论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 英文缩写词表 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| · 干扰素研究进展 | 第10-14页 |
| · 干扰素的分类及其分子结构 | 第10页 |
| · 干扰素抗病毒作用机制 | 第10-11页 |
| · 干扰素信号通路 | 第11-13页 |
| · 禽类干扰素研究概况 | 第13-14页 |
| · Mx 基因研究进展 | 第14-18页 |
| · Mx基因的多样性 | 第14-15页 |
| · Mx蛋白的结构及其抗病毒活性 | 第15-17页 |
| · 鸡Mx基因多态性及功能多样性 | 第17-18页 |
| · 禽流感概况 | 第18-19页 |
| · 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 鸡α干扰素基因克隆、序列分析及原核表达 | 第20-33页 |
| · 材料与方法 | 第20-26页 |
| · 材料 | 第20页 |
| · 方法 | 第20-26页 |
| · 攻毒实验 | 第20页 |
| · 总RNA提取 | 第20-21页 |
| · RT-PCR | 第21-22页 |
| · ChIFN-α-pGEX-5X3 原核表达载体的构建 | 第22-23页 |
| · 感受态细胞制备与转化 | 第23-24页 |
| · 重组子的鉴定 | 第24-25页 |
| · ChIFN-α序列分析 | 第25页 |
| · 重组质粒ChIFN-α-pGEX-5X3 在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第25页 |
| · 表达条件的优化 | 第25页 |
| · ChIFN-α原核表达重组蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| · Western blotting分析 | 第26页 |
| · 结果与分析 | 第26-30页 |
| · ChIFN-α基因的克隆 | 第26页 |
| · ChIFN-α-pGEX-5X3 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| · ChIFN-α序列分析 | 第27-29页 |
| · 重组质粒ChIFN-α-pGEX-5X3 在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第29-30页 |
| · 讨论 | 第30-33页 |
| · 鸡α干扰素基因克隆及其序列分析 | 第30页 |
| · 鸡α干扰素基因在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第30-31页 |
| · ChIFN-α作为核酸疫苗的免疫佐剂 | 第31-33页 |
| 第三章 鸡Mx基因原核表达、多克隆抗体制备及氨基酸序列多态性分析 | 第33-48页 |
| · 材料方法 | 第33-39页 |
| · 材料 | 第33页 |
| · 方法 | 第33-39页 |
| · 引物设计 | 第33页 |
| · PCR扩增 | 第33-34页 |
| · Mx-pGEX-4T3 原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| · ChMx-pGEX-4T3 重组质粒在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第36页 |
| · Western blotting分析 | 第36页 |
| · ChMx原核表达重组蛋白的纯化 | 第36页 |
| · 兔抗ChMx蛋白抗体的制备 | 第36-37页 |
| · 斑点酶联免疫吸附法(Dot enzyme-linked immunosorbent assay,Dot-ELISA) 检测兔血清中抗体效价 | 第37页 |
| · Western blotting检测兔血清中抗ChMx多克隆抗体 | 第37页 |
| · ChMx-pEGFP-N1 真核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| · Mx蛋白氨基酸序列多态性分析 | 第38-39页 |
| · 结果与分析 | 第39-42页 |
| · ChMx-pGEX-4T3 原核表达载体的构建 | 第39页 |
| · 重组质粒ChMx-pGEX-4T3 在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第39-40页 |
| · Bradford法的回归方程及相关系数的确定 | 第40-41页 |
| · Mx-pEGFP-N1 真核表达载体的构建 | 第41页 |
| · Mx蛋白氨基酸序列多态性分析 | 第41-42页 |
| · 讨论 | 第42-48页 |
| · Mx蛋白氨基酸序列多态性 | 第42-44页 |
| · 原核表达载体和宿主的选择 | 第44-46页 |
| · 多克隆抗体的制备 | 第46-47页 |
| · 真核表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 第四章 结论与展望 | 第48-49页 |
| · 结论 | 第48页 |
| · 展望 | 第48-49页 |
| 附章 F型沙眼衣原体主外膜蛋白基因omp1 原核表达及其序列分析 | 第49-62页 |
| 1 材料与方法 | 第49-55页 |
| · 实验材料 | 第49-50页 |
| · 实验方法 | 第50-55页 |
| · 沙眼衣原体主外膜蛋白基因omp1 的克隆 | 第50-51页 |
| · 沙眼衣原体主外膜蛋白基因omp1 序列分析 | 第51-52页 |
| · 沙眼衣原体主外膜蛋白基因omp1 的原核表达 | 第52-53页 |
| · 重组质粒粒Omp1-pGEX-5X3 在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第53页 |
| · Omp1-pEGFP-N1 真核表达载体的构建 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-60页 |
| · omp1 基因的克隆 | 第55页 |
| · omp1 基因的序列分析 | 第55-58页 |
| · F型沙眼衣原体主外膜蛋白基因omp1 原核表达载体的构建 | 第58页 |
| · Omp1-pGEX-5X3 在Rosetta(DE3)plysS中表达 | 第58-59页 |
| · Omp1-pEGFP-N1 真核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| · 沙眼衣原体流行病学 | 第60页 |
| · omp1 用于沙眼衣原体分型 | 第60-61页 |
| · MOMP作为沙眼衣原体疫苗的最佳的候选抗原 | 第61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录1 常用试剂配置 | 第68-70页 |
| 附录2 载体信息 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简历及论文发表情况 | 第73页 |
