论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-26页 |
1.1 植物细胞质雄性不育 | 第11-19页 |
1.1.1 植物中的细胞质雄性不育现象与细胞质遗传系统 | 第12-15页 |
1.1.2 CMS表达产物在器官中特异积累 | 第15页 |
1.1.3 CMS基因表达产物对线粒体细胞色素氧化酶或ATP酶的影响 | 第15-16页 |
1.1.4 CMS基因表达产物对线粒体膜产生影响 | 第16-17页 |
1.1.5 CMS系统的PCD过程 | 第17-19页 |
1.2 水稻野败型细胞质雄性不育 | 第19-24页 |
1.2.1 水稻细胞质雄性不育概述 | 第19-20页 |
1.2.2 水稻野败型细胞质雄性不育的发现 | 第20-21页 |
1.2.3 水稻野败型细胞质雄性不育基因WA352 | 第21-22页 |
1.2.4 水稻细胞色素c氧化酶组装因子Cox11 | 第22-23页 |
1.2.5 水稻野败型细胞质雄性不育分子机制 | 第23-24页 |
1.3 本研究目的与技术路线 | 第24-26页 |
第二章 实验材料及方法 | 第26-52页 |
2.1 实验材料 | 第26-34页 |
2.1.1 实验所用菌株、载体 | 第26-27页 |
2.1.2 实验缓冲液 | 第27-32页 |
2.1.3 实验常用培养基、试剂盒、酶 | 第32-33页 |
2.1.4 实验仪器及耗材 | 第33-34页 |
2.2 实验方法及原理 | 第34-52页 |
2.2.1 细胞质雄性不育蛋白WA352的分子克隆 | 第34-40页 |
2.2.2 细胞质雄性不育蛋白WA352的表达纯化 | 第40-44页 |
2.2.3 蛋白晶体的初筛、优化 | 第44-45页 |
2.2.4 硒代蛋白的表达与纯化 | 第45-46页 |
2.2.5 数据收集与结构解析 | 第46页 |
2.2.6 酵母双杂交实验原理与方法 | 第46-48页 |
2.2.7 Cox11分子克隆的构建 | 第48-49页 |
2.2.8 Cox11的表达与纯化 | 第49-50页 |
2.2.9 WA352/Cox11复合物的表达纯化 | 第50页 |
2.2.10 drICE蛋白的表达与纯化 | 第50-52页 |
第三章 结果 | 第52-88页 |
3.1 细胞质雄性不育蛋白WA352的分子克隆结果 | 第52-54页 |
3.1.1 构建WA352表达载体 | 第52-53页 |
3.1.2 表达质粒载体获得 | 第53-54页 |
3.2 细胞质雄性不育蛋白WA352的表达纯化结果 | 第54-67页 |
3.2.1 WA352蛋白截短片段的表达纯化 | 第55-61页 |
3.2.2 蛋白酶限制性水解 | 第61-66页 |
3.2.3 预测WA352蛋白结晶截短体 | 第66-67页 |
3.3 结晶条件筛选与晶体优化 | 第67-70页 |
3.3.1 WA352蛋白的结晶 | 第67-70页 |
3.3.2 晶体条件优化 | 第70页 |
3.4 硒代蛋白的表达 | 第70-72页 |
3.5 WA352蛋白晶体数据收集与结构的解析 | 第72-76页 |
3.5.1 晶体衍射与数据收集 | 第72-74页 |
3.5.2 WA352蛋白结构解析 | 第74-75页 |
3.5.3 WA352结构比对结果 | 第75-76页 |
3.6 细胞色素c氧化酶组装因子Cox11的体外重组表达与纯化 | 第76-81页 |
3.6.1 Cox11质粒构建 | 第76-78页 |
3.6.2 Cox11蛋白的表达与纯化 | 第78-81页 |
3.7 WA352/Cox11复合物的互作研究 | 第81-85页 |
3.7.1 WA352/Cox11复合物的表达与纯化结果 | 第81-84页 |
3.7.2 WA352/Cox11复合物酵母双杂交结果 | 第84页 |
3.7.3 分子模拟WA352与Cox11复合体 | 第84-85页 |
3.8 Cox11和WA352序列比对结果 | 第85-88页 |
第四章 总结与讨论 | 第88-90页 |
4.1 本研究的创新之处 | 第88-89页 |
4.2 研究展望 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
附录Ⅰ WA352 clone list | 第99-102页 |
附录Ⅱ Cox11 clone list | 第102页 |
附录III Copyright permissions of the figure in introduction | 第102-103页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-105页 |