论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8
页 |
| ABSTRACT | 第8-20
页 |
| 第一章 背景 | 第20-26
页 |
| · DNA甲基化与白血病 | 第20-23
页 |
| · MDS | 第23-24
页 |
| · AML | 第24
页 |
| · CML | 第24-26
页 |
| 第二章 本论文研究的目的、方法及实验方案的设计、意义 | 第26-32
页 |
| · 研究目的 | 第26-28
页 |
| · 研究方法及技术 | 第28-30
页 |
| · 甲基化特异性PCR (MSP) | 第28-29
页 |
| · MSP的引物设计注意要点 | 第29-30
页 |
| · 实验方案的设计 | 第30
页 |
| · 本研究的意义 | 第30-32
页 |
| 第三章 GRAF基因启动子甲基化特异性PCR的建立和应用 | 第32-42
页 |
| · 材料 | 第32-33
页 |
| · 研究对象 | 第32
页 |
| · 主要试剂 | 第32-33
页 |
| · 主要仪器 | 第33
页 |
| · 方法 | 第33-38
页 |
| · 骨髓单个核细胞分离和DNA制备 | 第33
页 |
| · DNA修饰 | 第33-34
页 |
| · GRAF基因启动子甲基化检测 | 第34-35
页 |
| · PCR产物回收与纯化 | 第35
页 |
| · 重组载体构建 | 第35-36
页 |
| · 重组质粒转化 | 第36
页 |
| · 重组质拉提取 | 第36-37
页 |
| · 质粒鉴定、测序 | 第37
页 |
| · 质粒鉴定 | 第37
页 |
| · 测序 | 第37
页 |
| · MSP的特异性检测 | 第37
页 |
| · MSP的重复性检测 | 第37
页 |
| · MSP的敏感性检测 | 第37
页 |
| · 标本MSP检测 | 第37-38
页 |
| · 结果 | 第38-40
页 |
| · MSP的特异性 | 第38
页 |
| · 重复性 | 第38
页 |
| · 敏感性 | 第38-39
页 |
| · 测序结果 | 第39-40
页 |
| · 标本的MSP检测结果 | 第40
页 |
| 3.4. 讨论 | 第40-42
页 |
| 第四章 MDS患者中CRAF基因甲基化检测及临床相关性分析 | 第42-48
页 |
| · 材料和仪器 | 第42
页 |
| · 病例资料 | 第42
页 |
| · 试剂 | 第42
页 |
| · 主要仪器 | 第42
页 |
| · 方法 | 第42-43
页 |
| · 骨髓单个核细胞分离和DNA制备 | 第42
页 |
| · DNA提取与修饰 | 第42
页 |
| · GRAF基因甲基化检测 | 第42
页 |
| · PCR产物回收与纯化 | 第42-43
页 |
| · 重组载体构建 | 第43
页 |
| · 重组质粒转化 | 第43
页 |
| · 重组质拉提取 | 第43
页 |
| · 质粒鉴定、测序 | 第43
页 |
| · 细胞遗传学检查 | 第43
页 |
| · 统计 | 第43
页 |
| · 结果 | 第43-46
页 |
| · MDS患者中GRAF基因甲基化频率 | 第43-44
页 |
| · GRAF基因甲基化频率与MDS亚型的关系 | 第44
页 |
| · GRAF基因甲基化频率与MDS预后的关系 | 第44-46
页 |
| · 讨论 | 第46-48
页 |
| 第五章 AML患者中GRAF基因甲基化检测及临床相关性分析 | 第48-54
页 |
| · 材料和仪器 | 第48
页 |
| · 病例资料 | 第48
页 |
| · 试剂 | 第48
页 |
| · 主要仪器 | 第48
页 |
| · 方法 | 第48-49
页 |
| · 骨髓单个核细胞分离和DNA制备 | 第48
页 |
| · DNA提取与修饰 | 第48
页 |
| · GRAF基因甲基化检测 | 第48
页 |
| · PCR产物回收与纯化 | 第48
页 |
| · 重组载体构建 | 第48
页 |
| · 重组质粒转化 | 第48
页 |
| · 重组质拉的提取 | 第48
页 |
| · 质粒鉴定、测序 | 第48-49
页 |
| · 细胞遗传学检查 | 第49
页 |
| · 统计 | 第49
页 |
| · 结果 | 第49-51
页 |
| · AML患者中GRAF基因甲基化频率 | 第49
页 |
| · GRAF基因甲基化频率与AML亚型的关系 | 第49-51
页 |
| · 讨论 | 第51-54
页 |
| 第六章 CML患者中GRAF基因甲基化改变及临床相关性分析 | 第54-60
页 |
| · 材料和仪器 | 第54
页 |
| · 病例资料 | 第54
页 |
| · 试剂 | 第54
页 |
| · 主要仪器 | 第54
页 |
| · 方法 | 第54-55
页 |
| · 骨髓单个核细胞分离和DNA制备 | 第54
页 |
| · DNA提取与修饰 | 第54
页 |
| · GRAF基因甲基化检测 | 第54
页 |
| · PCR产物回收与纯化 | 第54
页 |
| · 重组载体的构建 | 第54
页 |
| · 重组质粒转化 | 第54
页 |
| · 重组质拉提取 | 第54
页 |
| · 质粒鉴定、测序 | 第54
页 |
| · 细胞遗传学检查 | 第54-55
页 |
| · 统计 | 第55
页 |
| · 结果 | 第55-58
页 |
| · CML患者中GRAF基因甲基化频率 | 第55
页 |
| · GRAF基因甲基化频率与CML分期的关系 | 第55-58
页 |
| · 讨论 | 第58-60
页 |
| 第七章 EvaGreen实时定量PCR法检测急性髓系白血病GRAF基因表达 | 第60-66
页 |
| · 材料和仪器 | 第60-61
页 |
| · 病例资料 | 第60-61
页 |
| · 试剂 | 第61
页 |
| · 主要仪器 | 第61
页 |
| · 方法 | 第61-62
页 |
| · 细胞分离和RNA提取 | 第61
页 |
| · 逆转录 | 第61
页 |
| · 定性PCR扩增 | 第61
页 |
| · RQ-PCR阳性模板的构建 | 第61
页 |
| · RQ-PCR检测GRAF基因的表达 | 第61-62
页 |
| · 统计方法 | 第62
页 |
| · 结果 | 第62-64
页 |
| · RQ-PCR方法的敏感性、重复性、特异性 | 第62-63
页 |
| · GRAF基因在AML患者和对照组的表达 | 第63-64
页 |
| · AML患者GRAF基因表达水平与性别、年龄、血象关系 | 第64
页 |
| · AML患者FAB各亚型GRAF基因表达水平 | 第64
页 |
| · AML患者核型分组GRAF基因表达水平 | 第64
页 |
| · AML患者甲基化阳性组与阴性组GRAF基因表达水平 | 第64
页 |
| · 讨论 | 第64-66
页 |
| 第八章 结论 | 第66-67
页 |
| 致谢 | 第67-68
页 |
| 参考文献 | 第68-75
页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章及获奖 | 第75
页 |
