野鸟中NDV、ALV、IBV和IBDV四重RT-PCR检测



野鸟中NDV、ALV、IBV和IBDV四重RT-PCR检测

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野鸟中NDV、ALV、IBV和IBDV四重RT-PCR检测

论文目录
摘要	第1-7页
Abstract	第7-11页
第1章综述	第11-25页
1 新城疫病毒检测方法的研究进展	第11-14页
· NDV的基本特征	第11-12页
· NDV的检测方法	第12-14页
2 禽白血病病毒检测方法的研究进展	第14-18页
· ALV的基本特征	第15页
· ALV的检测方法	第15-18页
3 禽传染性支气管炎病毒检测方法的研究进展	第18-21页
· IBV的基本特征	第18-19页
· IBV的检测方法	第19-21页
4 禽传染性法氏囊病病毒检测方法的研究进展	第21-23页
· IBDV的基本特征	第21-22页
· IBDV的检测方法	第22-23页
5 立题依据及意义	第23-25页
第2章实验材料	第25-29页
1 实验仪器	第25-26页
2 分子生物学试剂	第26页
3 实验溶液和缓冲液	第26-27页
4 细胞培养试剂	第27页
5 质粒	第27页
6 菌株	第27-28页
7 病毒株	第28页
8 细胞系	第28页
9 野鸟	第28-29页
第3章单一RT-PCR构建NDV、ALV、IBV、IBDV阳性对照质粒	第29-38页
1 实验方法	第29-34页
· 引物设计	第29页
· 细胞复苏	第29-30页
· 细胞传代培养	第30页
· 细胞冻存	第30页
· 病毒增殖	第30-31页
· RNA提取	第31页
· cDNA合成	第31页
· 单一PCR反应	第31-32页
· PCR产物纯化	第32页
· 连接	第32页
· DH5a感受态细胞制备	第32-33页
· 转化	第33页
· 质粒提取	第33页
· 双酶切验证	第33-34页
· PCR验证	第34页
· 测序验证	第34页
2 实验结果	第34-36页
· RT-PCR扩增	第34-35页
· 克隆质粒BamHI/Hind阳性克隆验证	第35页
· 测序验证	第35-36页
3 小结与讨论	第36-38页
第4章 NDV、IBV、ALV、IBDV四重RT-PCR建立	第38-46页
1 实验方法	第38-40页
· 梯度单一PCR退火温度优化	第38页
· 正交法优化四种病毒引物的比例	第38-39页
· 梯度四重PCR	第39页
· 正交法优化PCR	第39-40页
2 实验结果	第40-44页
· 单一PCR最佳退火温度	第40-41页
· 四重PCR最佳引物比例	第41-42页
· 四重PCR最佳退火温度	第42-43页
· 四重PCR最佳反应体系	第43-44页
3 小结与讨论	第44-46页
第5章四重PCR特异性、灵敏度验证	第46-51页
1 实验方法	第46-47页
· 四重PCR特异性验证	第46页
· 四重PCR灵敏度验证	第46-47页
· 四重RT-PCR灵敏度验证	第47页
2 实验结果	第47-49页
· 四重RT-PCR检测特异性验证	第47-48页
· 四重PCR检测灵敏度验证	第48页
· 四重RT-PCR检测灵敏度验证	第48-49页
3 小结与讨论	第49-51页
第6章野鸟中NDV、IBV、ALV和IBDV四重RT-PCR检测	第51-56页
1 实验方法	第51-52页
· 鸟类解剖	第51页
· RNA提取	第51页
· 四重RT-PCR检测	第51-52页
2 实验结果	第52-54页
3 小结与讨论	第54-56页
参考文献	第56-61页
在校期间发表的和待发表的论文	第61-62页
致谢	第62页

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