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HCV核心基因特异性M1GS核酶的靶向切割活性研究
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HCV核心基因特异性M1GS核酶的靶向切割活性研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
前言第8-12页
1 材料与仪器第12-18页
2 实验方法第18-41页
　　· HCV 核心基因的克隆与鉴定第18-25页
　　　　· HCV 核心基因原核核表达载体的克隆与鉴定第18-23页
　　　　· HCV 核心基因真核表达载体的克隆与鉴定第23-25页
　　· M1GS 核酶基因的构建与克隆第25-29页
　　　　· M1GS 核酶原核表达载体的构建第25-28页
　　　　· M1GS 核酶的真核表达载体的构建第28-29页
　　· HCV 核心基因MRNA 的合成和鉴定第29-32页
　　　　· HCV 核心基因的原核表达载体的线性化及5′平滑第29-30页
　　　　· 靶基因RNA 的体外转录合成与鉴定第30-32页
　　· M1GS 核酶的合成和鉴定第32页
　　· 胞外切割反应第32-34页
　　· 胞内切割实验第34-41页
　　　　· 细胞培养及转染第34-38页
　　　　· HCV 核心蛋白的western blot 分析第38-41页
3 结果第41-56页
　　· HCV 核心基因的克隆与鉴定第41-45页
　　　　· HCV 核心基因原核核表达载体的构建第41-43页
　　　　· HCV 核心基因真核表达载体的构建第43-45页
　　· M1GS 核酶基因的构建与克隆第45-49页
　　　　· M1GS 核酶原核表达载体的构建第45-48页
　　　　　　· M1GS DNA PCR 模板的制备第45-46页
　　　　　　· 四个M1GS DNA 片段的PCR 扩增第46-47页
　　　　　　· 四个PGEM-M1GS 载体的双酶切鉴定第47-48页
　　　　　　· 四个PGEM-M1GS载体的测序结果第48页
　　　　· M1GS 核酶真核表达载体的构建第48-49页
　　　　　　· M1GS DNA 真核表达载体的双酶切鉴定结果第48-49页
　　· HCV 核心基因MRNA 的鉴定第49-50页
　　· M1GS 核酶RNA 的鉴定第50-51页
　　· 胞外切割反应第51-52页
　　· 胞内切割实验第52-56页
　　　　· 靶mRNA 的RT-PCR 半定量第52-54页
　　　　· HCV 核心蛋白的western blot 检测第54-56页
· 讨论第56-62页
　　· 靶位的确定第56页
　　· GS 的设计第56-57页
　　· M1GS 核酶基因引物的设计第57页
　　· 靶RNA 和M1GS 核酶的制备第57-58页
　　· 胞外切割系统的建立第58-59页
　　· 胞内切割系统的建立第59-62页
5 小结及展望第62-64页
　　· 小结第62页
　　· 展望第62-64页
6 参考文献第64-67页
附录一：缩略词表中英对照第67-68页
附录二：PGEM3Z 载体的图谱第68-69页
附录三：在读硕士期间撰写及发表科研论文第69-70页
附录四： 测序图第70-76页
致谢第76页

本篇论文共76页，点击这进入下载页面。
 
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