论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 病原学特征 | 第12-13页 |
| 2 毒力因子及调控因子 | 第13-23页 |
| 3 非编码RNA研究进展 | 第23-27页 |
| 第二章 试验内容 | 第27-64页 |
| 试验一 LM rli60及伴侣分子hfq基因的克隆、分子特征及其缺失株的构建与鉴定 | 第27-46页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| · 菌株与质粒 | 第28页 |
| · 主要试剂及仪器 | 第28页 |
| · 引物 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-33页 |
| · rli60和hfq基因的扩增、克隆及测序鉴定 | 第29-30页 |
| · rli60和hfq生物信息学分析 | 第30-31页 |
| · ncRNArli60与hfq基因缺失株的构建 | 第31-32页 |
| · rli60和hfq基因缺失对LM生长特性的影响 | 第32页 |
| · hfq基因缺失对rli60基因转录水平的影响 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-44页 |
| · rli60、hfq基因的扩增、克隆及测序鉴定结果 | 第33页 |
| · rli60、hfq基因核苷酸及氨基酸序列分析 | 第33-35页 |
| · Hfq蛋白二、三级结构及功能活性位点预测分析 | 第35-36页 |
| · hfq基因的同源性比较及遗传进化分析 | 第36-37页 |
| · 上、下游同源臂扩增 | 第37-38页 |
| · SOE-PCR扩增结果 | 第38页 |
| · 重组穿梭质粒pKSV7-△rli60与pKSV7-△hfq构建及鉴定 | 第38-39页 |
| · pKSV7-△rli60与pKSV7-△hfq阳性转化子鉴定结果 | 第39-40页 |
| · 同源重组菌的PCR鉴定 | 第40-43页 |
| · LM-△rli60与LM-△hfq的遗传稳定性分析 | 第43页 |
| · 体外培养生长特性检测结果 | 第43页 |
| · rli60基因相对转录水平检测结果 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 试验二 rli60基因缺失对LM环境应激及生物膜生成能力的影响 | 第46-54页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| · 菌株 | 第46-47页 |
| · 主要试剂及仪器 | 第47页 |
| · 引物 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| · ncRNA rli60基因缺失对LM环境应激能力的影响 | 第47页 |
| · ncRNA rli60基因缺失对LM生物膜生成能力的影响 | 第47-48页 |
| · gltB、gltC基因相对转录水平的检测 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-52页 |
| · rli60基因缺失对LM温度应激能力的影响结果 | 第48-49页 |
| · rli60基因缺失对LM不同pH及乙醇应激能力的影响结果 | 第49-50页 |
| · rli60基因缺失对生物膜生成能力的影响结果 | 第50-51页 |
| · 生物膜生成相关基因gltB、gltC相对转录水平检测结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 试验三 ncRNA rli60基因缺失对LM毒力的影响 | 第54-64页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| · 菌株和实验动物 | 第54-55页 |
| · 主要试剂及仪器 | 第55页 |
| · 引物 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-58页 |
| · 小鼠半数致死量（LD50）的测定 | 第55-56页 |
| · 肝脏、脾脏载菌量检测及病理变化观察 | 第56页 |
| · 溶血试验 | 第56页 |
| · 磷脂酶活性试验 | 第56-57页 |
| · 细胞黏附、侵袭能力及胞内生存增殖能力检测 | 第57页 |
| · 毒力基因相对转录水平检测 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-62页 |
| · LM-SB5及LM-△rli60的LD50检测结果 | 第58页 |
| · 小鼠肝脏和脾脏的载菌量检测结果 | 第58页 |
| · 小鼠肝脏、脾脏及肾脏的病理变化 | 第58-60页 |
| · 溶血活性检测结果 | 第60页 |
| · 磷脂酶活性检测结果 | 第60-61页 |
| · 巨噬细胞RAW264.7 侵染试验结果 | 第61页 |
| · 毒力基因相对转录水平检测结果 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附件 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73-75页 |
| 附件 | 第75页 |
