论文目录 | |
缩略语表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-14页 |
Abstract | 第14-18页 |
前言 | 第18-19页 |
文献回顾 | 第19-28页 |
第一部分 GENISTEIN 及其改构体 KBU2046 在体外对胃癌细胞转移的抑制作用 | 第28-42页 |
1 材料 | 第29-30页 |
1.1 细胞株 | 第29页 |
1.2 慢病毒 | 第29页 |
1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
1.4 主要仪器 | 第30页 |
2 方法 | 第30-34页 |
2.1 细胞培养:(复苏及传代) | 第30-31页 |
2.2 药物细胞毒性杀伤实验 | 第31-32页 |
2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第32页 |
2.4 高内涵实验 | 第32-33页 |
2.5 侵袭、迁移、划痕实验 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-40页 |
3.1 Genistein 及改构体 KBU2046 对体外胃癌细胞的药物剂量效应实验 | 第34-37页 |
3.2 Genistein 及改构体 KBU2046 在抑制肿瘤细胞侵袭、迁移中的作用 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
第二部分 GENISTEIN 及 KBU2046 抑制胃癌细胞转移的机制研究 | 第42-52页 |
1 材料 | 第42页 |
2 方法 | 第42-47页 |
2.1 PCR Array 样品准备 | 第42-43页 |
2.2 RNA 提取 | 第43页 |
2.3 反转录 | 第43-44页 |
2.4 实时荧光定量 PCR 反应 | 第44页 |
2.5 引物序列 | 第44-45页 |
2.6 制备、浓缩条件培养液 | 第45页 |
2.7 蛋白提取 | 第45-46页 |
2.8 BCA 法法测定蛋白浓度 | 第46页 |
2.9 Western blotting | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-50页 |
3.1 PCR Array 筛选 Genistein 及 KBU2046 发挥抑制胃癌转移作用的靶基因 | 第47-49页 |
3.2 定量 PCR 及 WB 验证筛选结果 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第三部分 裸鼠尾静脉注射肿瘤转移模型建立以及 GENISTEIN 药物灌胃对肿瘤转移的影响 | 第52-59页 |
1 材料 | 第52页 |
2 方法 | 第52-55页 |
2.1 细胞感染 Luciferase 标记 | 第52-53页 |
2.2 体外验证细胞转染效率 | 第53页 |
2.3 尾静脉注射肿瘤转移体内成像 | 第53-55页 |
3 结果 | 第55-58页 |
3.1 体外验证 Luciferase 标记细胞生物放光效果 | 第55-57页 |
3.2 Genistein 对体内胃癌细胞转移的影响 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-59页 |
第四部分 裸鼠胃癌原位转移模型的建立 | 第59-64页 |
1 材料 | 第59页 |
2 方法 | 第59-61页 |
2.1 原位胃癌转移模型的建立 | 第59-61页 |
3 结果 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
个人简历和研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |