论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4
页 |
| Abstract | 第4-7
页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13
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| · 研究背景 | 第7-11
页 |
| · 葡萄糖异构酶简介 | 第7-8
页 |
| · 高果糖浆研究现状与葡萄糖异构酶在高果糖浆生产中的应用 | 第8-9
页 |
| · 嗜热菌和耐热性葡萄糖异构酶的研究现状 | 第9-10
页 |
| · 影响外源基因在大肠杆菌宿主中表达因素的研究进展 | 第10-11
页 |
| · 立题背景及意义 | 第11-12
页 |
| · 课题研究内容 | 第12-13
页 |
| 第二章 葡萄糖异构酶编码基因xylA 的克隆、序列优化与表达 | 第13-25
页 |
| · 引言 | 第13
页 |
| · 材料与方法 | 第13-18
页 |
| · 菌株与质粒 | 第13
页 |
| · 培养基 | 第13
页 |
| · 主要试剂 | 第13-14
页 |
| · 主要仪器 | 第14
页 |
| · T. maritima 的培养方法 | 第14
页 |
| · T. maritima 基因组DNA 的提取方法 | 第14-15
页 |
| · 电转化感受态细胞的制备 | 第15
页 |
| · 引物设计及目的基因PCR 方法扩增 | 第15
页 |
| · pHsh-xylA1 的构建、转化及阳性转化子的筛选 | 第15-16
页 |
| · 经过序列优化的表达载体pHsh-xylA2 的构建 | 第16-17
页 |
| · 粗酶液的制备及重组酶酶活的测定 | 第17-18
页 |
| · 重组酶蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第18
页 |
| · 菌株质粒稳定性实验 | 第18
页 |
| · 结果与讨论 | 第18-24
页 |
| · xylA 基因的克隆与pHsh-xylA1 的构建 | 第18-19
页 |
| · mRNA 二级结构的优化以及pHsh-xylA2 的构建 | 第19-21
页 |
| · 重组菌株E. coli JM109（pHsh-xylA2）诱导条件的优化 | 第21-23
页 |
| · 突变效果的对比 | 第23-24
页 |
| · 重组质粒pHsh-xylA2 的稳定性 | 第24
页 |
| · 本章小结 | 第24-25
页 |
| 第三章 重组耐热葡萄糖异构酶的纯化与性质 | 第25-32
页 |
| · 引言 | 第25
页 |
| · 材料与方法 | 第25-27
页 |
| · 菌种与培养基 | 第25
页 |
| · 主要试剂及缓冲液 | 第25
页 |
| · 主要仪器及其生产厂商 | 第25
页 |
| · 重组葡萄糖异构酶的纯化 | 第25-26
页 |
| · 重组葡萄糖异构酶的酶学性质的测定 | 第26-27
页 |
| · 结果和讨论 | 第27-31
页 |
| · 葡萄糖异构酶的纯化 | 第27-28
页 |
| · 重组葡萄糖异构酶的性质 | 第28-31
页 |
| · 本章小结 | 第31-32
页 |
| 第四章 重组菌E. coli JM109(pHsh-xylA2)表达培养 | 第32-41
页 |
| · 引言 | 第32
页 |
| · 材料和方法 | 第32-33
页 |
| · 菌种 | 第32
页 |
| · 培养基 | 第32
页 |
| · 试剂 | 第32
页 |
| · 主要仪器及其生产厂商 | 第32-33
页 |
| · 种子培养 | 第33
页 |
| · 培养基优化 | 第33
页 |
| · 发酵罐培养方法 | 第33
页 |
| · 葡萄糖浓度的测定 | 第33
页 |
| · 菌体浓度和重量 | 第33
页 |
| · 结果与讨论 | 第33-40
页 |
| · 培养基组分对重组菌生长的影响 | 第33-39
页 |
| · 3.8 L 台式发酵罐中重组菌的培养 | 第39-40
页 |
| · 本章小结 | 第40-41
页 |
| 第五章 结论 | 第41-42
页 |
| 致谢 | 第42-43
页 |
| 参考文献 | 第43-47
页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47
页 |
