论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 材料与方法 | 第10-25页 |
| 1 实验材料 | 第10-11页 |
| 1.1 实验仪器与设备 | 第10-11页 |
| 1.2 实验试剂和耗材 | 第11页 |
| 2 实验载体构建 | 第11-17页 |
| 2.1 pGL3-AMOTL2-pro载体构建 | 第11-16页 |
| 2.2 pGL3-AMOTL2-pro-mut载体构建 | 第16-17页 |
| 3 细胞培养与转染 | 第17-18页 |
| 3.1 细胞培养 | 第17页 |
| 3.2 Lipofectamine~(TM)2000转染质粒 | 第17页 |
| 3.3 慢病毒转染细胞 | 第17-18页 |
| 4 RNA提取、逆转录及RT-PCR | 第18-20页 |
| 4.1 RNA提取 | 第18页 |
| 4.2 逆转录反应 | 第18-19页 |
| 4.3 qRT-PCR | 第19-20页 |
| 5 细胞增殖能力检测实验 | 第20页 |
| 6 双荧光素酶报告实验 | 第20页 |
| 7 染色质免疫共沉淀实验 | 第20-22页 |
| 7.1 细胞预处理 | 第20-21页 |
| 7.2 细胞核处理和染色质剪切 | 第21-22页 |
| 8 蛋白印迹实验 | 第22-24页 |
| 8.1 贴壁细胞蛋白提取 | 第22-23页 |
| 8.2 蛋白浓度测定 | 第23页 |
| 8.3 免疫印迹(WB) | 第23-24页 |
| 9 统计学方法 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-34页 |
| 1 MEF2D过表达后肝癌细胞株PLC/PRF5细胞中AMOTL2 mRNA的水平变化 | 第25页 |
| 2 MEF2D 过表达和干扰后肝癌细胞中 AMOTL2 的蛋白水平变化 | 第25-27页 |
| 3 染色质免疫共沉淀检测MEF2D蛋白结合AMOTL2 启动子 | 第27页 |
| 4 双荧光素酶实验检测MEF2D对 AMOTL2 启动子活性影响 | 第27-29页 |
| 5 过表达 MEF2D 后肝癌细胞中总体和磷酸化 YAP 的蛋白表达水平变化 | 第29-31页 |
| 6 过表达和干扰MEF2D后 Huh7 细胞增殖速度的变化 | 第31-32页 |
| 7 MEF2D通过调控AMOTL2 促进肝癌细胞的增殖 | 第32-34页 |
| 讨论 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 综述 | 第39-52页 |
| 综述参考文献 | 第46-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
| 缩略词表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
