Aβ42诱导线粒体自噬及其生物学效应研究
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Aβ42诱导线粒体自噬及其生物学效应研究
论文目录
致谢
第1-6页
中文摘要
第6-8页
ABSTRACT
第8-12页
1 引言
第12-16页
1.1 研究背景和意义
第12页
1.2 线粒体自噬的研究现状及问题
第12-14页
1.2.1 线粒体自噬
第12-14页
1.2.2 线粒体自噬与阿尔茨海默病
第14页
1.3 研究策略与创新点
第14-16页
2 材料
第16-23页
2.1 质粒、菌株及细胞系
第16页
2.2 试剂盒与酶
第16页
2.3 耗材与试剂
第16-19页
2.4 主要实验仪器
第19-20页
2.5 主要溶液的配制
第20-23页
2.5.1 核酸电泳缓冲液的配制
第20页
2.5.2 蛋白质电泳所用试剂及缓冲液的配制
第20-21页
2.5.3 细胞实验主要溶液配制
第21-22页
2.5.4 其他实验溶液配制
第22-23页
3 方法
第23-32页
3.1 技术路线
第23页
3.2 LC3基因引物设计
第23-24页
3.3 质粒的鉴定
第24页
3.4 细胞培养
第24-25页
3.4.1 U87 MG细胞的复苏
第24-25页
3.4.2 U87 MG细胞的培养
第25页
3.4.3 U87 MG细胞的冻存
第25页
3.5 细胞转染
第25-26页
3.6 Aβ42寡聚体的制备
第26页
3.7 细胞总RNA的提取及RT-PCR
第26-27页
3.8 细胞总蛋白的提取与测定
第27页
3.9 SDS-PAGE
第27-28页
3.10 Western blot检测LC3B、p62及Drp1表达
第28-29页
3.11 自噬的诱导及鉴定
第29页
3.12 免疫荧光
第29页
3.13 TEM确认自噬体超微结构
第29-30页
3.14 免疫电镜(IEM)
第30页
3.15 MTT法检测细胞活力
第30-31页
3.16 统计学分析
第31-32页
4 结果
第32-57页
4.1 质粒的构建
第32-34页
4.2 细胞培养与转染
第34-35页
4.3 质粒的选择
第35-37页
4.4 Aβ42诱导细胞线粒体自噬
第37-49页
4.4.1 胞外Aβ42处理诱导细胞线粒体自噬
第37-41页
4.4.2 剂量依赖性
第41-42页
4.4.3 时间依赖性
第42页
4.4.4 不同聚合程度Aβ42诱导细胞线粒体自噬
第42-47页
4.4.5 3MA抑制Aβ诱导线粒体自噬
第47-48页
4.4.6 TEM/IEM检测自噬小体超微结构
第48-49页
4.5 Drp1调控Aβ42线粒体自噬的效果和机制
第49-57页
5 讨论
第57-59页
6 结论
第59-60页
参考文献
第60-63页
附录 英文缩略词表
第63-64页
硕士期间发表论文情况
第64-65页
作者简历
第65-67页
学位论文数据集
第67页
本篇论文共
67
页,
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