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单核细胞增生李斯特菌ncRNA rli60基因缺失株的构建及部分生物学特性研究

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单核细胞增生李斯特菌ncRNA rli60基因缺失株的构建及部分生物学特性研究
论文目录
 
中文摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-27页
  1 病原学特征第12-13页
  2 毒力因子及调控因子第13-23页
  3 非编码RNA研究进展第23-27页
第二章 试验内容第27-64页
  试验一 LM rli60及伴侣分子hfq基因的克隆、分子特征及其缺失株的构建与鉴定第27-46页
    1 材料第28-29页
      · 菌株与质粒第28页
      · 主要试剂及仪器第28页
      · 引物第28-29页
    2 方法第29-33页
      · rli60和hfq基因的扩增、克隆及测序鉴定第29-30页
      · rli60和hfq生物信息学分析第30-31页
      · ncRNArli60与hfq基因缺失株的构建第31-32页
      · rli60和hfq基因缺失对LM生长特性的影响第32页
      · hfq基因缺失对rli60基因转录水平的影响第32-33页
    3 结果第33-44页
      · rli60、hfq基因的扩增、克隆及测序鉴定结果第33页
      · rli60、hfq基因核苷酸及氨基酸序列分析第33-35页
      · Hfq蛋白二、三级结构及功能活性位点预测分析第35-36页
      · hfq基因的同源性比较及遗传进化分析第36-37页
      · 上、下游同源臂扩增第37-38页
      · SOE-PCR扩增结果第38页
      · 重组穿梭质粒pKSV7-△rli60与pKSV7-△hfq构建及鉴定第38-39页
      · pKSV7-△rli60与pKSV7-△hfq阳性转化子鉴定结果第39-40页
      · 同源重组菌的PCR鉴定第40-43页
      · LM-△rli60与LM-△hfq的遗传稳定性分析第43页
      · 体外培养生长特性检测结果第43页
      · rli60基因相对转录水平检测结果第43-44页
    4 讨论第44-46页
  试验二 rli60基因缺失对LM环境应激及生物膜生成能力的影响第46-54页
    1 材料第46-47页
      · 菌株第46-47页
      · 主要试剂及仪器第47页
      · 引物第47页
    2 方法第47-48页
      · ncRNA rli60基因缺失对LM环境应激能力的影响第47页
      · ncRNA rli60基因缺失对LM生物膜生成能力的影响第47-48页
      · gltB、gltC基因相对转录水平的检测第48页
    3 结果第48-52页
      · rli60基因缺失对LM温度应激能力的影响结果第48-49页
      · rli60基因缺失对LM不同pH及乙醇应激能力的影响结果第49-50页
      · rli60基因缺失对生物膜生成能力的影响结果第50-51页
      · 生物膜生成相关基因gltB、gltC相对转录水平检测结果第51-52页
    4 讨论第52-54页
  试验三 ncRNA rli60基因缺失对LM毒力的影响第54-64页
    1 材料第54-55页
      · 菌株和实验动物第54-55页
      · 主要试剂及仪器第55页
      · 引物第55页
    2 方法第55-58页
      · 小鼠半数致死量(LD50)的测定第55-56页
      · 肝脏、脾脏载菌量检测及病理变化观察第56页
      · 溶血试验第56页
      · 磷脂酶活性试验第56-57页
      · 细胞黏附、侵袭能力及胞内生存增殖能力检测第57页
      · 毒力基因相对转录水平检测第57-58页
    3 结果第58-62页
      · LM-SB5及LM-△rli60的LD50检测结果第58页
      · 小鼠肝脏和脾脏的载菌量检测结果第58页
      · 小鼠肝脏、脾脏及肾脏的病理变化第58-60页
      · 溶血活性检测结果第60页
      · 磷脂酶活性检测结果第60-61页
      · 巨噬细胞RAW264.7 侵染试验结果第61页
      · 毒力基因相对转录水平检测结果第61-62页
    4 讨论第62-64页
全文结论第64-65页
参考文献第65-71页
附件第71-72页
致谢第72-73页
作者简介第73-75页
附件第75页

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