胡杨甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及功能分化研究



胡杨甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及功能分化研究

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胡杨甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及功能分化研究

论文目录
摘要	第1-5页
Abstract	第5-9页
1 引言	第9-21页
· 甜菜碱在植物抗逆过程中发挥的作用	第9-10页
· BADH基因简介	第10-12页
· BADH基因的结构特征	第10页
· BADH基因在体内的亚细胞定位	第10-11页
· 植物BADH基因的同源性及系统进化	第11页
· BADH基因的转录后加工	第11-12页
· BADH与胁迫相关的研究进展	第12-17页
· BADH的抗逆机制	第12-13页
· 植物BADH与盐胁迫相关的研究	第13-17页
· 植物BADH对干旱和温度胁迫的响应	第17页
· BADH在其他方面的应用	第17-18页
· BADH研究的展望	第18-19页
· 胡杨BADH研究的目的和意义	第19-21页
2 材料和方法	第21-33页
· 材料	第21页
· 实验材料	第21页
· 工具酶和试剂	第21页
· 实验方法	第21-33页
· 基因的搜索和拼接	第21页
· 蛋白质结构域分析	第21页
· 克隆引物设计	第21-23页
· 总DNA提取	第23页
· 总RNA提取	第23页
· RNA的DNaseⅠ处理	第23-24页
· 反转录	第24-25页
· PCR扩增	第25页
· 基因组PCR扩增	第25-26页
· DNA回收	第26页
· 连接	第26-27页
· 大肠杆菌JM109感受态细胞的制备	第27-28页
· 转化	第28页
· 菌落PCR检验阳性克隆与保菌、测序	第28-29页
· 重组载体质粒提取	第29页
· 系统发生关系分析	第29页
· 胡杨BADH基因的组织表达模式分析	第29-30页
· 表达引物的设计	第30页
· 基因克隆与测序	第30页
· 重组质粒提取	第30-31页
· 双酶切	第31页
· 目的基因与表达载体的连接	第31-32页
· 重组表达载体的转化	第32页
· 融合蛋白的原核表达	第32-33页
· 胡杨BADH蛋白的酶学性质测定	第33页
· 胡杨BADH蛋白热力学稳定性的测定	第33页
· 胡杨BADH蛋白结构模拟	第33页
3 结果与分析	第33-52页
· 胡杨BADH基因序列的鉴定与命名	第33-34页
· 胡杨基因组DNA及总RNA的提取	第34-35页
· PCR扩增	第35-37页
· 克隆载体构建	第37-38页
· 测序与序列分析	第38-41页
· 基因结构分析	第41页
· 植物BADH蛋白的序列比对与相似性分析	第41-44页
· 系统进化分析	第44-46页
· 胡杨不同组织RNA提取	第46页
· RT-PCR检测	第46-47页
· 表达载体构建	第47-48页
· 融合蛋白的表达	第48-49页
· 蛋白表达形式的鉴定	第49页
· 融合蛋白的纯化	第49-50页
· 酶活测定	第50页
· 胡杨BADH蛋白的热力学稳定性分析	第50-51页
· 胡杨BADH蛋白三维结构模建	第51-52页
4 讨论	第52-54页
5 总结	第54-55页
参考文献	第55-60页
个人简介	第60-61页
导师简介	第61-62页
致谢	第62页

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