论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6
页 |
| Abstract | 第6-12
页 |
| 引言 | 第12-13
页 |
| 1 材料与方法 | 第13-22
页 |
| · 材料 | 第13-16
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| · 实验材料来源与细胞株 | 第13
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| · 手术器材 | 第13
页 |
| · 主要实验仪器 | 第13-14
页 |
| · 实验耗材 | 第14
页 |
| · 主要试剂 | 第14-16
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞、HTK与人胎儿角膜基质细胞培养液 | 第14
页 |
| · 小鼠3T3成纤维细胞培养液 | 第14-15
页 |
| · 消化酶类 | 第15
页 |
| · BCA蛋白定量实验试剂 | 第15
页 |
| · MTT实验试剂 | 第15
页 |
| · 细胞免疫荧光技术试剂 | 第15
页 |
| · 逆转录多聚酶链反应实验试剂 | 第15-16
页 |
| · 试剂配置 | 第16-17
页 |
| · 高糖型DMEM、DMEM/F12的配制 | 第16
页 |
| · 胰蛋白酶/EDTA | 第16
页 |
| · 5mg/ml DispaseⅡ的配制 | 第16
页 |
| · 0.02M PBS配方 | 第16-17
页 |
| · 方法 | 第17-22
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| · 细胞培养方法 | 第17-18
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的原代培养 | 第17
页 |
| · 人胎儿角膜基质细胞组织块贴壁法培养 | 第17-18
页 |
| · 牛角膜上皮、基质细胞的培养 | 第18
页 |
| · 小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞的培养 | 第18
页 |
| · 小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞条件培养液的制备 | 第18
页 |
| · 小鼠3T3成纤维细胞、HTK、人胎儿角膜基质细胞饲养层的制备 | 第18-19
页 |
| · 牛角膜上皮、基质、内皮细胞破碎液的制备 | 第19
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的传代方法 | 第19
页 |
| · 细胞相关检测 | 第19-22
页 |
| · CBA法测定不同条件培养液蛋白含量 | 第19-20
页 |
| · 四甲基偶氮比色(MTT)检测法 | 第20
页 |
| · 细胞免疫荧光染色 | 第20-21
页 |
| · RT-PCR方法检测K12、K15、Pax6、P75和ABCG2的表达 | 第21-22
页 |
| · 统计学分析 | 第22
页 |
| 2 结果 | 第22-25
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的生长情况观察 | 第22-24
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞原代培养 | 第22-23
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞传代培养 | 第23-24
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞培养体系的优化 | 第24
页 |
| · 三种条件培养液对人角膜上皮细胞增殖的影响 | 第24
页 |
| · 三种牛角膜细胞破碎液对人角膜上皮细胞增殖的影响 | 第24
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的性质鉴定 | 第24-25
页 |
| · 免疫荧光染色结果 | 第24-25
页 |
| · 角蛋白K12、CK15、Pax6、P75和ABCG2mRNA水平的表达情况 | 第25
页 |
| 3 讨论 | 第25-29
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的原代和传代培养方法的建立及其优化 | 第25-28
页 |
| · 原代培养 | 第25-26
页 |
| · 传代培养 | 第26-28
页 |
| · 人胎儿角膜上皮细胞的性质鉴定 | 第28-29
页 |
| 结论 | 第29
页 |
| 参考文献 | 第29-33
页 |
| 论文相关照片 | 第33-41
页 |
| 综述 | 第41-46
页 |
| 参考文献 | 第44-46
页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第46-47
页 |
| 附录 缩略词表 | 第47-48
页 |
| 致谢 | 第48-50
页 |
