论文目录 | |
专业名词缩写中英文对照简表 | 第1-5
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摘要 | 第5-7
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ABSTRACT | 第7-12
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前言 | 第12-28
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1 转录激活因子AP-2基因家族 | 第12-17
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· 转录激活因子AP-2基因家族的结构特点 | 第12-14
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· 转录激活因子AP-2γ的生物学功能 | 第14-15
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· AP-2蛋白家族与乳腺癌的关系 | 第15-17
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2 染色质免疫沉淀技术(ChIP) | 第17-20
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· ChIP技术的原理 | 第18-19
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· 在反式作用因子的靶序列的研究领域 | 第19-20
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3 受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 precursor,ErbB2)的简介 | 第20-22
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· ErbB2的分布、定位与结构 | 第20
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· erbB2与乳腺癌 | 第20-21
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· erbB2信号途径与乳腺癌 | 第21-22
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4 神经-钙粘素(N-cadherin,CDH2)的简介 | 第22-24
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· N-cadherin的分布、定位与结构 | 第23
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· N-cadherin的分子生物学性能 | 第23-24
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· N-cadherin与乳腺瘤 | 第24
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5 乙酰肝素酶(Heparanase,HPSE)的简介 | 第24-27
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· HPSE基因的分布、定位与结构 | 第24-25
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· HPSE的分子生物学性能 | 第25-26
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· HPSE与肿瘤转移 | 第26-27
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6 免疫球蛋白超家族成员11(Immunoglobulin superfamily member 11,IGSF11)的简介 | 第27-28
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第一部分 材料与方法 | 第28-46
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1 材料 | 第28-34
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· 菌种和细胞株 | 第28
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· 载体和工具酶 | 第28
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· 抗体 | 第28
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· 试剂盒 | 第28
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· 其它试剂 | 第28-29
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· 所需溶液 | 第29-32
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· siRNA干扰序列 | 第32
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· 主要仪器设备 | 第32-34
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2 实验方法 | 第34-46
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· 细胞培养 | 第34-35
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· 免疫沉淀和Western Blot检测 | 第35-37
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· 染色质免疫沉淀(ChIP) | 第37-38
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· AP-2γ-ChIP-PCR扩增实验 | 第38-39
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· 野生型和突变型pTAL-ChIP-DNA载体的构建及寡核苷酸合成 | 第39-41
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· 细胞转染和萤光素酶试验(Luciferase assay) | 第41-42
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· RNA抽提和相对定量RT-PCR | 第42-44
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· 电泳迁移率变动分析试验(EMSA) | 第44-45
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· 统计学分析 | 第45-46
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第二部分 结果分析 | 第46-55
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1 pUC19-ChIP-DNA质粒的测序结果及分析 | 第46-47
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2 AP-2γ-ChIP-PCR实验检验AP-2γ转录因子与R3-36,R4-28,R1-15片段结合的特异性 | 第47-48
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3 AP-2γ转录因子影响了R3-1,R3-36,R4-28,R1-15片段的转录活性 | 第48-51
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4 AP-2γ-ChIP-DNA片段上AP-2γ的潜在结合位点的鉴定 | 第51-52
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5 AP-2γ转录因子影响了ErbB2,CDH2,IGS11l和HPSE基因的mRNA的转录水平 | 第52-53
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6 AP-2γ调控ErbB2,CDH2,IGSF11和HPSE的蛋白表达 | 第53-55
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第三部分 讨论 | 第55-60
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参考文献 | 第60-66
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附录 | 第66-68
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致谢 | 第68-70
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