论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
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| ABSTRACT | 第6-11
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| 第一章 猪圆环病毒研究进展 | 第11-26
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| · PCV 的发现和命名 | 第11-12
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| · PCV 的病毒学分类 | 第12
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| · PCV 的形态学特性与理化特性 | 第12-13
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| · PCV 的培养特性 | 第13
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| · PCV 的基因组 | 第13-14
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| · PCV 的复制与转录 | 第14-15
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| · PCV 的主要结构蛋白 | 第15-16
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| · Rep 蛋白 | 第15-16
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| · Cap 蛋白 | 第16
页 |
| · PCV2 的致病机理 | 第16-18
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| · PCV2 的流行病学 | 第18-19
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| · 宿主 | 第18
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| · 传播途径 | 第18-19
页 |
| · 传染源 | 第19
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| · PCV2 感染的临床症状与病变 | 第19-20
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| · 临床症状 | 第19-20
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| · 病理变化 | 第20
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| · PCV2 感染的诊断 | 第20-24
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| · 病毒分离 | 第20-21
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| · 电镜技术 | 第21
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| · 间接免疫荧光试验(IFA) | 第21
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| · 免疫细胞化学(ICC)及原位杂交技术(ISH) | 第21-22
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| · 抗原捕获ELISA | 第22
页 |
| · 聚合酶链式反应(PCR) | 第22
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| · 常规PCR | 第22
页 |
| · 复合PCR(mPCR) | 第22-23
页 |
| · 套式PCR(nPCR) | 第23
页 |
| · 竞争PCR(cPCR) | 第23
页 |
| · PCR 产物限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) | 第23
页 |
| · 免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA) | 第23-24
页 |
| · 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第24
页 |
| · PCV2 疫苗及免疫防治 | 第24-26
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| · 减弱活毒苗 | 第24
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| · 弱病毒活疫苗 | 第24-25
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| · DNA 疫苗 | 第25
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| · 基因工程疫苗 | 第25-26
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| · 亚单位疫苗 | 第25
页 |
| · 病毒活载体疫苗 | 第25-26
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| 第二章 基因工程疫苗研究进展 | 第26-33
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| · 基因工程亚单位疫苗 | 第26-28
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| · 细菌性疫病亚单位疫苗 | 第27
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| · 病毒性疫病亚单位疫苗 | 第27
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| · 激素亚单位疫苗 | 第27-28
页 |
| · 基因工程活载体疫苗 | 第28-30
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| · 基因突变疫苗及基因缺失疫苗 | 第28
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| · 病毒活载体重组疫苗 | 第28-29
页 |
| · 痘病毒活载体疫苗 | 第28-29
页 |
| · 腺病毒活载体疫苗 | 第29
页 |
| · 细菌活载体重组疫苗 | 第29-30
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| · 核酸疫苗 | 第30-31
页 |
| · 合成肽疫苗(synthetic peptide vaccines) | 第31
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| · 转基因植物疫苗 | 第31
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| · 本研究的目的和意义 | 第31-33
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| 第三章 重组腺病毒的培养、鉴定及活力测定 | 第33-44
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| · 材料与方法 | 第33-39
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| · 实验材料 | 第33-34
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| · 主要试验仪器 | 第33
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| · 主要试剂和耗材 | 第33-34
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| · 重组腺病毒、空载腺病毒及细胞株 | 第34
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| · 试验方法 | 第34-39
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| · 培养基的配制 | 第34
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| · 双抗的配制 | 第34-35
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| · 胰酶溶液的配制 | 第35
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| · 重组腺病毒和空载腺病毒的培养 | 第35
页 |
| · 重组腺病毒和空载腺病毒培养液的荧光检测 | 第35
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| · 引物设计 | 第35
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| · 重组腺病毒和空载腺病毒DNA 的提取 | 第35
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| · PCR 反应扩增ORF1 和ORF2 基因 | 第35-36
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| · 纯化回收DNA 片段 | 第36
页 |
| · 纯化产物与pMD-18T Vector 连接 | 第36-37
页 |
| · 感受态细胞的制备(CaC12 法) | 第37
页 |
| · 连接产物的转化 | 第37
页 |
| · 重组质粒的提取 | 第37-38
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| · 重组质粒的酶切鉴定 | 第38
页 |
| · 重组质粒的测序分析 | 第38
页 |
| · 重组腺病毒和空载腺病毒TCID50 值的测定 | 第38
页 |
| · 重组腺病毒表达PCV2 ORF1 和ORF2 基因的Western-blot 分析 | 第38-39
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| · 结果与分析 | 第39-42
页 |
| · 重组腺病毒和空载腺病毒病毒液的荧光检测 | 第39-40
页 |
| · PCR 反应扩增的ORF1 和ORF2 基因及酶切电泳 | 第40-41
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| · 重组质粒的序列分析 | 第41-42
页 |
| · 重组腺病毒表达PCV2 ORF1 和ORF2 基因的Western-blot 图 | 第42
页 |
| · 重组腺病毒及空载腺病毒TCID50 值 | 第42
页 |
| · 讨论 | 第42-43
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| · 小结 | 第43-44
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| 第四章 PCV2 ORF2 基因及ORF1-2 串联基因重组腺病毒的免疫效果 | 第44-57
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| · 实验材料 | 第44-45
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| · 细胞和毒株 | 第44
页 |
| · 实验动物 | 第44
页 |
| · 主要试剂及培养基 | 第44-45
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| · 主要实验仪器 | 第45
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| · 实验方法 | 第45-49
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| · 细胞免疫检测试剂 | 第45-46
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| · ELISA 用试剂 | 第46
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| · 实验动物的免疫 | 第46
页 |
| · PCV2 ORF2 特异性抗体的测定 | 第46-47
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| · 脾淋巴细胞的制备 | 第47
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| · 脾淋巴细胞增殖能力的测定(MTT 法) | 第47
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| · NK 细胞自然杀伤活性检测 | 第47-48
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| · CTL 杀伤活性的测定 | 第48
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| · 脾淋巴细胞亚群含量的检测 | 第48
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| · 统计学分析 | 第48-49
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| · 实验结果及分析 | 第49-54
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| · PCV2 ORF2 抗体检测结果 | 第49-50
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| · 脾淋巴细胞增殖能力的测定 | 第50-51
页 |
| · NK 细胞杀伤活性测 | 第51
页 |
| · CTL 杀伤活性测定 | 第51-53
页 |
| · 脾淋巴细胞亚群含量的检测 | 第53-54
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| · 讨论 | 第54-55
页 |
| · 小结 | 第55-57
页 |
| 结论 | 第57-58
页 |
| 参考文献 | 第58-66
页 |
| 缩略词 | 第66-67
页 |
| 致谢 | 第67-68
页 |
| 作者简介 | 第68
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