32
页 |
· 方法 | 第32-33
页 |
· 构建酵母单杂交质粒 | 第32
页 |
· 酵母的高效转化(LiAc 法) | 第32-33
页 |
· 酵母生长测试 | 第33
页 |
· 液体β-半乳糖苷酶活性测试 | 第33
页 |
· Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达 | 第33
页 |
2 结果 | 第33-36
页 |
· 酵母生长测试 | 第33-34
页 |
· 液体β-半乳糖苷酶活性测定 | 第34-36
页 |
· Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达 | 第36
页 |
3 讨论 | 第36-37
页 |
第四章 RDV P9 在植物体内具有转录激活活性 | 第37-42
页 |
1 材料与方法 | 第37-38
页 |
· 材料 | 第37
页 |
· 质粒与菌株 | 第37
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· 植物材料 | 第37
页 |
· 方法 | 第37-38
页 |
· 构建植物表达载体 | 第37-38
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· 农杆菌转化 | 第38
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· 农杆菌渗入法 | 第38
页 |
· GUS 组织化学染色 | 第38
页 |
· GUS 活性定量分析 | 第38
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· Western 印迹分析P9 在植物中的表达 | 第38
页 |
2 结果 | 第38-41
页 |
· GUS 活性分析 | 第38-39
页 |
· GUS 活性的定量检测 | 第39-40
页 |
· P9 在植物中的表达 | 第40-41
页 |
3 讨论 | 第41-42
页 |
第五章 RDV P9 亚细胞定位的研究 | 第42-45
页 |
1 材料与方法 | 第42-43
页 |
· 材料 | 第42
页 |
· 方法 | 第42-43
页 |
· 质粒构建 | 第42
页 |
· 烟草BY2 原生质体的制备 | 第42
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· 电转化 | 第42-43
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· 荧光显微镜观察 | 第43
页 |
2 结果 | 第43
页 |
3 讨论 | 第43-45
页 |
总结 | 第45-46
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参考文献 | 第46-51
页 |
附录 | 第51-56
页 |
致谢 | 第56-57
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作者简介 | 第57
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