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寄生曲霉脂肪酶的全基因合成、表达及生物信息学分析
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寄生曲霉脂肪酶的全基因合成、表达及生物信息学分析
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 绪论第10-19页
　　1 脂肪酶的研究进展第10-17页
　　　　· 脂肪酶的简介第10-11页
　　　　· 脂肪酶结构及催化机理第11-14页
　　　　· 脂肪酶的生产及应用第14-17页
　　2 寄生曲霉脂肪酶研究现状第17-18页
　　3 本研究的目的与意义第18-19页
第二章 寄生曲霉脂肪酶的全基因合成第19-33页
　　1 材料第19-21页
　　　　· 菌种与载体第19页
　　　　· 工具酶和生化试剂第19页
　　　　· 培养基的配制第19-20页
　　　　· 缓冲液的配制第20页
　　　　· 常用仪器第20-21页
　　2 方法第21-28页
　　　　· 试验流程第21页
　　　　· 引物设计第21-23页
　　　　· PCR扩增目的基因片段第23-24页
　　　　· T7 核酸内切酶I处理错配问题第24-25页
　　　　· 琼脂糖凝胶电泳第25页
　　　　· PCR产物目的基因片段的回收第25页
　　　　· PCR扩增基因片段双酶切及载体构建第25-26页
　　　　· E.coli DH5α感受态细胞制备第26页
　　　　· 重组质粒的大肠杆菌转化第26-27页
　　　　· 重组子单克隆筛选鉴定第27页
　　　　· 载体pFL-B13cl-lip AP的构建第27-28页
　　3 结果与讨论第28-32页
　　　　· lipAP基因的人工合成第28-29页
　　　　· 重组子单克隆筛选鉴定第29-32页
　　4 本章小结第32-33页
第三章 脂肪酶LIPASE AP在大肠杆菌中的表达与纯化第33-49页
　　1 材料第33-35页
　　　　· 菌种和载体第33页
　　　　· 主要生化试剂第33页
　　　　· 培养基及溶液配制第33-35页
　　　　· 主要仪器第35页
　　2 方法第35-39页
　　　　· 重组质粒的表达宿主转化第35页
　　　　· 工程菌表达条件优化第35-36页
　　　　· SDS-PAGE电泳检测第36页
　　　　· Western Blot印迹杂交第36-37页
　　　　· 包涵体制备及变复性第37-38页
　　　　· 透析袋处理第38页
　　　　· 融合蛋白的纯化第38页
　　　　· 融合蛋白的酶切第38-39页
　　　　· 比酶活测定第39页
　　3 结果与讨论第39-48页
　　　　· 工程菌的表达优化第39-42页
　　　　· 包涵体变复性第42-44页
　　　　· 融合蛋白的纯化第44-45页
　　　　· 融合蛋白的酶切第45-46页
　　　　· 比酶活测定第46-48页
　　4 本章小节第48-49页
第四章 寄生曲霉脂肪酶信息学分析第49-61页
　　1 材料与方法第49-52页
　　　　· 材料第49-50页
　　　　· 方法第50-52页
　　2 结果与讨论第52-60页
　　　　· Lipase AP 蛋白的物理化学性质及跨膜结构域分析第52-53页
　　　　· Lipase AP的亚细胞定位及信号肽预测第53-54页
　　　　· Lipase AP蛋白质二级结构分析第54-56页
　　　　· Lipase AP系统发育进化分析第56-59页
　　　　· Lipase AP三维结构的预测第59-60页
　　3 本章小结第60-61页
第五章 结论与展望第61-63页
　　1 研究结论及创新点第61页
　　2 展望第61-63页
参考文献第63-68页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第68-69页
致谢第69-70页
附件第70页

本篇论文共70页，点击这进入下载页面。
 
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