论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 缩略词 | 第14-16页 |
| 引言 | 第16-19页 |
| 第一部分 慢病毒介导的shRNA下调HDAC1表达对hUC-MSCs增殖和神经分化的影响 | 第19-38页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 1.1 材料与方法 | 第20-30页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第20-22页 |
| 1.1.2 脐带组织标本的获取 | 第22页 |
| 1.1.3 hUC-MSC的分离、培养、冻存及传代 | 第22-23页 |
| 1.1.4 hUC-MSC细胞表面抗原检测 | 第23页 |
| 1.1.5 高效shRNA干扰片段的筛选及重组慢病毒的合成 | 第23-24页 |
| 1.1.6 重组慢病毒复感染指数的筛选及稳定细胞系的建立 | 第24-25页 |
| 1.1.7 CCK-8 法检测细胞增殖情况 | 第25页 |
| 1.1.8 PI染色检测细胞周期情况 | 第25页 |
| 1.1.9 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA感染hUC-MSCs细胞后的成神经分化情况 | 第25-29页 |
| 1.1.10 统计学分析 | 第29-30页 |
| 1.2 结果 | 第30-36页 |
| 1.2.1 不同时期hUC-MSCs的显微结构 | 第30页 |
| 1.2.2 hUC-MSCs表面标记物的鉴定 | 第30-31页 |
| 1.2.3 靶向下调HDAC1表达的shRNA片段的筛选 | 第31页 |
| 1.2.4 确立合适的MOI值及建立LV-HDAC1shRNA稳定细胞系 | 第31-32页 |
| 1.2.5 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对P5代hUC-MSCs细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 1.2.6 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对hUC-MSCs乙酰化水平的影响 | 第33-34页 |
| 1.2.7 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对hUC-MSCs细胞周期的影响 | 第34-35页 |
| 1.2.8 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA诱导hUC-MSCs向神经分化的情况 | 第35-36页 |
| 1.3 讨论 | 第36-37页 |
| 1.4 小结 | 第37-38页 |
| 第二部分 LV-HDAC1 shRNA的感染hUC-MSCs对TBI小鼠的神经修复作用 | 第38-59页 |
| 前言 | 第38-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-48页 |
| 2.1.1 动物来源 | 第39页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第39-41页 |
| 2.1.3 实验动物分组 | 第41页 |
| 2.1.4 TBI脑损伤动物模型的建立及侧脑室移植 | 第41-42页 |
| 2.1.5 小鼠死亡率统计和生理体征观察 | 第42页 |
| 2.1.6 小鼠神经功能缺损情况的评估 | 第42-44页 |
| 2.1.7 小鼠学习记忆能力评估 | 第44-45页 |
| 2.1.8 小鼠脑含水量检测 | 第45页 |
| 2.1.9 小鼠主动脉灌流和脑切片制备 | 第45页 |
| 2.1.10 小鼠脑损伤体积检测 | 第45-46页 |
| 2.1.11 Elisa检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达 | 第46-47页 |
| 2.1.12 Elisa检测小鼠血清中GSH-Px、GSH、SOD、MDA的表达 | 第47页 |
| 2.1.13 Western Blot检测细胞移植后小鼠脑损伤部位乙酰化水平 | 第47页 |
| 2.1.14 qRT-PCR检测小鼠神经分化相关基因与神经营养因子的表达情况 | 第47-48页 |
| 2.1.15 统计学分析 | 第48页 |
| 2.2 结果 | 第48-56页 |
| 2.2.1 术后各组小鼠的致死及体重变化情况 | 第48页 |
| 2.2.2 术后各组小鼠的脑损伤体积变化情况 | 第48-49页 |
| 2.2.3 术后各组小鼠的脑含水量的比较 | 第49-50页 |
| 2.2.4 术后各组小鼠脑损伤部位乙酰化水平的比较 | 第50-51页 |
| 2.2.5 术后小鼠血清中炎症相关因子表达的比较 | 第51-52页 |
| 2.2.6 术后小鼠血清中氧化应激相关因子表达的比较 | 第52页 |
| 2.2.7 术后小鼠神经功能的恢复情况 | 第52-53页 |
| 2.2.8 术后小鼠学习认知水平的恢复情况 | 第53-55页 |
| 2.2.9 术后各组小鼠神经分化相关基因与神经营养因子的表达情况 | 第55-56页 |
| 2.3 讨论 | 第56-58页 |
| 2.4 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 综述 组蛋白去乙酰化酶与神经修复 | 第66-77页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 附录 实验主要设备及耗材 | 第77-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
