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Aβ42诱导线粒体自噬及其生物学效应研究

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Aβ42诱导线粒体自噬及其生物学效应研究
论文目录
 
致谢第1-6页
中文摘要第6-8页
ABSTRACT第8-12页
1 引言第12-16页
  1.1 研究背景和意义第12页
  1.2 线粒体自噬的研究现状及问题第12-14页
    1.2.1 线粒体自噬第12-14页
    1.2.2 线粒体自噬与阿尔茨海默病第14页
  1.3 研究策略与创新点第14-16页
2 材料第16-23页
  2.1 质粒、菌株及细胞系第16页
  2.2 试剂盒与酶第16页
  2.3 耗材与试剂第16-19页
  2.4 主要实验仪器第19-20页
  2.5 主要溶液的配制第20-23页
    2.5.1 核酸电泳缓冲液的配制第20页
    2.5.2 蛋白质电泳所用试剂及缓冲液的配制第20-21页
    2.5.3 细胞实验主要溶液配制第21-22页
    2.5.4 其他实验溶液配制第22-23页
3 方法第23-32页
  3.1 技术路线第23页
  3.2 LC3基因引物设计第23-24页
  3.3 质粒的鉴定第24页
  3.4 细胞培养第24-25页
    3.4.1 U87 MG细胞的复苏第24-25页
    3.4.2 U87 MG细胞的培养第25页
    3.4.3 U87 MG细胞的冻存第25页
  3.5 细胞转染第25-26页
  3.6 Aβ42寡聚体的制备第26页
  3.7 细胞总RNA的提取及RT-PCR第26-27页
  3.8 细胞总蛋白的提取与测定第27页
  3.9 SDS-PAGE第27-28页
  3.10 Western blot检测LC3B、p62及Drp1表达第28-29页
  3.11 自噬的诱导及鉴定第29页
  3.12 免疫荧光第29页
  3.13 TEM确认自噬体超微结构第29-30页
  3.14 免疫电镜(IEM)第30页
  3.15 MTT法检测细胞活力第30-31页
  3.16 统计学分析第31-32页
4 结果第32-57页
  4.1 质粒的构建第32-34页
  4.2 细胞培养与转染第34-35页
  4.3 质粒的选择第35-37页
  4.4 Aβ42诱导细胞线粒体自噬第37-49页
    4.4.1 胞外Aβ42处理诱导细胞线粒体自噬第37-41页
    4.4.2 剂量依赖性第41-42页
    4.4.3 时间依赖性第42页
    4.4.4 不同聚合程度Aβ42诱导细胞线粒体自噬第42-47页
    4.4.5 3MA抑制Aβ诱导线粒体自噬第47-48页
    4.4.6 TEM/IEM检测自噬小体超微结构第48-49页
  4.5 Drp1调控Aβ42线粒体自噬的效果和机制第49-57页
5 讨论第57-59页
6 结论第59-60页
参考文献第60-63页
附录 英文缩略词表第63-64页
硕士期间发表论文情况第64-65页
作者简历第65-67页
学位论文数据集第67页

本篇论文共67页,点击这进入下载页面
 
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