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不对称还原产l-麻黄碱重组大肠杆菌的构建
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不对称还原产l-麻黄碱重组大肠杆菌的构建
论文目录
 
摘要第1-4 页
Abstract第4-8 页
第一章 前言第8-17 页
　　· 麻黄碱概述第8-9 页
　　　　· 麻黄碱简介第8 页
　　　　· 麻黄碱作用第8-9 页
　　· 麻黄碱的生产第9-11 页
　　　　· 植物提取法第9 页
　　　　· 化学合成法第9-10 页
　　　　· 植物细胞组织培养麻黄碱第10 页
　　　　· 半生物转化法生产麻黄碱第10-11 页
　　· 手性化合物简介及研究现状第11-12 页
　　　　· 手性化合物简介第11 页
　　　　· 手性化合物研究现状第11-12 页
　　· 手性化合物制备方法第12-13 页
　　　　· 物理法第12 页
　　　　· 化学法第12-13 页
　　　　· 生物合成与转化第13 页
　　· 生物催化第13-14 页
　　　　· 生物催化羰基还原反应原理第13-14 页
　　　　· 与化学方法的比较第14 页
　　　　· 纯化酶与全细胞生物催化的比较第14 页
　　· 羰基不对称还原酶的应用第14-15 页
　　· 研究意义第15-16 页
　　· 研究内容第16-17 页
第二章 羰基不对称还原酶基因的克隆与表达第17-30 页
　　· 材料与方法第17-23 页
　　　　· 菌株和质粒第17 页
　　　　· 培养基第17 页
　　　　· 主要生化和分子生物学试剂第17-18 页
　　　　· 主要仪器和设备第18 页
　　　　· 引物设计第18 页
　　　　· 质粒的大量提取第18 页
　　　　· PCR 反应第18-19 页
　　　　· PCR 产物的纯化第19 页
　　　　· 琼脂糖凝胶电泳第19 页
　　　　· 大肠杆菌E.coli JM109 感受态的制备及简易转化程序第19-20 页
　　　　· 常规基因克隆操作方法第20 页
　　　　· 重组表达载体pKK223-mldh 的构建第20-21 页
　　　　· 蛋白质含量的测定第21-22 页
　　　　· 细胞裂解液的制备第22 页
　　　　· 酶活测定方法第22 页
　　　　· 重组质粒pKK223-mldh 表达产物的鉴定第22-23 页
　　　　· 重组菌生长曲线的测定第23 页
　　　　· 重组质粒pKK223-mldh 稳定性分析第23 页
　　　　· IPTG 诱导条件的研究第23 页
　　· 结果与分析第23-29 页
　　　　· 目的基因mldh 的扩增第23-24 页
　　　　· 重组质粒pKK223-mldh 的构建第24-25 页
　　　　· 重组质粒稳定性分析第25-26 页
　　　　· 重组菌表达产物的鉴定第26 页
　　　　· 重组菌生长曲线的测定第26-27 页
　　　　· 重组菌IPTG 诱导条件的研究第27-28 页
　　　　· SDS-PAGE 蛋白电泳分析第28-29 页
　　· 本章小结第29-30 页
第三章 葡萄糖脱氢酶的克隆与表达第30-40 页
　　· 材料和方法第30-35 页
　　　　· 菌株和质粒第30 页
　　　　· 培养基第30-31 页
　　　　· 主要生化和分子生物学试剂第31 页
　　　　· 主要仪器和设备第31 页
　　　　· 引物设计第31 页
　　　　· 枯草芽孢杆菌总DNA 的提取第31 页
　　　　· PCR 反应第31-32 页
　　　　· PCR 产物纯化第32 页
　　　　· 琼脂糖凝胶电泳第32 页
　　　　· 重组表达载体的构建第32-33 页
　　　　· 蛋白含量测定第33 页
　　　　· 细胞裂解液的制备第33 页
　　　　· 酶活测定方法第33-34 页
　　　　· 生长曲线的测定第34 页
　　　　· SDS-PAGE 蛋白电泳第34 页
　　　　· 重组质粒pET28a-gdh 稳定性分析第34-35 页
　　　　· 重组菌E.coli BL21(pET28a-gdh)在生物催化不对称反应中的应用第35 页
　　· 结果与分析第35-39 页
　　　　· 目的基因gdh 的扩增第35 页
　　　　· 重组质粒pET28a-gdh 的构建第35-36 页
　　　　· 重组质粒稳定性分析第36 页
　　　　· 重组菌生长曲线的测定第36-37 页
　　　　· 葡萄糖脱氢酶酶活测定第37 页
　　　　· SDS-PAGE 蛋白电泳分析第37-38 页
　　　　· 重组菌E.coli BL21 (pET28a-gdh)在生物催化不对称反应中的应用第38-39 页
　　· 本章小结第39-40 页
第四章 共表达重组大肠杆菌产麻黄碱的研究第40-47 页
　　· 材料和方法第40-41 页
　　　　· 菌株和质粒第40 页
　　　　· 培养基第40 页
　　　　· 主要生化和分子生物学试剂第40 页
　　　　· 主要仪器和设备第40 页
　　　　· 重组大肠杆菌E.coli JM109 (pKK223-mldh，pET28a-gdh)和E.coli BL21(pKK223-mldh，pET28a-gdh)的构建第40 页
　　　　· 重组菌生长曲线的测定第40-41 页
　　　　· 培养时间对质粒共存的影响第41 页
　　　　· 辅酶对重组菌不对称还原反应的影响第41 页
　　　　· 羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶酶活测定第41 页
　　· 结果与分析第41-45 页
　　　　· 共表达重组大肠杆菌的构建第41-42 页
　　　　· 培养时间对质粒共存的影响第42-43 页
　　　　· 重组菌生长曲线测定第43 页
　　　　· 辅酶对重组菌不对称还原反应的影响第43-45 页
　　　　· 重组大肠杆菌在生物催化产l-麻黄碱中的应用第45 页
　　· 讨论第45-47 页
主要结论和展望第47-48 页
致谢第48-49 页
参考文献第49-53 页
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文第53 页

本篇论文共53页，点击这进入下载页面。
 
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